第一章 基因工程制药概论 1
第一节 基因工程制药的发展历史 1
一、传统的生物制药技术是现代生物制药的基础 1
二、基因工程制药是现代生物技术制药发展的核心 2
三、基因工程制药的现状及前景 3
第二节 基因工程药品的研发过程 4
一、基因工程药品的实验室研究阶段 5
二、基因工程药品的开发阶段 5
三、基因工程药品的临床实验 6
参考文献 7
第二章 基因工程制药 9
第一节 制药基因的克隆 9
一、制药基因的获得 9
二、制药基因与载体分子的体外连接反应 15
三、将人工重组DNA分子导入到能够正常复制的宿主细胞中 23
四、重组子的鉴定和筛选 24
第二节 重组蛋白表达系统 25
一、原核表达系统 25
二、酵母表达系统 28
三、昆虫细胞表达系统 31
四、哺乳动物细胞表达系统 33
五、转基因植物表达系统 37
六、转基因动物表达系统 40
七、表达系统的选择 43
第三节 蛋白的分离纯化 43
一、蛋白样品的前期处理 44
二、蛋白分离纯化主要方法 44
三、包涵体的分离纯化 53
四、抗体的分离纯化 56
第四节 转染技术 58
一、转染方法 58
二、优化转染条件 63
三、报告基因 63
第五节 融合标签 65
一、融合标签的特征及分类 65
二、融合标签各论 65
第六节 已投入市场的基因工程药物 70
一、治疗用激素 70
二、干扰素 77
三、造血因子和凝血因子 81
四、白细胞介素 85
五、最新投入市场的药物 86
参考文献 87
第三章 抗体工程制药 88
第一节 抗体 88
一、抗原、抗体的概念及抗原抗体的关系 88
二、抗体的分子结构、功能及其酶解片段 88
三、免疫球蛋白基因的结构和抗体多样性 96
第二节 单克隆抗体 100
一、单克隆抗体产生的基本原理 100
二、单克隆抗体的应用 101
第三节 基因工程抗体 102
一、基因工程抗体的特点 102
二、基因工程抗体的应用 102
第四节 抗体的氨基酸顺序 105
第五节 抗体分子的克隆 108
一、抗体基因克隆的方法 108
二、抗体基因克隆中的重要技术环节 110
三、嵌合抗体 113
四、改形抗体 115
五、表面氨基酸残基的“人源化”——镶面抗体 119
六、表位印迹选择 119
七、单链抗体 120
八、双特异性及多特异性抗体 123
九、小分子抗体 127
第六节 筛选抗体克隆的展示技术 129
一、噬菌体展示技术 129
二、酵母表面展示系统 132
三、核糖体展示技术 134
四、细菌表面展示技术 136
五、噬斑印迹 138
六、质粒展示技术 138
第七节 抗体亲和力的优化 140
一、鼠源及其嵌合抗体的人源化 140
二、通过改进亲和力来增加抗体的功效 140
三、通过选择性的改进结合速率常数增加抗体功效 141
四、构建广谱抗体 141
第八节 抗体药物 142
一、概述 142
二、FDA已批准的部分抗体（按时间顺序排列） 143
参考文献 150
第四章 基因工程药物设计与研制方法 151
第一节 重组蛋白药物的复制 151
一、复制生物技术药品的一般技术流程 152
二、复制重组蛋白药品存在的问题 152
第二节 通过对现有药物的优化和改造研发新药 154
一、定向突变 155
二、定点突变 160
三、糖基化工程与新药研究 166
第三节 创新药物设计 167
一、通过筛选同源基因的方法发现新的药物基因或药物靶基因 168
二、通过RNA的表达谱筛选新的药物基因和靶基因 168
三、蛋白组学 168
四、使用寡核苷酸技术证实药物分子 169
五、基因功能的系统分析 169
六、使用生物模型发现新药 170
七、新药开发的展望 171
参考文献 171
第五章 基因工程疫苗 173
第一节 疫苗的概述 173
一、疫苗发展简史 173
二、疫苗的种类 174
三、疫苗基本成分和性质 174
四、疫苗免疫途径 175
第二节 传统疫苗及其研发原则 176
一、灭活疫苗 176
二、弱毒疫苗 178
第三节 基因工程疫苗及其研发原则 180
一、合成多肽疫苗及其研发原则 180
二、亚单位疫苗及其研发原则 181
三、基因缺失疫苗及其研发原则 182
四、重组活载体疫苗及其研发原则 183
五、核酸疫苗及其研发原则 187
第四节 其他疫苗 190
一、T细胞疫苗 190
二、树突状细胞疫苗 191
三、肿瘤疫苗 194
四、避孕疫苗 195
第五节 免疫佐剂 196
一、免疫佐剂的定义和特点 196
二、佐剂的种类 197
参考文献 201