第一章 绪论 1
一、干细胞的概念 1
二、干细胞的分类 1
三、干细胞的获得 2
四、主要干细胞 3
(一)胚胎干细胞 3
(二)成体干细胞 4
(三)造血干细胞 5
(四)神经干细胞 5
(五)基础干细胞 6
(六)胎盘干细胞 7
(七)脂肪干细胞 8
(八)表皮干细胞 8
(九)全能干细胞 9
五、成体干细胞与胚胎干细胞的比较 10
六、成体干细胞与胚胎干细胞的融合 11
七、人胚胎干细胞系的建立 11
八、胚胎干细胞生物学特性的检测 15
(一)胚胎的阶段特异性细胞表面抗原(SSEA-1) 16
(二)Oct-4活性 16
(三)染色体G带技术 16
(四)碱性磷酸酶(AKP)活性的检测 16
(五)葡萄糖磷酸异构酶(GPI)检测 17
(六)体内体外分化 17
九、胚胎干细胞体外定向诱导分化为浆细胞 17
(一)干细胞的制备和诱导 18
(二)胚胎干细胞的分化、培养 18
(三)骨髓基质细胞饲养层的作用 20
(四)诱导浆细胞出现的因素 20
第二章 干细胞疗法 21
一、概述 21
二、造血干细胞的关键性标志物(KDR) 22
三、神经原干细胞重建造血 24
四、干细胞疗法的用途 27
五、干细胞移植的适应症 27
(一)干细胞移植已用于临床 27
(二)干细胞移植拟用于临床 27
(三)干细胞移植处于临床实验阶段 28
六、干细胞移植的临床应用 28
七、利用胚胎干细胞构建新药筛选模型 32
八、胚胎干细胞:热点和伦理禁区 33
九、探索不破坏胚胎发育获取人类胚胎干细胞的方法 35
第三章 干细胞的可塑性 37
一、干细胞分化的复杂性 37
二、干细胞决定子代细胞的分化 38
三、干细胞控制分化的基因 39
四、氧含量决定干细胞分化 39
五、神经干细胞转化造血细胞的研究 40
六、骨髓细胞转化为其他组织细胞 41
七、骨髓间充质细胞分化为肝卵圆细胞 42
八、骨骼肌间叶细胞转化造血细胞 43
九、成年动物神经干细胞培育出肌肉细胞 45
第四章 细胞因子的特性和作用 47
一、干细胞因子的特性和作用 47
(一)干细胞因子结构 47
(二)干细胞因子的克隆与表达 48
(三)干细胞因子的生理作用 49
(四)干细胞因子的临床作用 50
二、肝细胞生长因子减轻心肌梗塞后心肌损伤 52
三、T细胞生长因子 53
四、胰岛细胞增生因子 53
五、金属蛋白酶-9促进成人干细胞生长 55
第五章 外周造血干细胞移植 56
一、概况 56
(一)骨髓移植 56
(二)外周血干细胞移植 56
(三)外周血造血干细胞移植的历史 57
二、造血干细胞的生物学特性 58
(一)作用 58
(二)特征 59
(三)造血干细胞/祖细胞及其相互关系 59
三、人造血细胞的端粒-端粒酶的研究 60
四、外周血干细胞移植的特点 61
五、外周血干细胞移植的适应症 62
(一)恶性疾病 62
(二)非恶性疾病 62
六、外周血干细胞移植的关键技术 65
(一)外周血干细胞/祖细胞的动员 65
(二)外周血干细胞/祖细胞的分离、纯化和采集 66
(三)外周血干细胞/祖细胞的体外扩增 66
(四)自身外周血干细胞/祖细胞移植物的体外净化 66
七、外周血干细胞/祖细胞的特性 67
(一)外周血干细胞/祖细胞物理特性和含量 67
(二)外周血干细胞/祖细胞的表型特点 67
(三)外周血干细胞/祖细胞的功能特性 68
八、外周血干细胞存在证据的研究简史 69
九、造血干细胞的保存 70
(一)冷冻方式 70
(二)冷冻保护液 71
(三)保存温度 72
(四)冷冻保存造血干细胞的细胞浓度 73
(五)解冻 73
第六章 脐血造血干细胞移植 74
一、概述 74
二、脐血干细胞的来源及作用 74
三、脐血造血干细胞的特征 78
(一)脐血造血干细胞的生物学特性 78
(二)脐血造血干细胞的临床应用 78
(三)脐血的免疫学特征 79
四、脐血的采集、分离、保存和回输 80
(一)脐血采集的适应症、禁忌症 80
(二)脐血的采集方法 81
(三)影响脐血采集的因素 82
(四)脐血的分离 82
(五)脐带血采集常用抗凝剂 82
(六)脐血的保存 83
(七)脐血回输 84
五、脐血造血细胞培养的特性 84
六、脐血干细胞库建立意义的争论 87
(一)脐血干细胞能否用于成人 88
(二)建立脐血干细胞库的作用 89
第七章 CD34-细胞造血干细胞移植 90
一、造血干细胞的检测方法 90
二、CD34-Lin-细胞群中含有造血干细胞的证据 91
三、CD34-Lin-细胞的体外培养特性 94
四、CD34-Lin-细胞在不同来源造血组织中的分布 96
五、CD34-Lin-细胞移植前景 97
第八章 造血干细胞移植相关技术的研究 98
一、中心静脉导管在造血干细胞移植中的作用 98
(一)概况 98
(二)中心静脉置管在造血干细胞移植中的意义 99
(三)穿刺部位的选择 99
(四)穿刺方向、插管长度的确定 100
(五)置管后感染的预防和导管血栓处理 100
二、肠外营养在造血干细胞移植中的应用 102
(一)干细胞移植方法 103
(二)肠外营养支持治疗 104
三、干细胞移植、保存、浓集相关问题的研究 106
(一)低温保存造血干细胞新方法 106
(二)长时间保存干细胞方法 107
(三)干细胞移植存活率 107
(四)干细胞富集新方法 109
(五)干细胞浓集和净化 109
(六)干细胞通用标记 110
第九章 干细胞移植中感染的防治 112
一、细菌感染的预防 112
(一)概况 112
(二)临床分析 113
二、肝炎病毒感染的防治 114
(一)乙型肝炎病毒感染及治疗 114
(二)丙型肝炎病毒感染及治疗 116
(三)丁型肝炎病毒感染及治疗 117
(四)庚型肝炎病毒感染及治疗 117
三、造血干细胞移植预防真菌感染 117
(一)真菌感染的诊断标准 118
(二)临床资料 118
(三)临床监测 118
(四)预防性抗真菌治疗方案 118
(五)结果分析 119
第十章 神经干细胞移植及临床应用 121
一、神经干细胞的概念 121
二、神经干细胞的研究 122
(一)神经干细胞的分离、体外扩增及分化 122
(二)神经干细胞的在体研究 124
(三)胚胎干细胞的定向分化 125
三、神经干细胞的移植研究 126
四、神经干细胞的应用前景 127
(一)神经系统疾病的基因导入治疗 127
(二)中枢神经系统退行性疾病及损伤的细胞移植 127
五、神经干细胞的分离培养鉴定 130
(一)神经干细胞的分离和传代 131
(二)stin抗原的表达和BrdU标记 131
(三)诱导分化结果 131
第十一章 干细胞移植治疗植物人 135
一、概况 135
二、植物人临床诊断 136
(一)国内专家推荐的“植物人状态“诊断标准 136
(二)植物人的辅助检查 136
(三)植物人与临床诊断 137
三、植物人治疗 137
(一)外部药力可使脑细胞明显增殖 137
(二)人胚胎脑细胞移植 138
(三)原位神经干细胞诱导、分化 140
四、人胚胎脑细胞移植治疗植物人手术室准备 140
五、植物人的流行病学 141
六、植物人与脑死亡的区别 142
七、植物人的诊断及评分标准 142
八、脑细胞移植治疗帕金森病 146
(一)脑细胞移植的解剖生理基础 146
(二)生理学基础 146
(三)脑内细胞移植的历史和现状 147
(四)基础实验研究 147
(五)脑细胞移植治疗帕金森病的临床应用 148
九、胚胎脑组织的冷冻保存、培养和移植 148
(一)供体 148
(二)冷冻保存及复苏 149
(三)培养 149
十、神经细胞再塑在脑梗塞患者中的作用 150
(一)卒中后大脑皮质功能的重建 150
(二)神经功能重建的机制与影响因素 151
第十二章 干细胞移植对脊髓损伤的应用 153
一、脊髓损伤的病理变化及损伤机制 153
二、移植治疗脊髓损伤 154
(一)胚胎干细胞移植 154
(二)胚胎神经组织移植 154
(三)胎儿中枢神经组织移植 155
(四)神经干(前体)细胞移植 156
(五)胚胎脊髓组织移植 157
(六)嗅神经胶质细胞移植治疗脊髓损伤 157
(七)其他细胞移植 158
三、药物治疗 160
(一)类固醇 160
(二)神经节甙脂(GML) 160
(三)阿片受体拮抗剂 160
(四)钙通道阻断剂 161
(五)环己米特放线菌 161
(六)东莨菪碱 161
四、手术治疗 161
五、其他疗法 162
(一)电刺激 162
(二)高压氧治疗 162
(三)自血光量子疗法(ALO) 162
(四)局部脊髓冷疗 162
第十三章 造血干细胞移植治疗自身免疫性疾病 163
一、概况 163
(一)理论基础 164
(二)造血干细胞移植治疗动物自身免疫性疾病研究 164
(三)人类自身免疫性疾病和造血干细胞移植 165
二、造血干细胞移植治疗风湿病 165
(一)造血干细胞移植治疗风湿病的理论与实践 166
(二)造血干细胞移植治疗风湿病的临床应用 167
三、干细胞移植治疗系统性红斑狼疮 169
(一)干细胞移植治疗系统性红斑狼疮 169
(二)干细胞移植治疗系统性红斑狼疮的护理 170
第十四章 胰岛细胞移植治疗糖尿病 171
一、胰岛细胞移植治疗糖尿病临床研究 171
(一)移植效果评定标准 171
(二)移植部位 172
(三)移植分类 172
(四)胰岛的分离 173
(五)胰岛活性的鉴定与计数 174
(六)胰岛组织的保存 174
(七)胰岛的移植量 175
二、微囊化胰岛细胞移植进展 175
(一)概述 175
(二)A-P-A微囊化原理及过程 175
(三)微囊化胰岛供体的来源 176
(四)微囊制备的影响因素 176
(五)微囊胰岛的氧及营养物质供应 177
(六)微囊的因素 178
(七)微囊周围纤维化的原因 179
第十五章 干细胞移植在治疗肿瘤中的应用 180
一、概述 180
(一)干细胞的生物学特性 180
(二)肿瘤放疗、化疗后的干细胞支持治疗 181
(三)肿瘤免疫联合干细胞移植 181
(四)干细胞与细胞、组织或器官替代治疗 182
(五)干细胞与肿瘤基因治疗 183
二、造血干细胞移植治疗乳腺癌 184
(一)概况 184
(二)自体造血干细胞移植治疗乳腺癌的原理 184
(三)自体造血干细胞移植类型 185
(四)自体造血干细胞移植的程序 186
三、免疫磁性细胞分选技术净化乳腺癌自体造血干细胞的实验研究 188
(一)对乳腺癌细胞系的净化效果 188
(二)乳腺癌患者外周造血干细胞净化效果 188
(三)冷冻保存时间对联合净化效果的影响 188
(四)净化效果评价 189
四、超大剂量化疗联合干细胞移植治疗卵巢癌 189
(一)超大剂量化疗和造血干细胞移植 190
(二)超大剂量化疗加造血干细胞移植在治疗卵巢癌中的应用 190
(三)超大剂量化疗加外周血干细胞移植治疗卵巢癌目前存在的问题 190
(四)卵巢冷冻保存 191
(五)卵巢移植 192
(六)超大剂量化疗加外周血干细胞移植治疗卵巢癌的并发症 193
(七)干细胞移植治疗卵巢癌的展望 193
五、高剂量化疗联合再次自体外周血干细胞移植治疗骨肉瘤 193
六、神经干细胞治疗脑癌 194
七、外周血干细胞治疗肾癌 195
第十六章 造血干细胞移植治疗重型β地中海贫血 198
一、概述 198
二、造血干细胞移植的种类 199
(一)骨髓移植 199
(二)外周造血干细胞移植 203
(三)脐血移植 204
(四)宫内造血干细胞移植 205
三、重型β地中海贫血移植后的并发症及防治 205
四、地中海贫血治疗的进展 206
(一)一般治疗 206
(二)药物治疗 207
第十七章 细胞及细胞因子治疗急性心肌梗塞 209
一、胚胎干细胞体外诱导分化为心肌细胞 209
(一)方法 209
(二)不同浓度的RA、DMSO和FCS对鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化的影响 211
(三)结果 212
二、骨骼肌干细胞移植对心肌的影响 213
三、人类胚胎干细胞分化成心肌细胞 214
四、体外培养心肌细胞 215
五、细胞因子对大鼠急性心肌梗塞的影响 216
六、造血干细胞“自身移植”将完全修复受损心肌 218
第十八章 干细胞移移植在肝病、白癜风治疗中的应用 220
一、干细胞移植在肝病治疗中的应用 220
(一)肝卵圆形细胞及其分化 220
(二)对人类肝干细胞的研究 221
(三)肝干细胞临床应用的研究进展 222
(四)现代生物人工肝支持作用 223
二、干细胞移植治疗白癜风 224
(一)自体表皮移植治疗白癜风 224
(二)表皮移植治疗白癜风的影响因素 227
第十九章 干细胞移植治疗眼科疾病的应用 229
一、角膜缘干细胞移植 229
(一)自体角膜缘干细胞移植 229
(二)同种异体角膜缘干细胞移植 230
(三)自体角膜缘干细胞培养和移植 231
二、视网膜色素上皮细胞移植的研究 232
(一)实验方法 233
(二)实验结果 234
(三)植入视网膜色素上皮细胞的作用 234
(四)移植免疫 234
三、羊膜干细胞联合移植治疗眼伤 235
(一)患眼的处理 235
(二)羊膜制备 236
(三)干细胞获得 236
(四)羊膜和干细胞联合移植 236
(五)结果 236
四、人角膜缘干细胞培养 237
(一)细胞的冻存与复苏 237
(二)培养基的选择 238
第二十章 间质干细胞在骨损伤中的应用 239
一、骨髓间充质干细胞的分离与培养 239
二、不同材料对人骨髓间充质干细胞增殖的影响 240
三、骨损伤修复中成纤维细胞的作用 241
(一)成纤维细胞 241
(二)成纤维细胞在创伤修复中的作用 242
(三)成纤维细胞在骨创伤修复中的作用 243
(四)成纤维细胞的成骨作用 243
(五)成纤维细胞体外培养的生物学特性 245
(六)成纤维细胞在体外培养中的成骨作用 246
(七)成纤维细胞在骨损伤修复中的展望 248
四、骨科领域中的胚胎组织器官移植研究 249
(一)胎儿组织的特性 249
(二)胎儿软骨移植 249
(三)胎儿骨膜移植 250
第二十一章 组织工程材料及细胞支架研究 251
一、组织工程学的概念及发展历史 251
二、组织工程种子细胞的研究 255
三、组织工程对生物材料的研究 255
(一)组织工程对生物材料的基本要求 255
(二)生物降解高分子 256
(三)细胞支架材料的细胞亲和性 257
(四)细胞支架材料三维结构的构筑 258
(五)生长因子的活性保护及控制释放 259
四、组织工程的作用 260
五、组织工程存在的问题 261
六、组织工程的发展趋势 262
七、组织工程的研究成果和发展方向 263
参考文献 264