第一部分 生命科学实验技术原理第一章 电泳技术 1
第一节 概述 1
第二节 电泳的基本原理 2
第三节 区带电泳技术 7
第四节 染色方法 23
第二章 层析技术 29
第一节 概述 29
第二节 层析技术的基本理论 31
第三节 层析定性与定量分析 38
第四节 常用的层析方法 41
第三章 分光光度法 54
第一节 概述 54
第二节 光吸收的基本规律 57
第三节 分光光度计的构造和类型 58
第四节 定性、定量方法及其应用 61
第五节 双波长分光光度计及其测定方法 62
第四章 超离心技术 66
第一节 概述 66
第二节 超离心分离方法 70
第三节 密度梯度液的制备和区带收集 75
第四节 制备超离心机做沉淀分析 79
第五章 生物大分子的分离纯化与鉴定 80
第一节 生物大分子制备的前处理 80
第二节 分离纯化 82
第三节 生物大分子的浓缩、干燥和保存 83
第四节 生物大分子含量的测定和纯度鉴定 85
第六章 放射性同位素示踪技术 87
第七章 酵母双杂交技术 96
第八章 DNA重组技术 100
第九章 核酸分子杂交技术 110
第十章 聚合酶链反应技术 122
第二部分 实验内容 124
第十一章 生物化学实验 124
实验一 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳 124
实验二 血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳 126
实验三 圆盘电泳分离LDH同工酶 129
实验四 氨基酸双向纸层析 132
实验五 动物组织DNA的提取和鉴定 134
实验六 动物组织RNA的提取和鉴定 136
实验七 影响酶活性的因素 137
实验八 胡萝卜素的柱层析分离 144
实验九 肝糖原的提取鉴定与定量 145
实验十 血糖浓度的测定与胰岛素、肾上腺素对血糖浓度影响 147
实验十一 运动后血中乳酸含量的变化 149
实验十二 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 151
实验十三 血清总胆固醇测定（磷硫铁法） 152
实验十四 琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制 153
实验十五 氨基酸的薄层层析 154
实验十六 血清丙氨酸氨基转移酶活性测定 155
实验十七 凝胶层析分离血红蛋白与CuSO4 159
实验十八 血清总蛋白的测定及标准曲线的制作（双缩脲法） 160
实验十九 血清尿素氮的测定 162
实验二十 3H-胸苷掺入DNA的试验 163
实验二十一 32P掺入磷脂的试验 164
第十二章 分子生物学与基因工程实验 167
实验一 质粒DNA的微量快速提取 167
实验二 质粒DNA的酶切与鉴定 169
实验三 聚合酶链反应技术（PCR） 170
实验四 DNA重组与鉴定 173
实验五 DNA印迹杂交技术 175
实验六 肝总RNA的制备 179
实验七 克隆化基因在大肠埃希菌的诱导表达 182
实验八 哺乳动物细胞的转染 183
实验九 蛋白质印迹免疫分析 185
实验十 DNA的提取 188
实验十一 细胞培养实验 189
实验十二 细胞凋亡检测 190
实验十三 用电穿孔方法将重组质粒转化细菌 192
实验十四 Northern杂交技术 193
第十三章 生化技术实验 196
实验一 血红蛋白及其衍生物的吸收光谱测定 196
实验二 核酸溶液的紫外吸收测定 197
实验三 蛋白质溶液的紫外吸收测定 198
实验四 SDS-PAGE分离蛋白质 200
实验五 蛋白质定量测定Folin-酚试剂法（Lowry法） 203
实验六 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦分离血清蛋白质 204
实验七 血清脂蛋白快速超离心分离实验 206
实验八 DEAE纤维素离子交换层析法分离血清蛋白质 206
实验九 亲和层析法纯化胰蛋白酶 208
实验十 血清白蛋白、γ球蛋白的分离纯化及鉴定 211
实验十一 密度梯度离心法分离肝细胞器 215
实验十二 外周血DNA的快速提取 216
第十四章 酶工程实验 218
实验一 凝血酶的固定化及固定化凝血酶的稳定性测定 218
实验二 固定化具有葡萄糖异构酶活性菌体的制备 219
实验三 Cu·Zn超氧化物歧化酶的分离与纯化 219
实验四 细胞色素c的制备和含量测定 222
实验五 绿豆芽中酸性磷酸酯酶的提取 224
实验六 pH对酶活力的影响——最适pH的测定 225
实验七 温度对酶活力的影响——最适温度的测定 226
实验八 底物浓度和抑制剂对酶活力的影响——Km和Ki的测定 227
实验九 酶促反应速度与时间的关系——初速度时间范围的测定 229
附录 231
附录1 生物化学实验的基本操作及原理 231
附录2 常用容量仪器的规格、使用、清洗及洗液的配制 235
附录3 化学试剂的规格与保管 239
附录4 实验室常用设备介绍 240
附录5 分子生物学常用试剂 242