第一部分 微生物发酵工程理论知识与技术策略一、微生物发酵工程的共性问题 3
（一）菌种选育和优化技术 3
（二）培养基的设计及其改良 4
（三）发酵过程的优化与生物反应器 4
（四）发酵行业清洁生产和废弃物资源化 6
二、微生物发酵工程技术方法 6
（一）代谢产物的过量生产 7
（二）提高初级代谢产物产量的方法 10
（三）提高次级代谢产物产量的方法 11
三、微生物发酵工程下游分离纯化技术策略 12
（一）微生物发酵产品的特点 12
（二）分离纯化技术需满足的要求 12
（三）下游工艺的技术特点 13
（四）分离纯化方法应遵循的准则 18
第二部分 微生物发酵工程综合实验内容综合实验一 生物降解材料聚羟基脂肪酸酯的微生物发酵合成 21
实验1-1 PHA合成细菌的分离与纯化 26
实验1-2 利用计算机微生物分类鉴定系统进行微生物的分类鉴定 31
实验1-3 微生物发酵法制备生物降解材料聚羟基脂肪酸酯（摇瓶） 36
实验1-4 发酵设备的工作原理及其使用方法 40
实验1-5 微生物发酵法制备生物降解材料聚羟基脂肪酸酯（发酵罐） 47
实验1-6 发酵液中溶解氧和基质葡萄糖含量的测定 50
实验1-7 发酵液的膜过滤和菌体的冷冻干燥 55
实验1-8 PHA的溶剂抽提和抽提液的浓缩 60
实验1-9 PHA样品沉淀、减压干燥、核磁共振检测样品管的准备 64
综合实验二 燃料油的微生物脱硫 68
实验2-1 燃料油微生物脱硫菌种的制备 75
实验2-2 红平红球菌对硫源的选择性 78
实验2-3 DBT微生物脱硫产物的定量分析 83
实验2-4 30L自控发酵罐分批发酵法脱除DBT中的有机硫 85
实验2-5 发酵液中DBT含量的测定 89
实验2-6 DBT脱硫产物在油／水两相中的分配系数测定 92
实验2-7 利用休止细胞脱除模拟燃油中的有机硫 95
综合实验三 谷氨酸的微生物发酵 97
实验3-1 谷氨酸摇瓶发酵 103
实验3-2 发酵过程中还原糖的测定 105
实验3-3 发酵过程中谷氨酸含量的测定 108
实验3-4 谷氨酸发酵生产菌种的制备 112
实验3-5 30L自控发酵罐分批发酵法生产谷氨酸 115
实验3-6 谷氨酸发酵液超滤除菌体与离子交换回收 119
实验3-7 谷氨酸含量及纯度的HPLC分析方法 122
综合实验四 黄原胶的微生物发酵 125
实验4-1 野油菜黄单胞菌NK-01菌株摇瓶发酵黄原胶 133
实验4-2 黄原胶高产菌株育种研究之一——紫外线诱变育种 135
实验4-3 黄原胶高产菌株育种研究之二——高淀粉酶活性、杆菌肽高抗性菌株筛选 138
实验4-4 优化突变菌株的发酵培养基（单因素实验和正交实验） 142
实验4-5 10L自控发酵罐分批发酵生产黄原胶 148
实验4-6 从发酵液中分离提取工业级黄原胶 152
实验4-7 黄原胶溶液性能测定 154
综合实验五 苏云金芽孢杆菌微生物杀虫剂的发酵制造 157
实验5-1 苏云金芽孢杆菌菌株、伴孢晶体和芽孢的形态观察 158
实验5-2 苏云金芽孢杆菌菌株分离及纯化 160
实验5-3 苏云金芽孢杆菌Total DNA的提取、纯度测定和定量分析 163
实验5-4 PCR检测杀虫基因 166
实验5-5 苏云金芽孢杆菌10L自控罐发酵 171
实验5-6 苏云金芽孢杆菌毒力的生物测定 175
实验5-7 SDS-PAGE检测杀虫蛋白含量 178
参考文献 181