基础篇 3
1 碱法提取质粒 3
2 煮沸法提取质粒 12
3 质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳 16
4 质粒的限制性内切酶反应分析 22
5 用玻璃奶回收琼脂糖凝胶中的DNA 28
6 DNA的连接 31
7 E.coli DH5α感受态细胞的制备及转化 36
8 植物总RNA的提取 41
9 聚合酶链反应——PCR 45
10 cDNA末端快速扩增——RACE 51
11 高通量基因克隆技术 63
应用篇 75
13 原核细胞中外源基因的表达和初步纯化 75
14 蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 81
15 蛋白质的Western印迹分析 87
17 昆虫细胞中外源基因的表达 95
18 Tol2转座子介导的转基因斑马鱼及筛选 100
19 拟南芥原生质体遗传转化 107
20 土壤农杆菌介导的烟草基因转化 111
21 应用微弹轰击法进行兰花基因转化 119
22 植物总DNA的提取 127
25 DNA的Southern印迹分析（用同位素标记探针） 132
26 DNA的Southern印迹分析（用Dig标记探针） 138
27 mRNA的Northern印迹分析（用Dig标记探针） 142
28 酵母双杂系统研究蛋白质的相互作用 149
30 DNA-蛋白质的相互作用 156
31 蛋白质核酸结合活性的分析 163
32 以烟草脆裂病毒为载体通过基因沉默分析植物基因功能 167
33 水稻突变体库的创建 173
探索篇 185
37 亚克隆及检测的独立设计与操作 185
38 土壤农杆菌感受态细胞的制备和转化 187
39 不同植物材料组织的再生培养 189
40 在酵母细胞中表达外源基因 191
41 应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞中表达蛋白 193
42 检测蛋白质的相互作用——Protein Overlay 196
43 沉默转GUS基因烟草中的GUS基因 198
44 拟南芥T-DNA突变库的构建 200
45 用RNAi的方法研究拟南芥基因功能 202
主要参考资料 204