第一篇 生物化学实验及实验室基本要求 1
一、生物化学实验室规则、要求及注意事项 1
二、生物化学实验记录和实验报告 2
三、生物化学实验基本操作 2
第二篇 常用生物化学实验技术及其应用 6
一、电泳技术 6
二、分光光度技术 11
三、色谱技术 16
四、离心技术 22
五、透析技术 28
第三篇 基础性生物化学实验 30
第一章 蛋白质含量的测定 30
实验一 蛋白质含量的测定——紫外分光光度法 30
实验二 蛋白质含量的测定——微量凯氏定氮法 31
实验三 蛋白质含量的测定——福林-酚试剂法(Lowry法) 34
实验四 蛋白质含量的测定——双缩脲法 36
实验五 蛋白质含量的测定——考马斯亮蓝法 38
实验六 蛋白质含量的测定——二喹啉甲酸法(BCA法) 40
第二章 蛋白质的分离及鉴定 43
实验七 聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离血清蛋白质 43
实验八 醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白质 46
实验九 醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清乳酸脱氢酶同工酶 50
实验十 蛋白质的盐析作用 53
实验十一 蛋白质的沉淀反应 54
实验十二 蛋白质的呈色反应——茚三酮呈色反应 57
实验十三 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量 58
实验十四 凝胶色谱法测定蛋白质分子量 61
实验十五 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳法测定蛋白质等电点 64
第三章 酶的性质及活性测定 68
实验十六 酶的性质——酶的特异性(专一性) 68
实验十七 影响酶促反应速度的因素——底物浓度、酶浓度 69
实验十八 影响酶促反应速度的因素——温度、pH值 73
实验十九 影响酶促反应速度的因素——抑制剂、激活剂 74
实验二十 酶的竞争性抑制作用 76
实验二十一 碱性磷酸酶Km值的测定 78
实验二十二 乳酸脱氢酶及其辅酶Ⅰ的作用 80
实验二十三 血清谷丙转氨酶活性的测定 81
第四章 核酸的分离及鉴定 84
实验二十四 离心提取动物组织中的DNA和RNA 84
实验二十五 核酸的定性分析 85
实验二十六 琼脂糖凝胶电泳法分离DNA 88
第五章 生物化学相关指标的检测 90
实验二十七 血清葡萄糖的测定——葡萄糖氧化酶偶联法 90
实验二十八 胰岛素、肾上腺素对家兔血糖含量的影响 91
实验二十九 肝糖原的提取与定性 93
实验三十 饱食和饥饿大白鼠肝糖原含量的比较 94
实验三十一 血清三酰甘油的测定 96
实验三十二 琼脂糖凝胶电泳法测定血清脂蛋白 98
实验三十三 血清总胆固醇的测定 100
实验三十四 维生素C含量的测定——2,6-二氯酚靛酚滴定法 103
实验三十五 葡聚糖凝胶过滤法分离葡聚糖和重铬酸钠 105
实验三十六 纸色谱法验证肝组织的转氨基作用 106
实验三十七 二乙酰一肟法测定血清尿素 110
实验三十八 磷钨酸还原法测定血清尿酸 112
实验三十九 改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素 114
第四篇 综合性生物化学实验 117
实验四十 大肠杆菌质粒的提取与PCR鉴定 117
实验四十一 口腔拭子基因组DNA提取(试剂盒法)及琼脂糖凝胶电泳检测 121
实验四十二 食物中维生素C的提取和含量测定 123
实验四十三 血清γ-球蛋白的分离、纯化与鉴定 126
实验四十四 脲酶的凝胶过滤提取及分离纯化 130
参考文献 134