项目一CHO细胞的培养 1
项目介绍 1
项目实施 2
任务一CHO细胞培养前的准备 2
一、培养用品的准备 2
二、培养用液的配制 6
任务二CHO细胞的传代 10
任务三CHO细胞培养的常规检查 11
项目思考 13
项目知识链接 13
项目必备知识 13
一、动物细胞培养的概念 13
二、培养细胞的生长类型和形态特征 14
三、培养前的准备 16
四、动物细胞传代培养技术 32
五、培养细胞的观察和检测技术 34
项目拓展知识 39
一、动物细胞培养发展史 39
二、动物细胞培养的应用 42
三、动物细胞培养工作的基本要求和工作方法 43
四、培养细胞分化状态的变化 44
五、培养细胞的生长特点 45
六、培养细胞的生长和增殖过程 47
七、培养细胞的生长条件 49
八、动物细胞培养实验室 52
理论难点自测 56
项目二CHO细胞的冻存和复苏 58
项目介绍 58
项目实施 58
任务一CHO细胞的冻存 58
任务二CHO细胞的复苏 59
任务三CHO细胞的活性检查 60
一、染色法 60
二、四唑盐（MTT）比色法 62
项目思考 63
项目知识链接 63
项目必备知识 63
一细胞的冻存 63
二、细胞的复苏 64
三、细胞活性检查 65
四、细胞计数 65
项目拓展知识 66
一、细胞的运输 66
二、骨髓瘤细胞的冻存 66
三、细胞冻存的注意事项 67
理论难点自测 67
项目三鸡胚成纤维细胞的培养 68
项目介绍 68
项目实施 68
任务一组织块法培养鸡胚成纤维细胞 68
任务二消化法培养鸡胚成纤维细胞 70
项目思考 72
项目知识链接 72
项目必备知识 72
一、组织块培养法 72
二、消化培养法 74
项目拓展知识 74
一、不同组织的取材 74
二、组织材料的分离 75
三、上皮细胞培养 77
四、神经细胞培养 79
五、肿瘤细胞培养 80
理论难点自测 84
项目四VERO细胞的大规模培养 86
项目介绍 86
项目实施 87
项目思考 88
项目知识链接 88
项目必备知识 88
一、动物细胞大规模培养技术概述 88
二、动物细胞大规模培养的方法 89
项目拓展知识 95
一、动物细胞大规模培养技术的应用 95
二、动物细胞生物反应器 95
三、大规模培养技术的操作方式 100
理论难点自测 101
项目五抗人血白蛋白杂交瘤细胞系的建立 103
项目介绍 103
项目实施 104
任务一人血白蛋白免疫小鼠的准备 104
任务二骨髓瘤细胞和脾细胞的融合 104
一、主要试剂的配制 104
二、操作过程 105
任务三抗人血白蛋白杂交瘤细胞的筛选 108
一、试剂的配制 108
二、可溶性抗原的酶联免疫吸附试验（ELISA） 109
任务四抗人血白蛋白杂交瘤细胞的克隆培养 109
一、有限稀释法 109
二、软琼脂法 110
任务五杂交瘤细胞的冻存和复苏 110
一、杂交瘤细胞的冻存 110
二、杂交瘤细胞的复苏 111
项目思考 111
项目知识链接 111
项目必备知识 111
一、单克隆抗体的概念 111
二、杂交瘤技术制备单克隆抗体的基本原理 111
三、杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要过程 112
项目拓展知识 117
一、杂交瘤技术的诞生 117
二、单克隆抗体的大量制备和纯化 117
三、细胞的基因转染技术 118
理论难点自测 121
项目六胡萝卜悬浮细胞系的建立 122
项目介绍 122
项目实施 123
任务一MS培养基的制备 123
一、MS培养基母液的配制和保存 123
二、MS培养基的配制和灭菌 124
三、配制记录 125
任务二胡萝卜愈伤组织的诱导 126
任务三胡萝卜细胞的悬浮培养 127
项目思考 127
项目知识链接 128
项目必备知识 128
一、植物组织与细胞培养 128
二、植物细胞培养的培养基 131
三、外植体的选择和预处理 137
四、植物愈伤组织培养的一般程序 139
五、植物细胞的悬浮培养 139
六、植物细胞培养的环境条件 141
项目拓展知识 143
一、植物细胞培养的发展史 143
二、植物细胞培养的应用 145
三、植物细胞培养的实验室条件 147
四、植物细胞的固定化培养 152
五、单细胞培养 153
六、原生质体培养 156
七、植物细胞的大规模培养 161
理论难点自测 169
附录1常用设备标准操作规程 172
一、三洋MCO-15AC型二氧化碳培养箱标准操作规程 172
二、SZ-93的双重纯水蒸馏器标准操作规程 173
三、37XB型倒置显微镜标准操作规程 173
四、高压灭菌锅标准操作规程 174
五、超净工作台标准操作规程 174
六、电热接种灭菌器标准操作规程 174
七、气浴恒温振荡器标准操作规程 174
附录2细胞培养技术常用术语中英文对照 175
参考文献 179