《现代分子生物学实验技术及其在烟草中的应用》PDF下载

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  • 作  者:万秀清,颜培强主编
  • 出 版 社:黑龙江大学出版社
  • 出版年份:2015
  • ISBN:9787811299168
  • 页数:231 页
图书介绍:本书主要叙述了分子生物学的主要注意事项,以及近年来国内外主要使用的分子生物学研究技术和方法,以及在烟草科学当中的应用的实际范例。本书主要内容包括两大方面,一方面是基础篇,在此篇中,主要叙述了分子实验技术;二是应用篇,主要描述了在烟草中的应用。

实验室操作规范及安全 1

基础实验篇 9

实验1 核酸的定量测定 11

实验2 细菌DNA G+C含量的测定 14

实验3 真核细胞DNA的制备与定量 17

实验4 质粒DNA的提取 20

实验5 试剂盒提取质粒DNA 23

实验6 碱裂解法提取质粒DNA 24

实验7 质粒DNA的限制性核酸内切酶酶切 27

实验8 λ噬菌体DNA的提取 29

实验9 植物基因组DNA的提取 32

实验10 酵母RNA的提取 33

实验11 植物总RNA的提取 35

实验12 TRIzol法提取RNA 38

实验13 mRNA的分离与纯化 40

实验14 DNA琼脂糖凝胶电泳 42

实验15 DNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳 45

实验16 从琼脂糖凝胶中回收DNA 48

实验17 感受态细胞的制备及转化 50

实验18 DNA分子的限制性内切酶消化 53

实验19 DNA的连接 55

实验20 DNA重组 57

实验21 目的基因的亚克隆 61

实验22 Southern杂交 64

实验23 Northern杂交 68

实验24 聚合酶链反应(PCR)技术体外扩增DNA 70

实验25 实时荧光定量PCR 75

实验26 RT-PCR反转录-聚合酶链反应 78

实验27 PCR产物的克隆 80

实验28 RNA酶保护试验 82

实验29 放射性同位素标记的DNA序列测定分析 85

实验30 DNA核苷酸序列分析——银染色法 88

实验31 16S rRNA序列分析及其同源性分析 91

实验32 原核表达 97

实验33 双脱氧链终止法的DNA序列测定 99

实验34 RT-PCR法钓取小鼠肝脏GAPDH基因 103

实验35 利用聚合酶链反应定点突变 106

实验36 外源基因(在大肠杆菌中)的诱导表达和检测 108

实验37 从琼脂糖凝胶中分离回收PCR产物 110

实验38 GAPDH基因的TA克隆 112

实验39 脂质体转染实验与荧光素酶活性检测 114

实验40 Western杂交 117

应用实验篇 121

实验41 转基因烟草抗逆性指标和荧光定量PCR的检测 123

实验42 黑龙江省烟草马铃薯Y病毒株系鉴定 135

实验43 HAL1基因转化烟草提高烟叶含钾量研究 167

实验44 接头连接PCR步行法鉴定转基因烟草 173

实验45 拟南芥AVP2基因转化烟草中吸钾相关基因的转录分析 179

实验46 酿酒酵母NHX1基因克隆与烟草表达分析 187

实验47 烟草炭疽病拮抗生防菌的筛选 195

实验48 烟草转基因检测标准及PCR反应体系的研究 201

实验49 应用RNAi技术培育抗2种病毒病的转基因烟草 207

实验50 应用RNAi技术培育抗TMV病毒转基因烟草 213

实验51 转基因烟草定性检测方法的研究 219

实验52 转拟南芥AtKup1基因高含钾量烟草获得 224

主要参考书目 231