第一章 药理学实验基础知识 1
第一节 药理学实验设计的基本原则与分组方法 1
一、重复 1
二、对照 1
三、随机 2
第二节 药理学实验结果的记录及整理 2
第三节 药理学实验数据的统计分析 3
一、药理实验指标的分类 3
二、有效数字及其运算规则 3
三、药理实验的样本数 4
四、假设检验 4
第四节 药理学实验常用仪器 6
一、生化分析仪 6
二、血液／血细胞分析仪 6
三、流式细胞仪 7
四、生物机能实验系统 8
五、动物行为活动记录分析系统 9
第五节 药理学实验对实验室环境及操作人员的基本要求 9
一、药理学实验对实验室环境的基本要求 9
二、药理学实验对操作人员的基本要求 10
第六节 药理实验档案整理与归档 10
一、药理实验记录内容 10
二、实验记录用纸 11
三、实验记录的书写 11
四、实验记录的删除、修改或增减数据 11
五、图片、照片保存 12
六、实验记录的保存 12
七、实验记录的签署、检查和存档 12
第七节 药理学实验试剂的分级及选用 12
第八节 药理学实验常用抗凝剂 13
第二章 常用实验动物与基本操作 15
第一节 实验动物的分类 15
一、实验动物品种、品系的概念 15
二、按照遗传学控制程度分类 16
三、按照微生物寄生虫学控制程度分类 20
第二节 实验常用动物的种类及特点 24
一、小鼠 24
二、大鼠 28
三、豚鼠 31
四、家兔 34
五、犬 36
六、小型猪 39
七、猕猴 40
八、猫 43
九、鸽子 44
第三节 实验常用动物的饲养管理及实验应用 52
一、小鼠 52
二、大鼠 55
三、豚鼠 58
四、家兔 60
五、犬 62
六、小型猪 64
七、猕猴 66
八、猫 68
九、鸽子 70
第四节 动物实验的基本操作 70
一、实验动物的捉持方法 70
二、实验动物的编号 71
三、实验动物的给药方法 72
四、实验动物被毛的去除方法 73
五、实验动物的采血方式 74
六、实验动物的麻醉 75
七、实验动物的处死 76
八、实验动物给药剂量的确定 76
第三章 主要药效学实验方法 79
第一节 抗肿瘤药 81
一、抗肿瘤药概述 81
二、抗肿瘤药主要药效学研究 83
第二节 抗乙型肝炎病毒药物 95
一、抗乙型肝炎病毒药物概述 95
二、评价抗乙型肝炎病毒的模型 96
三、抗乙型肝炎病毒药物的筛选方法 100
第三节 抗糖尿病药物 103
一、抗糖尿病药物概述 103
二、抗糖尿病药物主要药效学研究 104
第四节 抗高血压药 115
一、高血压实验动物模型概述 115
二、抗高血压药主要药效学研究 115
第五节 抗微生物药物 126
一、抗微生物药物概述 126
二、抗微生物药物主要药效学研究 126
第六节 抗抑郁药物 152
一、抗抑郁药物概述 152
二、抗抑郁药主要药效学研究 154
第七节 抗急性肝损伤药物 158
一、四氯化碳肝损伤模型 158
二、氨基半乳糖急性肝损伤模型 162
三、对乙酰氨基酚急性肝损伤模型 165
四、硫代乙酰胺急性肝损伤模型 167
五、刀豆蛋白A急性肝损伤模型 170
六、脂多糖急性肝损伤模型 172
七、α-萘异硫氰酸酯急性肝损伤模型 175
八、酒精急性肝损伤模型 176
九、四环素急性肝损伤模型 178
十、体外肝细胞损伤模型 179
第八节 防治贫血药物 179
一、缺铁性贫血动物模型及药效学实验 180
二、溶血性贫血动物模型及药效学实验 181
三、再生障碍性贫血动物模型及药效学实验 181
四、肾性贫血动物模型及药效学实验 182
第九节 抗消化性溃疡药物 183
一、抗消化性溃疡药物概述 183
二、抗消化性溃疡药物主要药效学研究 184
第十节 抗心肌缺血药物实验方法 190
一、抗心肌缺血药物概述 190
二、抗心肌缺血药物主要药效学研究 191
第十一节 抗心律失常药物 196
一、抗心律失常药物概述 196
二、抗心律失常药物主要药效学研究 197
第十二节 抗动脉粥样硬化药物 203
一、抗动脉粥样硬化药物概述 203
二、抗动脉粥样硬化药物实验模型及检测方法 204
第十三节 镇痛药物实验方法 210
一、镇痛药物概述 210
二、镇痛药物主要药效学研究 211
第十四节 治疗骨质疏松症药物 222
一、概述 222
二、治疗骨质疏松症药物主要药效学研究 223
第十五节抗HIV病毒药物 231
一、抗HIV药物概述 231
二、抗HIV药物主要药效学研究 233
第十六节 抗阿尔茨海默病及抗痴呆药物研究方法 244
一、抗阿尔茨海默病及抗痴呆药物概述 244
二、抗阿尔茨海默病及抗痴呆药物主要药效学研究 246
第四章 药品安全性检查方法 255
第一节 一般药理学实验 255
一、概述 255
二、基本原则 256
三、实验设计的基本要求 256
四、主要研究内容 256
五、研究方法 256
第二节 急性毒性实验 271
一、概述 271
二、实验要求 271
三、实验方法 272
第三节 遗传毒性实验 275
一、鼠伤寒沙门菌回复突变实验（Ames实验） 276
二、哺乳动物细胞染色体畸变实验 278
三、哺乳动物细胞基因突变实验 280
四、啮齿动物骨骼微核实验 281
五、小鼠淋巴瘤细胞TK实验（MLA） 283
第四节 局部刺激性实验 283
一、概述 283
二、实验方法 283
三、影响刺激性反应和实验结果的因素 293
四、替代法 294
第五节 异常毒性检查法 295
一、实验材料和工具 295
二、供试品溶液 295
三、实验动物 295
四、检查法 295
五、结果判定 296
六、注意事项 296
第六节 过敏反应检查法 296
一、定义 296
二、仪器和用具 296
三、试液 296
四、供试品溶液 296
五、实验动物 297
六、操作方法 297
七、结果判定 297
第七节 溶血与凝聚检查法 297
一、定义 297
二、仪器和用具 297
三、动物 297
四、2％兔血红细胞混悬液的制备 297
五、供试品溶液的制备 298
六、检查法 298
七、结果判定 298
八、注意事项 298
第八节 细菌内毒素检查法 298
一、简介 298
二、实验准备 300
三、基本实验操作 301
四、凝胶法鲎试剂灵敏度复核与光度测定法标准曲线的可靠性实验 304
五、供试品的预处理 305
六、供试品细菌内毒素检查 310
第九节 热原检查 313
一、热原 313
二、热原检查法 314
第十节 降压物质检查法 316
一、定义 316
二、仪器和用具 316
三、溶液配制 316
四、实验动物 317
五、检定法 317
六、测压装置和记录仪的调节 317
七、动物灵敏度的测定 318
八、给药 319
九、结果判定 319
十、注意事项 319
第十一节 无菌检查法 319
一、培养基 320
二、稀释液、冲洗液及其制备方法 322
三、供试品的无菌检查 323
四、供试品处理及接种培养基 325
五、结果判断 327
第十二节 微生物限度检查法 328
一、供试液的制备 328
二、细菌、霉菌及酵母菌计数 330
三、控制菌检查 333
四、结果判断 338
第十三节 细胞毒性实验 342
一、方法提要 342
二、试剂 342
三、主要设备和用具 342
四、细胞株 342
五、实验前准备 342
第十四节 组织病理石蜡切片技术 345
一、取材 346
二、组织的固定 347
三、脱钙 351
四、脱水 353
五、包埋 355
六、石蜡切片的制作 356
七、石蜡切片的异常及处理 358
八、苏木素-伊红染色法 359
第五章 分子药理学实验 363
第一节PCR技术 363
一、基本的PCR技术 364
二、原位PCR技术 368
三、重组PCR技术 369
四、免疫PCR技术 373
五、荧光定量PCR技术 376
第二节 重组DNA技术 381
一、外源目的基因的获得 382
二、基因运载体的分离提纯 382
三、重组DNA分子的形成 383
四、重组DNA导入宿主细胞 384
五、重组克隆的筛选、鉴定和分析 385
六、工程菌的获得和基因产物的分离 388
七、基因表达 388
第三节 分子杂交技术 388
一、核酸探针标记的方法 389
二、几种常见的杂交 396
三、杂交反应的条件及参数的优化 402
第四节 基因芯片技术 403
一、基因芯片技术原理及分类 404
二、基因芯片技术的关键技术环节 405
三、基因芯片的应用和发展方向 409
第五节 反义核酸技术 410
一、反义核酸技术的作用机制和分类 411
二、反义核酸技术中寡核苷酸的序列设计、摄取及转运 412
三、反义寡核甘酸的剂量、给药途径和方式以及毒性 413
四、常见的人工合成的反义寡核苷酸 413
第六节 蛋白质定量方法 414
一、BCA法 414
二、Bradford法 415
三、双缩脲法 416
四、紫外分光光度法 417
第七节 酶联免疫吸附测定 418
第八节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 421
第九节Western印迹法 423
一、基本原理 423
二、实验前准备 423
三、操作步骤 428
第十节 膜片钳技术 432
一、常用记录方式 432
二、应用 433
第十一节 放射配体受体结合实验 433
一、基本原理 433
二、测定方法 436
第十二节 原代大鼠细胞分离与培养 437
一、组织材料的分离 437
二、原代培养 439
第十三节 细胞凋亡检测方法 439
一、形态学观察方法 439
二、DNA凝胶电泳 440
三、酶联免疫吸附法（ELISA）核小体测定 440
四、流式细胞仪定量分析 441
第十四节 流式细胞分析 442
第十五节 免疫组织化学染色 443
第六章 影响药物作用的因素 447
一、药物剂量对药物作用的影响 447
二、给药途径对药物作用的影响 447
三、溶液pH对药物跨膜转运的影响 447
四、药物的相互作用 447
五、昼夜节律对药物作用的影响 448
六、肝功能状态对药物作用的影响 450
七、肾功能状态对药物作用的影响 450
附录 451
附录一 常用实验动物的生殖和生理常数 451
附录二 常用实验动物的血液生化指标参数值 452
附录三 常用实验动物的最大给药量和使用针头的规格 452
附录四 常用实验动物采血部位、采血量 453
附录五 常用实验动物麻醉药物用法与用量 455
附录六 常用营养液的组成和配制 456
附录七 常用药物量和浓度的单位 456
附录八 细胞培养常用溶液和培养液制备 457
参考文献 459