第一篇猴属动物概况 3
第1章 猕猴属分类、分布与保护现状 3
1. 1猕猴属动物概况 3
1.2猕猴属的分类与系统发育关系 5
1.3猕猴属的起源与演化 6
1.4猕猴属的地理分布及生物地理 8
第2章 猕猴的分类、分布与保护 10
2. 1猕猴的分类 10
2. 2猕猴的分布 11
2.2. 1地理分布 11
2. 2. 2生态地理分布 12
2.3猕猴的生态与行为 13
2.3. 1社群、群体大小与组成 13
2.3.2家域与食性 13
2. 3.3社会行为与相互关系 14
2.4猕猴资源的利用与保护现状 16
参考文献 20
第二篇 猕猴的生殖生理 29
第3章 雌性猕猴生殖器官解剖组织结构及生理特性 29
3. 1卵巢 29
3.1.1猕猴卵巢组织解剖结构 29
3. 1.2卵泡发生和卵泡闭锁现象 32
3. 1. 3卵巢的周期性 33
3. 1.4卵泡动力学与生殖激素 34
3. 2输卵管 43
3.3子宫及子宫颈 44
3.4阴道及外生殖器 44
第4章 雄性猕猴生殖器官解剖组织结构与生理特性 46
4. 1睾丸 46
4.1.1睾丸解剖结构 46
4.1.2睾丸组织细胞结构 47
4. 1. 3睾丸位置的变化与性成熟 53
4.2附睾 54
4. 3精液和精子 55
4.4副性腺 56
4. 4. 1精囊腺 56
4. 4. 2前列腺 56
4.4.3尿道球腺 57
4. 5外生殖器 57
4. 5. 1阴茎 57
4. 5. 2阴囊 57
4. 6雄性性腺激素 58
4. 6. 1睾酮与ICSH 58
4.6.2抑制素B与 FSH 59
4.6.3前列腺素 61
第5章 配子的产生 63
5. 1原始生殖细胞的特化 63
5. 2原始生殖细胞的迁移 64
5.3原始生殖细胞的性别分化 64
5. 4精子的发生和发育 65
5. 5卵细胞的发生和发育 65
5.5. 1原始滤泡的形成 66
5. 5. 2原始滤泡的激活和生长 66
5. 5. 3卵母细胞的发育及成熟 67
5. 6猕猴卵母细胞的体外成熟培养 68
5. 6. 1猕猴卵细胞体外成熟无血清培养体系的建立 69
5. 6.2影响猕猴卵细胞体外成熟的因子 69
5. 6. 3雌性个体的年龄和生殖周期对猕猴卵细胞成熟的影响 71
5. 7排卵 72
第6章 着床前胚胎的发育 73
6. 1受精 73
6. 1. 1精卵识别:透明带及其在精卵识别中的功能 73
6. 1.2精子的顶体反应 74
6. 1.3卵细胞的皮层反应 74
6. 2着床前胚胎发育 75
6.2.1母源因子对早期胚胎发育的调控 75
6.2. 2着床前胚胎发育的表观遗传特征 78
6. 2.3早期胚胎发育的细胞命运决定 78
第7章 猕猴性成熟和性行为 80
7. 1雌性猕猴的性成熟 80
7. 2性皮肤 80
7. 3性行为 82
参考文献 83
第三篇 猕猴的辅助生殖技术 97
第8章 猕猴的体外受精与胚胎移植 97
8. 1精子采集 97
8.1.1精液采集的方法与原理 97
8.1.2电刺激采集猕猴精液 98
8.1.3精液液化 99
8.2超数排卵 99
8.2. 1灵长类超数排卵的研究历史 100
8.2.2影响超数排卵的几种因素 101
8.2.3超数排卵中的巨型卵泡的影响 110
8.2.4预知超数排卵失败的因素 111
8.2.5卵供体动物的选择和超数排卵处理最佳方案 113
8. 2.6猕猴超数排卵失败的几种原因 114
8. 2. 7超数排卵和卵母细胞采集的流程 115
8. 3猕猴卵母细胞体外成熟培养方法 119
8.3. 1卵巢中分离未成熟卵母细胞的分离培养 119
8. 3.2超数排卵未成熟卵母细胞分离培养及操作要点(腹腔镜介导取卵) 121
8.4体外受精、单精子注射、孤雌激活 122
8.4. 1猕猴的体外受精技术 123
8.4.2单精子注射 126
8.4.3孤雌激活 129
8.5猕猴胚胎移植 131
8.5. 1胚胎移植受体的选择 132
8. 5. 2胚胎移植的部位与方法 133
8.5.3猕猴早期妊娠诊断 134
8. 5.4猕猴妊娠后的阴道流血 135
附件1猕猴超数排卵计划和任务书编写内容 136
附件2猕猴超数排卵实时记录表 137
第9章 胚胎分割 138
9.1胚胎分割的研究简史 138
9. 2胚胎分割的应用 139
9. 3灵长类胚胎分割的研究进展 139
9.4胚胎分割的原理和方法 140
9. 4. 1胚胎分割的原理 140
9.4. 2胚胎分割的方法 141
9.4.3分割胚胎的培养与发育 142
9.4.4影响分割胚发育的因素 143
9. 5猕猴胚胎分割技术 145
9.5. 1桑椹胚和囊胚期胚胎分割 145
9. 5. 2猕猴胚胎 146
9.5.3胚胎分割方法 146
9.5.4分割胚的体外培养 147
9. 5. 5分割胚的移植 147
9.5. 6猕猴早期胚胎卵裂球分割(分离) 148
第10章 种质细胞冷冻保存 151
10. 1猕猴种质资源冷冻保存的意义和研究进展 151
10.2种质细胞冷冻保存的原理 154
10.2.1细胞冷冻保存的原理 154
10. 2. 2细胞冷冻损伤的假说 155
10.2.3冷冻保护剂的种类和作用 157
10.3猕猴精子的冷冻保存 163
10.3. 1猕猴精子的低温生物学特征 163
10. 3.2渗透性冷冻保护剂的浓度和种类对猕猴冷冻复苏精子功能的影响 164
10. 3.3非渗透性冷冻保护剂——糖对猕猴冷冻复苏精子功能的影响 165
10.3.4猕猴精子冷冻保存的方法 167
10.4猕猴卵母细胞和胚胎的冷冻保存 169
10.4. 1卵母细胞的低温生物学特征 169
10.4.2猕猴卵母细胞冷冻保存的方法 170
10.4.3猕猴胚胎冷冻保存的方法(慢速冷冻和玻璃化冷冻法) 170
第11章 猕猴胚胎干细胞 173
11. 1猕猴胚胎干细胞的分离与鉴定 173
11. 1. 1非人灵长类胚胎干细胞的分离建系 173
11. 1.2非人灵长类胚胎干细胞的鉴定 178
11. 1.3非人灵长类胚胎干细胞培养体系的改进 182
11. 1.4胚胎干细胞分离技术的改进 184
11.2猕猴胚胎干细胞的分离建系与培养 185
11. 2. 1小鼠胚胎成纤维细胞的培养 185
11.2. 2小鼠胚胎成纤维细胞的冻存 187
11. 2. 3小鼠胚胎成纤维细胞的辐照处理 188
11.2. 4小鼠胚胎成纤维细胞的复苏 189
11. 2. 5小鼠胚胎成纤维细胞的丝裂霉素处理和饲养层细胞的准备 190
11.2. 6猕猴着床前胚胎的体外培养 191
11.2. 7猕猴胚胎干细胞的分离 191
11. 3猕猴胚胎干细胞的鉴定 201
11. 3. 1猕猴胚胎干细胞的形态学观察 201
11. 3. 2猕猴胚胎干细胞免疫荧光染色的鉴定 202
11.3. 3猕猴胚胎干细胞核型的鉴定 204
11.3.4猕猴胚胎干细胞的体外分化 207
11. 3.5 猕 猴胚胎干细胞的体内分化 211
第12章 猕猴转基因技术 214
12. 1引言 214
12. 2转基因动物的原理和技术方法 215
12. 2. 1显微注射法 216
12.2.2反转录病毒载体导入法 217
12.2. 3体细胞核移植法 218
12.2.4人染色体介导法 218
12. 2.5性腺转基因方法 219
12. 2. 6定点制作转基因动物的方法 219
12. 3转基因猕猴制备技术 221
12.3. 1制备高滴度的VSV-G假型慢病毒 221
12. 3. 2病毒滴度测定 222
12. 3. 3实验动物:供体和受体的选择 223
12. 3.4超排和取卵 223
12. 3. 5卵周隙注射慢病毒 223
12.3. 6体外培养 224
12. 3. 7辅助孵化 224
12.3.8受体猴的选择及胚胎移植 224
12.3. 9怀孕的确认和监测 225
12.3. 10新生猴的护理 225
12. 3. 11新生动物的转基因确认 225
12. 3. 12基因组DNA提取、PCR分析和Southern杂交分析 226
12. 3. 13转基因猕猴组织的免疫组织化学分析 226
12.4转基因猕猴的应用与展望 226
参考文献 228
第四篇 猕猴的繁殖管理 247
第13章 猕猴的饲养与管理 247
13. 1饲养环境 247
13.1.1动物笼舍 247
13. 1.2温度 250
13. 1. 3相对湿度 250
13. 1.4光照 250
13. 1. 5噪声 250
13.2猕猴的饲养管理 251
13.2. 1检疫猴群管理 251
13.2. 2繁殖猴群管理 255
13. 2. 3幼猴的人工抚育 257
13. 2. 4其他猴群饲养管理 259
第14章 猕猴的营养需求 261
14. 1猕猴的习性 261
14. 1. 1猕猴的食性 261
14.1.2消化 261
14.2猕猴的营养需要与饲养标准 261
14. 2. 1维持需要 262
14.2.2生产需要 263
14.2.3猕猴的饲养标准 263
14. 3猕猴饲料配方设计 265
14. 3. 1正确选择猕猴的饲养标准 265
14. 3.2采用合理的饲料配方设计方法 265
14. 3. 3添加剂预混料配方设计 266
14.3. 4原料选择 267
14.3. 5实验验证,确定合理配方 267
第15章 猕猴常见疾病及其防治 269
15. 1细菌性疾病 269
15. 1. 1沙门菌病 269
15. 1. 2细菌性痢疾 269
15. 1. 3细菌性肺炎 270
15. 1.4结核病 271
15. 2病毒性疾病 271
15. 2. 1猴疱疹病毒感染 271
15. 2.2猴D型反转录病毒感染 272
15. 2. 3猴免疫缺陷病毒感染 273
15.2.4猴痘 274
15.2. 5猴出血热 274
15.2. 6猴麻疹 275
15. 3寄生虫病 276
15.3.1阿米巴病 276
15. 3. 2结肠小袋纤毛虫 276
15. 3. 3毛首鞭形线虫 277
15. 3.4鞭毛虫 277
15.3. 5粪类圆线虫病 277
第16章 猕猴的福利管理 278
16. 1动物福利概述 278
16. 2我国动物福利现状 278
16. 3猕猴福利管理 280
16. 3. 1饲养环境福利 280
16.3. 2猕猴营养 282
16.3. 3猕猴的检疫与疾病治疗 283
16.3. 4饲养环境的多样性 286
16. 3. 5生物医学研究中猕猴的福利 286
第17章 国内外有关实验动物的法律法规 289
17. 1中国 289
17. 2欧洲 290
17. 3美国 291
17.4日本 292
参考文献 294
附录 缓冲液和培养液配制表 295
索引 300