前言 1
一、免疫化学基本技术 1
（一）、盐析 1
目录 1
（二）、脱盐 3
1、半透膜透析 3
2、凝胶过滤法 3
3、超过滤法＊ 3
2、表面蒸发浓缩 8
3、超过滤法 8
4、冷冻干燥法。 8
1、化学吸水剂法 8
（三）、蛋白溶液的浓缩 8
（四）、蛋白浓度的定量方法 9
1、紫外吸收法 9
2、考马斯亮兰G—250定量法 9
3、改良Loawry（Folin酚法）法。 9
二、层析技术 14
（一）、各种凝胶层析 15
（二）、离子交换纤维素层析 30
（三）、抗原—抗体特异亲合层析 45
1、活化琼脂糖珠亲合层析（Sepharose4B） 45
2、生物凝胶珠免疫吸附剂的制备（Bio—Gelp—300） 49
3、葡聚糖凝胶珠免疫吸附剂的制备（SophadexG—200） 53
（四）、特异吸附层析 56
1、ConA—Sepharose4B的亲合层析 57
2、Blue—DextranSepharoseCL—6B层析（人β干扰素的纯化＊） 60
3、磁性胶等特异亲合层析吸附剂＊ 63
三、电泳技术 63
（一）、免疫电泳 63
1、微量免疫电泳 63
2、对流免疫电泳 63
3、火箭免疫电泳 63
4、免疫火箭扩散电泳（Immunol—Rocket—diffisonElectrophoresisIRDE）＊ 63
3、盘状等电点聚胶电泳（PAG—IFE） 76
6、PAGE蛋白的银染色法＊。 76
5、垂直板状SDS—PAGE（单一浓度胶、梯度胶法）＊ 76
4、同工酶的PAGE及IFE 76
2、盘状SDS—PAGE 76
1、盘状PAGE 76
（二）、聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE） 76
（三）、其它电泳技术 105
1、醋酸纤维素膜电泳 105
2、薄层琼脂糖凝胶聚焦电泳 105
四、标记技术 109
（一）、荧光素标记抗体法 109
1、异硫氰酸荧光素（FITC）的直 109
接、间接标记法 109
2、异硫氰酸四甲基罗丹明（TMRITC）标记法 109
3、四乙基罗丹明（RB200）标记法。 109
5、免疫荧光定量染色法 121
4、细胞表抗原免疫荧光染色法 121
7、酶作用底物产生荧光法 121
8、自身身抗体免疫荧光染色法＊。 121
6、荧光激活细胞分离法 121
2、间接法 121
1、直接法 121
（二）、免疫荧光染色法 121
3、抗补体染色法 121
（三）、酶标记抗体技术 133
1、辣根过氧化物酶（HRP）标记抗体法 133
（1）、过碘酸钠氧化标记法 133
（2）、改良过碘酸钠标记法，＊ 133
（3）、戊二醛二步标记法＊。 133
2、酶—抗酶复合物（PAP）的制备＊ 133
3、免疫酶染色法及酶联免疫吸附试验（ELISA） 133
3、亲合素 145
4、亲合素—生物素系统的染色技术：BA、BAB、ABC、ABC—ELISA及ABC—dot—ELISA。 145
（A）分子的HRP或FITC标记 145
（B）分子的活化 145
2、生物素与大分子的连接 145
1、生物素 145
（四）、亲合素（Aridin）—生物素（Biotin）标记技术＊ 145
（五）、同位素标记抗体法 152
（六）、化学发光免疫标记法 156
五、免疫扩散技术 160
（一）、双向免疫扩散 160
（二）、单向免疫扩散 163
（三）、逆向免疫扩散 165
3、人IgG、IgA及IgM的连续分离法 169
4、人IgA的亲合层析分离制备 169
5、分泌IgA（SIgA）的分离法 169
2、兔血清IgG的简便快速纯化法 169
6、IgE的分离纯化 169
7、IgD的分离纯化 169
8、人IgG亚类的分离纯化 169
9、小鼠血清IgG亚类的分离纯化 169
（2）、硫酸钠盐析纯化人IgG 169
（5）、人、兔、羊、马及狗血清IgG的盐析—离子交换层析 169
（4）、辛酸及Rivan？l盐析分离人IgG、IgA及IgM 169
（3）、硫酸铵盐析各种动物血清IgG及小鼠IgG的纯化＊。 169
（1）、硫酸铵盐析人血清中的？、β及γ球蛋白 169
1、盐析法分离纯化Ig 169
（一）、血清免疫球蛋白（Ig）的分离纯化 169
六、血浆蛋白的纯化与鉴定 169
5、Fd？的制备 193
4、IgA的F（ab）？Fab？Fc？片段的制备 193
3、IgM的Fabμ及Fcμ片段的制备 193
2、木瓜蛋白酶水解IgG制备Fab及FC片段 193
1、胃蛋白水解IgG制备F（ab）2′及Fc′片段 193
（三）、Ig多肽链碎片的制备 193
4、SIgA的分泌成分（SC）的制备 193
3、人IgA的？链、J链的制备 193
2、人IgMμ链的制备 193
1、人IgG的γ重链、K或λ轻链的制备 193
（二）、Ig多肽链的分离纯化 193
（四）、血浆Ig等蛋白的分析与鉴定 207
七、抗血清的制备技术＊ 209
（一）、免疫原的制备 209
（二）、动物免疫 209
（三）、试血及效价测定 210
（四）、免疫动物血液采集及血清分离 211
（五）、抗血清的鉴定及分装保存 211