绪论 1
一、园艺植物生物技术的含义和内容 1
二、植物生物技术的发展简史 3
三、园艺生物技术的作用 14
第一章 细胞工程原理 17
第一节 细胞全能性 17
一、细胞全能性概念的发展 17
二、植物活细胞具有生命特征属性 18
三、细胞在合适的离体培养条件下可以展现该物种的生命特征属性 20
第二节 培养细胞的营养及代谢 21
一、培养细胞的营养和初级代谢 21
二、次级代谢 22
第三节 脱分化与再分化 24
一、脱分化 24
二、细胞分化和组织分化 26
三、器官分化和植株形成 29
四、体细胞胚胎发生 30
第四节 培养细胞的遗传变异 31
一、培养细胞变异增多现象及其利用价值 31
二、变异增多的原因 33
三、培养细胞变异的遗传机理 34
第二章 离体培养基本技术 36
第一节 外植体的类型及其选择与处理 36
一、外植体的类型及选择依据 36
二、外植体的预处理及灭菌 40
三、褐变的防止 41
第二节 培养基及其配制 43
一、培养基的种类及组成 43
二、几类常用培养基的特性 49
三、培养基的配制 51
第三节 无菌技术 54
一、接种室（无菌操作室）和培养室 54
二、超净工作台 54
三、试材和器具的灭菌 55
四、无菌操作要点 57
第四节 培养条件的影响 57
一、光照 57
二、温度 58
三、湿度 59
四、培养基的pH值 60
五、氧和其它气体 60
第三章 细胞培养 61
第一节 悬浮培养 61
一、悬浮培养的基本特点及起始悬浮液的制备 61
二、悬浮培养的种类和方法 62
三、连续培养 64
第二节 固相化细胞培养 67
一、固相化细胞培养的特点 67
二、植物细胞的固定化方法 68
三、固相细胞培养系统 69
第三节 单细胞培养 71
一、植物单细胞培养的意义 71
二、单离细胞的方法 71
四、单细胞培养的程序 74
五、影响培养细胞生长的因素 74
六、培养细胞的密度及生活率的测定 76
第四章 原生质体技术 78
第一节 原生质体分离 78
一、游离原生质体的材料来源 78
二、酶混合液 79
三、分离原生质体的操作程序 80
四、花粉原生质体的分离 81
五、原生质体的活力测定 81
第二节 原生质体培养 82
一、培养基 82
二、培养方法 82
三、原生质体的分裂与增殖 82
四、植株再生 83
第三节 原生质体融合 83
一、聚乙二醇（PEG）与高pH的Ca＋＋相结合的诱导融合法 84
二、电融合 85
三、非对称融合 85
四、杂种细胞的选择及体细胞杂种植株的再生与鉴定 86
第五章 生殖细胞工程 89
第一节 花药与花粉培养 89
一、花药培养 89
二、花粉培养 90
三、离体培养下雄核发育的途径 91
四、影响雄核发育的因素 92
第二节 未授粉胚珠和子房培养 94
一、未授粉胚珠培养 94
二、未授粉子房培养 95
第三节 离体受精 95
一、离体子房授粉 96
二、胚珠试管授粉 96
三、影响离体受精的因素 96
四、离体受精的研究进展和概念变化 97
第四节 杂种胚挽救 97
一、成熟胚的培养（Mature Embryo Culture） 97
二、原胚培养（Immature Embryo Culture） 98
第五节 胚乳培养 99
一、胚乳愈伤组织的建立 100
二、影响胚乳培养的因素 101
三、胚乳再生植株的染色体倍性 101
第六章 离体繁殖 103
第一节 离体繁殖 104
一、离体繁殖特点及其应用 104
二、离体繁殖再生植株途径 104
三、离体繁殖技术体系及其影响因素 106
四、试管育苗商业性生产需要估算的参数 110
第二节 人工种子的研制 111
一、人工种子的优点和局限性 111
二、人工种子的结构 112
三、人工种子的制作 113
第三节 培育无病毒苗 117
一、培育无病毒苗的意义 117
二、脱除病毒的方法 118
三、脱毒苗的鉴定 120
四、无病毒良种的保存和应用 122
第七章 种质离体保存和细胞工程育种 124
第一节 种质离体保存 124
一、常温限制生长保存 124
二、中低温调控生长保存 125
三、超低温“长期”保存法 126
第二节 细胞工程在园艺植物品种改良上的应用 129
一、获得无性系变异 129
二、获得体细胞杂种 130
三、挽救杂种胚 131
四、快速纯化亲本 132
五、保存珍贵的育种材料 132
第八章 基因工程基本原理 134
第一节 基因的分子生物学基础 134
一、基因概念的形成与发展 134
二、核酸的结构与性质 135
三、真核生物的基因组 142
第二节 真核基因的结构与类型 143
一、基因转录有关的结构 143
二、基因的不同区域及其作用 146
三、基因的命名 149
四、植物基因的基本类型 149
第三节 基因的表达与调控 149
一、基因的表达 150
二、原核生物和真核生物在基因表达调控的差别 153
三、真核生物基因表达调控的基本方式 154
第九章 基因工程基本技术 160
第一节 核酸分离 160
一、DNA的分离 160
二、RNA的分离 161
三、DNA及RNA含量测定、纯度及质量的评定 163
第二节 分子杂交 163
一、分子杂交的基本理论 163
二、用于核酸杂交的膜 164
三、探针的种类及制备 164
四、DNA和RNA电泳及其从凝胶向尼龙膜的转移 165
五、分子杂交基本步骤 167
六、地高辛标记的探针Southern和Northern杂交方法 169
七、Western杂交 170
第三节 PCR技术 170
一、PCR的基本原理及影响因素 170
二、RT-PCR技术 173
三、PCR技术的其它应用 174
第十章 基因分离与克隆 176
第一节 基因克隆策略与载体 176
一、基因克隆策略 176
二、基因克隆载体 177
第二节 基因分离 184
一、目的基因的获得 184
二、重组体DNA分子的构建 189
三、重组体分子导入受体细胞 194
四、重组体分子的筛选 197
第十一章 植物遗传转化 201
第一节 植物基因工程载体及其构建 201
一、植物基因工程载体种类及命名规则 202
二、根癌农杆菌Ti质粒的结构与功能 203
三、Ti质粒基因转化的原理 204
四、Ti质粒的改造与载体构建 206
五、植物遗传转化中常用的选择标记及报告基因 209
第二节 植物遗传转化方法和技术 213
一、载体转化 213
二、直接转化 215
三、利用种质系统转化 216
第三节、转化体的筛选与检测 217
一、转化体的选择和筛选 217
二、外源基因整合的检测 217
三、转录水平的检测 218
四、蛋白质水平的检测 219
五、转基因植物性状检测 219
六、转基因植物研究中存在的问题 219
第十二章 基因工程在园艺植物遗传改良中的应用 222
第一节 应用基因工程改良园艺植物的性状 222
一、抗病性状 222
二、抗虫性状 223
三、抗逆性状 223
四、抗除草剂性状 224
五、延缓果实成熟 224
六、促进生根 225
七、培育雄性不育系 225
八、改变花色 226
九、改变花形 226
十、改变花香 226
十一、改良其它性状 227
第二节 存在的问题和展望 227
一、转基因植物的安全性评价和环境释放问题 227
二、转基因植物的安全性问题 228
三、知识产权与商品化发展问题 229
四、遗传转化后的一些问题 229
五、未来展望 229
第十三章 分子标记技术 231
第一节 分子标记概述 231
一、多态性与分子标记 231
二、分子标记的性质与种类 231
三、分子标记技术的优越性及其作用 233
四、分子标记的选择 235
第二节 常用分子标记的种类、原理及实验技术 236
一、RAPD标记 236
二、RFLP标记 239
三、SSR 242
四、AFLP 247
五、SNP（基于单个核苷酸多态性的DNA标记） 252
第三节 分子标记数据的处理与分析 252
一、数据的获得 252
二、统计学处理 253
三、表征分析与系统发育分析 255
第四节 分子标记的应用 259