目 录 1
第一章酶的一般知识 1
第一节酶是催化剂 1
第二节酶的分子组成 1
第三节酶作用的特异性 1
第四节酶的分类 2
第五节酶可作为分析试剂 2
第二章临床酶学分析方法的动力学基础 4
第一节单底物反应动力学 4
一、单底物动力学方程的导出及适用条件 4
二、动力学参数的意义及其求取 6
第二节多底物反应动力学 9
一、酶促反应按底物级数的分类 9
二、多底物反应动力学的表示法及分类 10
三、多底物反应动力学参数Km及Vm的求取 12
第三节影响酶促反应的因素 15
一、酶浓度的影响 15
二、底物浓度的影响 16
三、产物的影响 16
四、pH的影响 17
五、温度的影响 20
六、抑制剂的影响 21
七、激活剂的影响 28
第三章临床酶学分析法的基本原理 29
第一节测定酶浓度的方法及检测技术 29
一、测活法 29
二、测蛋白法 33
第二节用酶作试剂测定底物、辅酶、激动剂、抑制剂的方法及技术 33
一、总变化量法 33
二、动力学法 34
第三节酶活性测定方法中底物浓度、指示酶、辅助酶加入量的确定 34
一、底物的选择及浓度的确定 35
二、偶联法测定酶活性方法中指示酶及辅助酶加入量的确定 39
一、单酶反应定量法酶量的确定 41
第四节用酶法测定底物时酶试剂加入量的确定 41
二、指示酶反应偶联定量法酶量的确定 42
第五节影响酶学分析法的条件选择及控制 44
一、温度 44
二、pH与缓冲剂 45
三、效应物 45
四、样品量 45
第六节酶法自动分析 45
一、概述 45
二、自动化分析的原理 46
三、临床自动化仪器(简介) 48
一、一般性质 50
二、测定方法 50
第四章临床常用酶的性质及检测方法 50
第一节谷草转氨酶(GOT,E.C.2.6.1.1.) 50
第二节谷丙转氨酶(GPT,E.C.2.6.1.2) 51
一、一般性质 51
二、测定方法 51
第三节 碱性磷酸酶(ALP,AKP,E.C.3.1.3.1) 51
一、一般性质 51
二、测定方法 52
第四节酸性磷酸酶(ACP,E.C.3.3.1.2) 52
一、一般性质 52
二、测定方法 52
二、测定方法 53
第五节肌酸激酶(CK,E.C.2.7.3.2) 53
一、一般性质 53
第六节葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6PDH,E.C.1.1.1.4.9) 54
一、一般性质 54
二、测定方法 54
第七节α-淀粉酶(AMY,E.C.3.2.1.1) 55
一、一般性质 55
二、测定方法 55
第八节乳酸脱氢酶(LDH,E.C.1.1.1.27) 56
一、一般性质 56
二、测定方法 56
一、一般性质 57
第十节γ-谷氨酰转移酶(?-GT,E.C.2.3.2.2) 57
二、测定方法 57
一、一般性质 57
第九节α-羟丁酸脱氢酶(HBDH,E.C.1.1.1.27) 57
二、测定方法 57
第十一节 乙酰胆碱酶酯(AChE,E.C.3.1.1.7)胆碱酯酶(ChE,E.C.3.1.1.8) 58
一、一般性质 58
二、测定方法 58
第十二节5′-核苷酶(5′-NT,E.C.3.1.3.5) 59
一、一般性质 59
二、测定方法 59
第十三节单胺氧化酶(MAO,E.C.1.4.3.4) 59
一、一般性质 59
二、测定方法 59
第十五节精氨酰琥珀酸裂解酶(ASAL,E.C.4.3.2.1) 60
二、测定方法 60
一、一般性质 60
第十四节醛缩酶(ALD,E.C.4.1.2.13) 60
二、测定方法 60
一、一般性质 60
第五章酶法检测某些底物、辅酶等物质所用酶试剂及检测方法 62
第一节概述 62
第二节β-D-葡萄糖 62
第三节尿酸 63
第四节肌酸、肌酐 63
第七节甘油三酯 64
第六节胆固醇 64
第五节氨 64
第八节乙酰辅酶A 65
第九节镁离子 65
第六章同工酶 66
第一节概论 66
第二节同工酶的分类及命名 66
一、同工酶的分类 66
二、同工酶的命名 68
第三节同工酶的生理意义及检测作用 68
一、同工酶的生理意义 68
二、同工酶检测的作用 68
一、同工酶谱改变的类型 70
第四节同工酶谱在癌瘤组织的变化 70
二、癌瘤时同工酶谱改变的生物学意义 71
第五节同工酶的鉴定 72
一、电泳法 72
二、层析法 76
三、免疫学法 76
四、动力学法 77
第六节临床常用同工酶 78
一、乳酸脱氢酶同工酶 78
二、肌酸激酶同工酶 82
三、谷草转氨酶同工酶 84
四、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶同工酶 87
五、γ-谷氨酰转换酶同工酶 89
六、碱性磷酸酶同工酶 91
七、酸性磷酸酶同工酶 94
八、α-淀粉酶同工酶 96
九、醛缩酶同工酶 98
十、5′-核苷酸磷酸二酯酶同工酶 100
十一、丙酮酸激酶同工酶 100
第七章血清酶 104
第一节血清酶的来源和去路 104
一、血清酶的来源 104
第二节血清酶的生理差异 105
二、血清酶的去路 105
一、性别 106
二、年龄 106
三、运动 106
四、饮食 106
五、妊娠 106
第三节影响血清酶活力测定的因素 106
一、溶血 106
二、抗凝剂 107
三、样品储存 107
四、试剂和方法 107
四、酶排泄障碍 108
三、从血清中清除的速度 108
二、从细胞释入血清的速度 108
第四节疾病时血清酶活力改变的机理 108
一、酶合成异常 108
第五节血清酶活力测定的选择和评价 109
一、灵敏度 109
二、特异性 109
第六节 同工酶谱分析在临床上的应用 109
一、同工酶在诊断急性心肌梗塞中的应用 109
二、同工酶在诊断肝胆疾病中的应用 111
三、同工酶谱在癌瘤诊断中的应用 113
第一节谷草转氨酶(GOT、AST)测定 117
一、赖氏比色法 117
第八章酶活力测定 117
二、酶偶联测定法 119
第二节谷丙转氨酶(GPT,ALT)测定 120
一、赖氏比色法 120
二、酶偶联测定法 122
第三节碱性磷酸酶(ALP,AKP)测定 124
一、磷酸苯二钠法 124
二、对硝基酚法 126
第四节酸性磷酸酶(ACP)测定 128
一、磷酸苯二钠法 128
二、磷酸麝香草酚肽法 129
第五节肌酸激酶(CK)测定 130
一、总活力测定 130
二、同工酶测定 134
一、总活力测定 135
第六节葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6-PDH)测定 135
二、同工酶测定 138
第七节淀粉酶(AMY)测定 139
第八节乳酸脱氢酶(LDH)测定 140
一、总活力测定 140
二、同工酶测定 143
第九节α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)测定 145
第十节γ-谷氨酰转移酶测定(r-GT) 147
一、重氮试剂比色法 147
二、对硝基苯胺法 148
一、血清胆碱酯酶测定 149
第十一节胆碱酯酶(CHE)测定 149
二、全血胆碱酯酶测定 151
第十二节5′-核苷酸酶(5′-NT)测定 152
第十三节单胺氧化酶(MAO)测定 154
第十四节醛缩酶(ALD)测定 156
第十五节精氨酰琥珀酸裂解酶(ASAL)测定 158
附录 161
一、各种商品酶的稳定性 161
二、各种体液酶的稳定性 163
三、某些酶的米氏常数 164
四、常用缓冲液 168
五、层析法的数据 173