《基因敲除实验指南 原著第2版 导读版 英文》PDF下载

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  • 作  者:RalfKühn,WolfgangWurst编译
  • 出 版 社:北京:科学出版社
  • 出版年份:2012
  • ISBN:9787030343109
  • 页数:516 页
图书介绍:小鼠和人类基因组测序完成后,哺乳动物基因的功能鉴定及其分子互作网络的阐明成为生命科学研究的下一个主要任务,小鼠基因组为这些研究提供了方便且重要的模型。本书的多位撰稿人在基因打靶和小鼠遗传学领域有着丰富的研究经验,他们全面介绍了分步骤的实验方案。除了着重阐述近几年发展起来的多种基因突变技术,还涉及ES细胞的基因修饰、干细胞操作、基因工程小鼠的创造、突变型分析等。作为《分子生物学方法》系列丛书的一卷,本书各章均包含针对标题的导言、必备材料与试剂的清单、易于操作的实验室方案、疑难问题的注意事项和易犯失误的避免。本书第二版全面更新、专业权威,由经验丰富的研究者提供了切实可行的实验方案,对本领域的初涉者和遗传学领域的研究人员而言是一本极具价值的参考书。

1.突变小鼠综述 1

第一部分:胚胎干细胞中的基因修饰 15

2.利用同源重组进行基因打靶载体的构建 15

3.基因捕获载体和诱变作用 29

4.在胚胎干细胞中的染色体工程技术 49

5.通过寡核苷酸单链DNA在胚胎干细胞的基因修饰 79

6.shRNA转基因小鼠的制备 101

7.利用甲基磺酸乙酯对小鼠胚胎干细胞的诱变 131

第二部分:干细胞操作 141

8.小鼠胚胎干细胞的基因打靶 141

9.小鼠胚胎干细胞的操作 165

10.胚胎干细胞流程的建立 187

11.双基因敲除胚胎干细胞的制备 205

12.体外小鼠胚胎干细胞全能性差异分析 219

13.胚胎干细胞克隆及小鼠核移植 251

第三部分:小鼠遗传工程 269

14.小鼠囊胚的分离,显微注射及移植 269

15.嵌合体的聚集:包括胚胎干细胞,二倍体,四倍体胚胎 287

16.利用八细胞胚胎干细胞显微注射获得全能胚胎干细胞F0代小鼠 311

17.利用细菌人工染色体进行Cre重组表达转基因小鼠的制备 325

18.诱导小鼠 343

19.建立和应用Cre重组酶转基因数据库 365

20.在小鼠中进行转座子诱变 379

21.慢病毒转基因技术 391

22.精子冷冻保存和体外受精 407

第四部分:表型分析 423

23.在转基因小鼠的表型中遗传背景的影响 423

24.突变小鼠的病理表型 435

25.首要系统表型 463

索引 511