第一篇 生物化学与介子生物学实验基本知识与理论 1
第一部分 生物化学与分子生物学实验基本知识 1
一、实验室基本规则 1
二、实验室基本操作 2
三、实验样品的制备 6
四、实验误差与数据处理 8
五、实验记录与实验报告 12
第二部分 生物化学实验基本技术理论 14
一、分光光度技术 14
二、层析技术 20
三、电泳技术 37
四、离心技术 43
第三部分 分子生物学实验基本技术理论 48
一、重组DNA技术 48
二、核酸分子杂交技术 52
三、聚合酶链反应技术 59
四、蛋白质印迹技术 65
第四部分 生物化学与分子生物学专业常用数据库及其应用 67
一、常用数据库 67
二、常用分析工具 74
三、真核基因启动子区生物信息学分析 85
四、MicroRNA靶标的预测 90
第二篇 生物化学与介子生物学实验揉作 95
第五部分 生物化学实验操作 95
实验一 蛋白质的性质 95
实验二 蛋白质含量测定 101
实验三 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白 111
实验四SDS-PAGE蛋白电泳 113
实验五 蛋白质双向电泳 116
实验六 氨基酸与蛋白质层析 119
实验七 肽或蛋白质N-端氨基酸残基序列测定 126
实验八 核酸的分离提取、鉴定及含量测定 134
实验九 双脱氧链末端合成终止法测定DNA序列 137
实验十 酶反应条件的选择 143
实验十一 酶活性测定 148
实验十二 酶反应速度与米氏常数测定 149
实验十三 血糖（葡萄糖）测定 153
实验十四 脂类测定 154
实验十五 代谢产物测定 162
第六部分 分子生物学实验操作 166
实验十六 质粒DNA的提取、酶切及电泳 166
实验十七DNA片段的回收、连接与转化 169
实验十八 重组子的转化与筛选 172
实验十九 重组DNA在原核细胞中的表达 175
实验二十 常规PCR及RT-PCR 177
实验二十一 实时定量PCR（real-time PCR） 181
实验二十二DNA的分子杂交——Southern印迹 183
实验二十三RNA的分子杂交——Northern印迹 187
实验二十四 蛋白质的免疫印迹——Western印迹 190
实验二十五cDNA文库的构建 191
实验二十六 荧光素酶报告基因检测启动子活性 197
实验二十七 电泳迁移阻滞实验 199
实验二十八 染色质免疫沉淀实验 205
实验二十九 酵母双杂交实验 210
实验三十RNA干扰实验 214
附录 220
附录1化学试剂分级与注意事项 220
附录2常用缓冲液的配制 221
附录3硫酸钱饱和度计算表 228
附录4常用培养基及抗生素的配制 230
附录5离心机转速（r/min）与相对离心力（RCF）的换算 233