第1章 组织、细胞标本的采取与处理 1
第一节 组织标本 1
一、取材程序 1
二、标本收验与核对 1
三、标本肉眼检查及其描述 1
四、组织块切取 2
五、记录内容 3
第二节 标本固定 3
一、组织固定的目的 3
二、常用固定方法 4
三、常用固定液的种类及特点 4
四、注意事项及其影响因素 6
五、常用单纯固定液 7
六、常用混合固定液 7
第三节 组织冷冻切片 10
第四节 分子病理学研究标本 12
第五节 骨组织标本 12
一、送检标本描述与处理 12
二、常用脱钙溶液及方法 13
三、脱钙后处理 15
四、脱钙注意事项 15
第六节 细胞学样本 16
一、宫颈、阴道脱落细胞 16
二、呼吸系统细胞 17
三、体腔液脱落细胞 18
四、脑脊液脱落细胞 18
五、常用固定方法 19
六、常用固定液 20
七、常见问题及解决方法 20
第七节 组织样本常规处理方法 20
一、洗涤 20
二、脱水 21
三、透明 22
四、浸蜡 23
五、包埋 24
第八节 石蜡切片制备及苏木素-伊红染色 26
一、石蜡切片制备 26
二、苏木素-伊红染色 27
第九节 常用特殊染色技术 30
一、胶原纤维染色 30
二、网状纤维染色 31
三、弹力纤维染色 32
四、脂肪染色 33
五、糖原染色 34
六、黏液染色 34
七、基底膜染色 36
八、淀粉样蛋白染色 37
九、横纹肌染色 38
十、肥大细胞染色 38
十一、抗酸杆菌染色 39
十二、真菌染色 39
第2章 免疫组织化学技术 41
第一节 概述 41
一、主要特点 41
二、发展简史 41
三、抗原 42
四、抗体 43
第二节 基本方法 44
一、免疫荧光技术 44
二、免疫胶体金技术 45
三、免疫酶组织化学技术 50
四、双重染色技术 55
五、染色结果判定 57
第三节 免疫组织化学的应用 58
一、细胞学研究 58
二、病原体检查 58
三、诊断病理学研究 59
第3章 核酸分子原位杂交技术 63
第一节 概述 63
一、发展简史 63
二、技术特点与决定成功的因素 64
第二节 技术要领 64
一、选择探针的原则 64
二、探针的种类与特点 65
三、探针的标记物 66
四、标记探针纯化方法 67
五、探针的鉴定 67
第三节 原位杂交实验 67
一、实验程序 68
二、对照实验 72
三、常见问题及对策 73
第四节 荧光原位杂交 74
一、发展简史 74
二、基本原理 74
三、显色方法 75
四、调色方法 75
五、FISH方法 75
六、特异性探针 75
第4章 聚合酶链反应技术 77
第一节 概述 77
一、扩增步骤 77
二、引物设计 78
三、DNA聚合酶 78
四、反应体系 79
五、扩增过程常见问题处理 81
六、PCR污染及其预防措施 81
第二节 常用PCR技术 82
一、双链DNA模板的PCR扩增 82
二、PCR扩增RNA 82
三、不对称PCR 83
四、原位聚合酶链反应 84
五、长片段DNA的PCR技术 85
第三节 荧光定量PCR技术 86
第5章 蛋白质双向电泳、Western印迹法和质谱技术 90
第一节 双向电泳 90
第二节 Western印迹法 95
第三节 蛋白质质谱分析 99
第6章 其他常用技术 105
第一节 组织芯片技术 105
一、概述 105
二、组织芯片制作 106
三、研究应用 113
第二节 激光捕获显微切割技术 115
一、概述 115
二、切割前组织处理 120
三、LCM切割过程 122
四、研究应用 124
第三节 激光扫描共聚焦显微镜技术 127
一、概述 127
二、主要图像模式 130
三、图像采集 130
四、样品制备 132
五、主要功能 133
六、研究应用 134
第四节 流式细胞技术 135
一、流式细胞仪 136
二、检查样品处理 139
三、研究应用 140
第五节 电子显微镜技术 141
一、电子显微镜简介 141
二、检查样品处理 143
三、研究应用 145