第一篇 显微镜技术第一章 光学显微镜及其使用 3
实验一 普通光学显微镜及其使用 3
实验二 特殊光学显微镜及其使用 7
Ⅰ.暗视野显微镜 8
Ⅱ.相差显微镜 9
Ⅲ.偏振光显微镜 12
Ⅳ.微分干涉相差显微镜 14
Ⅴ.荧光显微镜 15
实验三 激光扫描共聚焦荧光显微镜和双光子激光扫描荧光显微镜 19
Ⅰ.激光扫描共聚焦荧光显微镜 19
Ⅱ.双光子激光扫描荧光显微镜 23
第二章 电子显微镜及其使用 29
实验四 透射电子显微镜技术 29
Ⅰ.透射电子显微镜的原理、用途与使用方法 29
Ⅱ.透射电子显微镜样品制备(超薄切片) 32
实验五 扫描电子显微镜技术 40
Ⅰ.扫描电子显微镜的原理、用途与使用方法 40
Ⅱ.扫描电子显微镜样品制备 43
实验六 电镜酶细胞化学技术 47
实验七 核酸大分子的电子显微镜观察 50
第二篇 基础性实验第三章 细胞形态结构和生理活动 57
实验八 细胞显微结构观察 57
实验九 细胞器的活体染色与观察 60
Ⅰ.高尔基体活体染色与观察 62
Ⅱ.内质网活体染色与观察 62
Ⅲ.液泡和溶酶体的活体染色与观察 62
Ⅳ.线粒体活体染色与观察 63
Ⅴ.细胞核活体染色与观察 64
实验十 叶绿体的分离、纯化及荧光观察 65
实验十一 细胞膜的渗透性 69
实验十二 细胞凝集反应 71
实验十三 细胞生死状态的鉴别 75
实验十四 细胞骨架组分——微丝、微管的荧光标记定位 80
Ⅰ.微丝的直接荧光标记定位 80
Ⅱ.微管的间接免疫荧光定位 82
实验十五 脂质体的制备 85
实验十六 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能检测 89
实验十七 T、B淋巴细胞的分离及活性检测 93
第四章 细胞分裂与染色体标本制备 98
实验十八 动物细胞有丝分裂及染色体标本制备 98
实验十九 植物细胞有丝分裂及染色体标本制备 102
Ⅰ.常规压片法制备植物细胞染色体标本 102
Ⅱ.去壁-低渗火焰干燥法制备植物细胞染色体标本 104
实验二十 减数分裂观察与染色体标本制备 107
Ⅰ.植物花粉母细胞减数分裂观察与染色体标本制备 107
Ⅱ.动物生殖细胞减数分裂观察与染色体标本制备 110
第三篇 综合性与设计性实验第五章 细胞培养、遗传转化及基因表达 115
实验二十一 植物组织培养(设计性实验) 115
实验二十二 植物原生质体的分离及外源基因的瞬时表达 119
实验二十三 动物细胞培养 122
实验二十四 体外培养细胞的冻存、复苏和活力测定 128
实验二十五 培养细胞生长曲线绘制和有丝分裂指数的测定 130
Ⅰ.细胞生长曲线的测定 131
Ⅱ.培养细胞有丝分裂指数的测定 132
实验二十六 动物细胞融合 134
实验二十七 小鼠胚胎干细胞培养及体外诱导分化 137
实验二十八 动物细胞显微注射技术 141
实验二十九 哺乳动物细胞转染技术 146
实验三十 GUS和GFP报告基因在植物组织中的表达及其检测 148
第六章 染色体分析技术 152
实验三十一 细胞分裂异常与染色体畸变(设计性实验) 152
Ⅰ.植物细胞分裂异常与染色体畸变 152
Ⅱ.肿瘤细胞有丝分裂异常与染色体畸变 155
实验三十二 人外周血淋巴细胞培养及其染色体分带与核型分析 157
实验三十三 植物细胞染色体显带与核型分析 162
实验三十四 人类染色单体色差分析技术 164
实验三十五 哺乳类细胞早熟染色体凝集诱导 167
实验三十六 端粒序列的荧光原位杂交定位 169
第七章 细胞周期与细胞凋亡 173
实验三十七 动物细胞周期检测 173
实验三十八 细胞同步化 176
实验三十九 植物细胞周期检测 178
实验四十 抗癌药物对肿瘤细胞增殖的影响(设计性实验) 181
实验四十一 细胞凋亡的诱导、形态学观察及生化特征检测(设计性实验) 186
Ⅰ.细胞凋亡的诱导与形态学观察 186
Ⅱ.细胞凋亡的生化特征检测 188
实验四十二 单细胞凝胶电泳检测细胞中DNA链的断裂 191
附录附录1 细胞生物学实验室注意事项 197
附录2 实验报告的书写要求 198
附录3 实验室器具的清洁和灭菌 201
附录4 显微镜物镜常用的一些符号说明 202
附录5 离心机转数与离心力换算表及公式 204
附录6 试剂浓度的表示法及其计算 205
附录7 部分动、植物及人的染色体数目 207
附录8 常用缓冲液的配制 208
附录9 荧光染料参数 213
附录10 常用培养用液的配制 216
附录11 常用细胞生物学词汇 220