上篇 基础理论 1
1 哺乳动物的精子 1
1.1 精子的发生 1
1.2 附睾内精子的贮存和成熟 6
1.3 精子的形态结构 8
1.4 精子的化学组成及分子构型 15
1.5 雌性生殖道内的精子 17
1.6 异常精子和不育 19
2 哺乳动物的卵子 24
2.1 卵子的形成 24
2.2 排卵 27
2.3 卵子成熟发育中的基因活动和蛋白质合成 30
2.4 卵母细胞成熟发育的调控 35
2.5 卵母细胞与卵丘细胞间的关系 39
2.6 卵子的一般形态构造 41
2.7 卵子的超微结构 44
2.8 卵子的老化和异常 51
2.9 卵子的孤雌生殖 52
3 哺乳动物的受精 57
3.1 精子的获能及其变化 57
3.2 精子的顶体反应 61
3.3 精子的穿卵 68
3.4 精卵融合 75
3.5 精卵融合后的反应 80
4 哺乳动物的早期胚胎发育 85
4.1 胚胎的早期发育 85
4.2 早期胚胎的细胞分化 90
4.3 早期胚胎发育中基因的表达 98
4.4 早期胚胎发育中的酶活动 100
4.5 早期胚胎的死亡和免疫性丢失 101
4.6 胚胎与母体间的相互关系 103
4.7 早期胚胎发育的内环境 105
5 哺乳动物卵母细胞和胚胎保存 112
5.1 卵母细胞和胚胎保存的意义 112
5.2 卵母细胞和胚胎的低温保存 113
5.3 超低温保存的原理 116
5.4 卵母细胞的超低温保存 121
5.5 胚胎的超低温冷冻 125
6 哺乳动物胚胎移植及分割 130
6.1 胚胎移植研究简史 130
6.2 胚胎移植的意义 132
6.3 胚胎移植的生理学基础 134
6.4 胚胎移植的原则及条件 135
6.5 胚胎移植的基本技术程序 137
6.6 胚胎移植的效果和发展前景 140
6.7 胚胎分割 142
7 哺乳动物的体外受精 146
7.1 体外受精的历史和现状 146
7.2 卵母细胞的体外成熟 149
7.3 影响卵母细胞体外成熟的因素 152
7.4 精子的体外获能 156
7.5 卵母细胞的体外受精 158
7.6 精子的显微注射 161
7.7 体外受精胚胎的发育 163
7.8 体外受精的应用前景 166
8 哺乳动物性别控制 169
8.1 性别控制的发展历史 169
8.2 性别决定理论 170
8.3 精子的性别控制 171
8.4 胚胎的性别控制 174
8.5 结论 179
9 哺乳动物嵌合体 181
9.1 嵌合体的研究历史 181
9.2 嵌合体的标记 182
9.3 嵌合体的制作方法 183
9.4 嵌合体制作的局限性 185
9.5 嵌合体研究的现状 186
9.6 嵌合体的应用 188
10 哺乳动物胚胎细胞核移植 191
10.1 核移植的原理和意义 191
10.2 核移植的历史和现状 192
10.3 核移植技术程序 194
10.4 核移植中细胞核的构建和活化 198
10.5 影响核移植的因素 199
10.6 核移植技术的应用和前景 203
11 哺乳动物转基因 207
11.1 转基因的历史发展 207
11.2 转基因的方法 209
11.3 外源基因的整合 215
11.4 外源基因的表达 217
11.5 转基因的生理效应与遗传 221
11.6 基因转移的鉴定 223
11.7 转基因技术的应用和前景 223
11.8 转基因存在的困难和问题 228
11.9 转基因技术今后急待解决的问题 233
12 哺乳动物胚胎干细胞 235
12.1 ES细胞的生物学特性 235
12.2 ES细胞与胚胎细胞的关系 237
12.3 ES细胞系的建立方法 237
12.4 ES细胞研究的现状和问题 239
12.5 ES细胞的应用和前景 241
下篇 实验技术 245
13 哺乳动物配子和胚胎的细胞学技术 245
13.1 精子的光学显微镜观察 245
13.2 卵子和胚胎的染色体检查 249
13.3 精子的电子显微镜观察 251
13.4 卵子和胚胎的电子显微镜观察 252
13.5 配子和胚胎的电镜细胞化学技术 253
13.6 胚胎的银染和放射自显影技术 256
13.7 配子和胚胎的免疫电镜技术 257
14 哺乳动物卵子和胚胎的分子生物学技术 258
14.1 卵子和胚胎的核酸分离 258
14.2 卵子和胚胎的电泳技术 260
14.3 卵子和胚胎的cDNA文库构建 264
15 哺乳动物胎胚工程应用技术 274
15.1 配子和胚胎的冷冻保存 274
15.2 胚胎的分割 278
15.3 胚胎嵌合 280
15.4 胚胎性别鉴定 282
15.5 体外受精 284
15.6 转基因动物的制作 288
15.7 小鼠胚胎的细胞核移植 292
15.8 小鼠胚胎干细胞的分离培养 296
附录 299
附录1 电镜样品制备常用溶液 299
附录2 组织培养常用试剂的配制 306
附录3 几种生理盐溶液 320