第一篇 生物化学实验 1
实验一 植物细胞蛋白质的提取 1
实验二 牛乳中酪蛋白的制备及等电点的测定 3
实验三 大豆蛋白的提取及含量测定 5
实验四 双缩脲法（Biuret法）测定蛋白质含量 7
实验五Folin-酚法（Lowry法）测定蛋白质含量 9
实验六 考马斯亮蓝染色法（Bradford法）测定蛋白质含量 12
实验七 双辛丹宁法（BCA）测定蛋白质含量 14
实验八 紫外（UV）吸收法测定蛋白质含量 16
实验九 微量凯氏（Kjeldahl）定氮法测定蛋白质含量 18
实验十 凝胶过滤层析法测定蛋白质相对分子质量 20
实验十一SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子质量 23
实验十二 盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白 26
实验十三 滤纸层析及薄层层析法分离与鉴定氨基酸 28
一、氨基酸的纸层析 28
二、氨基酸的薄层层析 29
实验十四 离子交换柱层析法分离氨基酸 31
实验十五 定磷法定量测定核酸 33
实验十六 紫外（UV）吸收法定量测定核酸 35
实验十七 酵母RNA提取与地衣酚测定法 37
实验十八 发酵过程中无机磷的利用 40
实验十九 黄连素的提取 42
实验二十 黄连素的紫外光谱分析 44
实验二十一 肝糖原的提取及鉴定 46
实验二十二 血糖的定量测定 48
实验二十三Somogyi-Nelson比色法测定还原糖含量 50
实验二十四 硫酸一酚法测定糖含量 52
实验二十五 淀粉的测定 54
实验二十六 薄层层析法分离鉴定糖类物质 56
实验二十七3，5-二硝基水杨酸法测定还原糖和总糖 58
实验二十八 糖的呈色反应和还原糖的检验 61
实验二十九 糖酵解中间产物的鉴定 65
实验三十 胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响——邻甲苯胺法测定血液葡萄糖浓度 67
实验三十一 植物总黄酮的提纯与鉴定 70
实验三十二2，6-二氯酚靛酚滴定法定量测定维生素C 72
实验三十三 粗脂肪的提取和索氏（Soxhlet）提取法定量测定粗脂肪含量 74
实验三十四 脂肪碘值的测定 76
实验三十五 血清三酰甘油的测定 78
实验三十六 胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇 80
实验三十七 二乙酰一肟法测定血清尿素 82
实验三十八 酶促反应进程曲线的制作和初速度的测定 84
实验三十九 酸性磷酸酯酶的提取与Folin-酚法测定其活力 86
实验四十 双倒数作图法测定碱性磷酸酶米氏常数 89
实验四十一King氏法测定血清谷丙转氨酶（SGPT）活性 92
实验四十二 酶联免疫吸附试验（ELISA）检测人体血清中乙型肝炎病毒表面抗体 94
实验四十三 激活剂、抑制剂、温度、pH对酶活性的影响 98
实验四十四 细菌血栓溶解酶活性测定 100
实验四十五 过氧化氢酶Km值的测定 102
实验四十六 用正交法测定几种因素对酶活力的影响 104
实验四十七 酯酶的分离、纯化与活性测定 108
实验四十八 脲酶Km值的简易测定 111
第二篇 分子生物学实验 114
实验一 真核生物细胞染色体DNA的提取及含量测定 114
实验二 一步法提取动物肝脏组织总RNA 117
实验三 植物总RNA的提取 119
实验四 目的基因PCR扩增及产物回收 122
实验五 碱裂解法微量制备质粒DNA 125
实验六 质粒DNA的大量提取和纯化 127
实验七 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 129
实验八 重组质粒的连接 131
实验九 重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞及筛选、鉴定 133
实验十 重组质粒DNA的酶切 135
实验十一DNA酶切片段的分离与纯化 137
实验十二 重组表达质粒的原核表达 139
实验十三DNA印迹杂交 142
实验十四 凝胶电泳阻滞实验 146
实验十五 动物组织总蛋白的提取 148
实验十六SDS-PAGE与蛋白质印迹 150
实验十七 真核生物mRNA的分离纯化 153
实验十八cDNA文库的构建 157
实验十九 利用RNAi技术鉴定基因功能 164
实验二十 酵母双杂交系统测定蛋白质相互作用 166
实验二十一GST融合蛋白沉降（GST Pull-Down）技术 169
附录 171
一、实验室主要仪器使用操作规程与注意事项 171
二、常用缓冲溶液的配制 178