第一章 定量分析技术 1
实验一 单糖定量测定——3,5-二硝基水杨酸法 1
实验二 蛋白质定量测定(Ⅰ)——Folin酚法 4
实验三 蛋白质定量测定(Ⅱ)——考马斯亮蓝法 7
实验四 蛋白质定量测定(Ⅲ)——紫外吸收法 11
实验五 核酸定量测定(Ⅰ)——定磷法 15
实验六 核酸定量测定(Ⅱ)——紫外吸收法 19
参考文献 21
第二章 层析技术 23
实验七 凝胶过滤层析——测定蛋白质相对分子质量 23
实验八 离子交换层析——分离核苷酸 33
实验九 亲和层析——分离谷胱甘肽转硫酶 42
附:谷胱甘肽转硫酶的动力学研究 48
实验十 金属螯合层析——分离超氧化物歧化酶 54
实验十一 薄层层析——蛋白质氨基酸组成分析 59
参考文献 67
第三章 电泳技术 68
实验十二 聚丙烯酰胺凝胶净电荷电泳——乳酸脱氢酶同工酶的鉴定 68
实验十三 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳——测定蛋白质相对分子质量 77
实验十四 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳——测定蛋白质等电点 84
参考文献 92
第四章 生物大分子制备技术 94
实验十五 细胞色素c的制备及含量测定 94
实验十六 猪脾DNA的提取 99
附:二苯胺显色法测定脱氧核糖核酸含量 102
参考文献 105
第五章 免疫学技术 106
实验十七 抗血清的制备和抗体的纯化 106
实验十八 抗体效价测定及组分鉴定——双向扩散,对流免疫电泳,微量免疫电泳,双向免疫电泳 110
实验十九 酶联免疫吸附测定——间接法测定抗体效价 118
参考文献 125
附录 127
一、常用缓冲溶液的配制方法 127
二、硫酸铵饱和度的常用计算表 134
三、常用市售酸、碱的浓度 136
四、常用蛋白质相对分子质量标准参照表 136
五、某些蛋白质的物理性质 137
六、一些常见蛋白质等电点参考值 138
七、常用离子交换纤维素 139
八、离子交换层析介质的技术数据 140
九、凝胶过滤层析介质的技术数据 141
十、部分亲和层析介质的技术数据 143
十一、各种层析介质所允许的最大操作压 144
十二、离心机转数(r·min -1)与相对离心力(RCF)的换算 145