第一篇 生物化学检验实验指导 3
第一章 生物化学检验实验室基本知识 3
实验一 玻璃器皿的清洗与干燥 3
实验二 常用量器的使用与校正 4
实验三 分光光度计的使用 7
第二章 生物化学检验基本技术 10
实验一 紫外分光光度法测定血清蛋白质 10
实验二 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质 12
第三章 方法学评价与试剂盒评价试验 16
实验一 批内重复性试验 16
实验二 回收试验 19
实验三 干扰试验 20
实验四 方法比较试验 22
实验五 试剂盒质量评价试验 25
一、终点法时间反应曲线试验 25
二、连续监测法时间反应曲线试验 26
第四章 糖代谢紊乱的生物化学检验 28
实验一 葡萄糖氧化酶法测定血清(浆)葡萄糖 28
实验二 己糖激酶法测定血清(浆)葡萄糖 31
实验三 邻甲苯胺法测定血清(浆)葡萄糖 33
实验四 乳酸脱氢酶法测定全血乳酸 35
第五章 血清(浆)脂类及脂蛋白代谢紊乱的生物化学检验 38
实验一 乙酰丙酮显色法测定血清甘油三酯 38
实验二 磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯 40
实验三 胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇 42
实验四 磷钨酸-镁沉淀法测定高密度脂蛋白-胆固醇 44
实验五 聚乙烯硫酸盐沉淀法测定血清低密度脂蛋白-胆固醇 46
第六章 电解质和酸碱平衡紊乱的生物化学检验 48
实验一 离子选择性电极法测定血清钠、钾离子 48
实验二 离子选择性电极法测血清氯离子 51
实验三 血气分析 53
第七章 钙磷镁和微量元素代谢紊乱的生物化学检验 59
实验一 邻甲酚酞络合酮法测血清总钙 59
实验二 离子选择性电极法测定血清钙 61
实验三 还原钼蓝法测定血清磷 63
实验四 甲基麝香草酚蓝法测定血清镁 65
实验五 双环己酮草酰二腙比色法测定血清铜 67
实验六 吡啶偶氮酚比色法测定血清锌 69
第八章 肝胆疾病的生物化学检验 72
实验一 双缩脲法测定血清总蛋白 72
实验二 溴甲酚绿法测定血清白蛋白 75
实验三 改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素 77
实验四 胆红素氧化酶法测定总胆红素和结合胆红素 80
实验五 酶比色法测定血清总胆汁酸 83
实验六 赖氏法测定血清丙氨酸氨基转移酶 85
实验七 连续监测法测定血清丙氨酸氨基转移酶 88
实验八 赖氏法测定血清门冬氨酸氨基转移酶 90
实验九 连续监测法测定血清门冬氨酸氨基转移酶 92
第九章 肾脏疾病的生物化学检验 95
实验一 去蛋白碱性苦味酸法测定血清肌酐 95
实验二 不去蛋白速率法测定血清肌酐 97
实验三 二乙酰一肟法测定血清尿素 98
实验四 酶偶联速率法测定血清尿素 100
实验五 尿酸酶-过氧化物酶偶联比色法测定血清尿酸 102
第十章 心血管系统疾病的生物化学检验 105
实验一 连续监测法测定血清肌酸激酶 105
实验二 琼脂糖凝胶电泳法测定血清肌酸激酶同工酶 107
第十一章 内分泌疾病的生物化学检验 111
实验一 酶联免疫吸附法测定人绒毛膜促性腺激素 111
实验二 尿17-酮类固醇测定 112
实验三 尿香草扁桃酸测定 115
第十二章 其他系统疾病的生物化学检验 118
实验一 碘-淀粉比色法测定血清淀粉酶 118
实验二 比浊法测定血清脂肪酶 120
实验三 联大茴香胺比色法测定血清铜蓝蛋白 121
第二篇 分子生物学检验实验指导 127
第十三章 分子生物学常规仪器及设施 127
实验一 常规仪器 127
一、pH计 127
二、分光光度计 127
三、离心机 127
四、电泳装置 128
五、DNA扩增仪 128
实验二 常规设备 128
一、温度控制系统 128
二、水净化装置 129
三、消毒设备 129
四、计量系统 129
五、其他设备 129
第十四章 电泳分离技术 130
实验一 琼脂糖凝胶电泳 130
实验二 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) 132
第十五章 核酸的分离 135
实验一 真核细胞基因组DNA的制备——全血白细胞DNA的提取 135
实验二 真核细胞基因组DNA的制备——组织细胞DNA的提取 136
实验三 质粒DNA的提取与纯化 138
实验四 细胞总RNA的提取 142
实验五 逆转录反应 145
实验六 DNA和RNA含量的测定 146
第十六章 分子克隆 148
实验一 聚合酶链反应(PCR)技术体外扩增DNA 148
实验二 DNA片段的回收 151
实验三 质粒DNA的限制性内切酶酶切 152
实验四 连接反应 154
实验五 大肠杆菌JM109感受态细胞的制备及重组子的转化 155
实验六 大肠杆菌的电击转化 156
实验七 转化细胞的筛选 158
实验八 真核细胞基因转染技术 159
实验九 重组蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 161
第十七章 核酸分子杂交 163
实验一 Western印迹 163
实验二 Southern印迹 165
实验三 Northern印迹 167
实验四 荧光原位杂交 169
第三篇 基因诊断实验指导 175
实验一 PCR法检测乙型肝炎病毒(HBV)核酸 175
实验二 凝血因子Ⅶ及其基因MspI多态性的PCR-RFLP分析 176
参考文献 178