第一章 转基因动物概述 1
一、转基因动物研究简史 1
二、为什么研究和应用转基因动物 4
(一)什么是转基因动物 4
(二)为什么要研究和应用转基因动物 4
(三)转基因动物的命名 5
(四)关于转基因动物所涉及的伦量学问题 5
三、转基因动物技术的现状 6
四、新的技术高潮即将来临 9
第二章 哺乳动物生殖生理 15
一、性腺和配子发育的控制 15
(一)生殖系统的发育 15
(二)下丘脑一垂体对生殖的控制 16
(三)促性腺激素释放的变化 17
(四)卵泡发育 18
(一)排卵 19
二、排卵和黄体的控制 19
(二)黄体 20
(三)卵巢周期 22
三、生殖周期 23
(一)生殖周期 23
(二)初情期和生殖衰老期 24
(三)性行为 25
(四)影响生殖周期的外部因素 26
(一)妊娠 29
四、妊娠和分娩 29
(二)分娩 32
第三章 转基因方法 35
一、显微注射 35
(一)什么是显微注射 35
(二)显微注射生产转基因小鼠 36
(三)显微注射生产转基因猪 40
(四)显微注射生产转基因羊 43
(五)显微注射生产转基因牛 45
(六)显微注射技术的改进 47
二、体细胞克隆生产转基因动物 52
(一)怎样通过体细胞克隆生产转基因动物 52
(二)体细胞克隆生产转基因绵羊 53
(三)体细胞克隆生产转基因牛 56
三、其他转基因方法 56
(一)反转录病毒载体 56
(二)精子介导 59
四、转基因动物的传代和检测 62
(一)转基因研究材料的传代 62
(二)转基因动物的检测 62
第四章 基因的整合和表达 67
一、基因整合 67
(一)随机整合 67
(二)同源重组 70
(一)组织特异性表达 71
二、动物基因表达的基础知识 71
(二)染色质的结构 72
(三)真核基因表达调控 73
三、外源基因的表达 79
(一)真核基因表达的调控序列 79
(二)表达结构的构建和功能域转移 82
一、动物乳腺是优良的蛋白质合成器官 86
(一)动物乳腺合成蛋白质的能力 86
第五章 动物乳腺生物反应器 86
(二)动物乳腺是一种优良的生物反应器 87
二、研制动物乳腺生物反应器的条件 88
(一)动物种类的选择 88
(二)转基因技术的选择 90
(三)基因表达载体的选择 93
三、目标产品的选择 94
(一)血液蛋白质 94
(二)第二代医用蛋白质 95
(四)其他工业蛋白质 96
(三)基因工程牛奶 96
四、研究设施的建设 97
(一)建设完善的研究设施的必要性 97
(五)兽医产品 97
(二)实验室条件 98
(三)实验动物 99
(四)环境条件 100
第六章 我国转基因动物研究概况 103
一、猪的基因工程育种 103
(一)立项背景和研究目标 103
(二)目的基因的分离和表达载体的构建 103
(三)转基因技术体系的建立 104
(四)转基因猪的生产 106
(五)外源基因的遗传稳定性 107
(六)转基因猪的生产性能 108
(七)转基因猪研究的发展前景 108
(二)目的基因研究 109
二、动物乳腺生物反应器 109
(一)立项背景和项目的总体目标 109
(三)乳腺组织特异性表达载体研究 110
(四)转基因技术 111
三、器官移植用转基因动物 112
(一)项目的主要目标 112
(二)研究工作的主要进展 113
第七章 动物克隆技术 117
一、研究动物克隆技术的意义 117
(一)什么是动物克隆 117
(二)动物克隆技术发展简史 117
二、影响核移植效率的主要因素 120
(一)细胞核供体 120
(二)受体细胞质 121
(三)受体卵母细胞成熟度与激活 122
三、体细胞克隆的技术环节 123
(一)体细胞的制备 123
(四)卵母细胞去核的效果 123
(二)卵母细胞的制备 124
(三)体细胞核移植 125
四、体细胞克隆胚胎的移植 126
(一)胚胎移植 126
(二)体细胞核移植胚胎的成活率 127
(三)体细胞克隆动物初生时的特点 127
第八章 定向基因转移技术 131
一、定向基因转移的意义 131
(一)什么是定向基因转移 131
(二)定向基因转移的科学意义 131
(三)应用基因打靶技术的必要条件 133
二、定向基因转移载体的实验设计 134
三、定向基因转移的细胞技术 137
(一)哺乳动物细胞在离体培养中的特性类似于微生物 137
(二)操作哺乳动物细胞与操作微生物的重大差别 138
(三)定向基因转移技术是依赖小鼠胚胎干细胞建立起来的 139
(四)通过体细胞进行定向基因转移 140
四、同源整合细胞克隆的筛选 142
(一)非同源整合是在哺乳动物细胞中基因打靶的主要障碍 142
(二)同源重组细胞克隆的筛选 143
五、条件性定向基因转移 148
(一)什么是条件性定向基因转移 148
(二)Cre/Loxp重组体系 148
(三)Cre/Loxp系统在定向基因转移中的应用 150
(四)条件性基因打靶 154
第九章 转基因动物的发展前景 160
一、基因功能的研究 160
二、在农业上的应用 161
三、在医学上的应用 163
第十章 转基因家禽的方法与应用 166
一、禽类的早期胚胎发育 166
二、生产转基因家离的方法 167
三、转基因家禽的应用与前景 172