第一篇 常用生物化学实验技术及原理 1
第一章 实验的准确性 1
一、单位和量 1
(一)基本单位 1
(二)导出单位 2
(三)词头 3
(四)与SI并用的单位 3
(五)摩尔和浓度 4
二、准确测量 5
(一)误差来源 5
(二)正态分布曲线 8
(三)生物材料中数据的变化 10
(四)容量玻璃仪器 11
三、实验报告 11
(一)结果的记录 12
(二)表格和图解 13
一、膜 18
第十章 透析 18
二、溶剂 19
三、物理条件 19
四、董南(Donnan)膜平衡 20
第三章 层析法 22
一、柱层析法的一般技术 23
二、几种常用的层析法 26
(一)吸附层析 26
(二)离子交换层析 27
(三)分配层析 32
(四)薄层层析 38
(五)凝胶层析 40
(六)亲和层析 46
第四章 电泳技术 51
一、电泳技术基本原理 52
(一)电场强度(电势梯度) 53
(二)溶液的pH值 54
(三)溶液的离子强度 54
(四)电渗现象 55
二、纸电泳 56
四、琼脂凝胶电泳 57
三、醋酸纤维薄膜电泳 57
五、聚丙烯酰胺凝胶电泳 59
第五章 分光光度法 69
一、原理 69
二、分光光度计的基本部件 73
(一)光源 73
(二)单色器 74
(四)检测器 75
(三)吸收池(比色杯、比色皿、比色池) 75
(五)测量装置 77
三、两种国产分光光度计的介绍 77
(一)721型分光光度计 77
(二)751G型分光光度计 79
第六章 放射性同位素技术 82
一、基本知识 82
(一)同位素 82
(二)射线的性质 83
(三)放射性衰变的规律 85
(四)放射性强度的单位 86
二、射线的探测 87
(一)盖革计数器 87
(二)闪烁计数器 88
三、放射自显影术 89
四、放射性同位素法的优缺点 90
一、组织样品 91
第七章 实验样品的制备 91
二、血液样品 93
三、尿液样品 93
第二篇 学生实验 96
第八章 糖类的化学 96
实验一 糖类的性质实验(一) 糖类的颜色反应 96
实验一 糖类的性质实验(一) 糖类的还原作用 100
实验三 总糖的测定--蒽酮比色法 103
第九章 脂类的化学 106
实验四 粗脂肪的提取和定量测定 106
实验五 脂肪碘值的测定 109
实验六 总氮量的测定--凯氏(Micro-Kjeldahl)定氮法 113
第十章 蛋白质的化学 113
实验七 氨基酸的分离鉴定--纸层析法 122
实验八 蛋白质的性质实验(一)蛋白质及氨基酸的呈色反应 125
实验九 蛋白质的性质实验(二)蛋白质的等电点测定和沉淀反应 133
实验十 血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳 142
实验十一 酪蛋白的制备 146
实验十二 甲醛滴定法测定氨基氮 148
实验十三 酵母核糖核酸的分离及组分鉴定 152
第十一章 核酸的化学 152
实验十四 菜化(花椰菜)中核酸的分离和鉴定 155
实验十五 肝细胞核中核酸(RNA和DNA)的分离与测定 159
实验十六 醋酸纤维薄膜电泳分离核苷酸 163
实验十七 薄层层析法分离AMP、ADP和ATP 165
第十二章 酶和维生素 169
实验十八 酶的特性 169
实验十九 枯草杆菌蛋白酶活力测定 177
实验二十 底物浓度对酶促反应速度的影响--米氏常数的测定 181
实验二十一 酶浓度对酶促反应速度的影响--用分光光度法测定碱性磷酸酶活性 184
实验二十二 胰凝乳蛋白酶的制备及活力测定 188
实验二十三 维生素C的定量测定 195
第十三章 新阵代谢 202
实验二十四 肌糖原的酵解作用 202
实验二十五 小麦萌发前后淀粉酶活力的比较 205
实验二十六 血糖的定量测定--GOD-PAP法 209
实验二十七 发酵过程中无机磷的利用 212
实验二十八 脂肪酸的β-氧化 216
实验二十九 氨基移换反应(一)血液中转氨酶活力的测定(分光光度法) 219
实验三十 氨基移换反应(二)谷丙转氨酶活性的鉴定(纸层析法) 223
第三篇 演示实验 227
实验一 聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳--血清蛋白的分离 227
实验二 离子交换柱层析法分离氨基酸 233
实验三 凝胶过滤法测定蛋白质相对分子质量 236
实验四 血红蛋白的两性解离 241
实验五 紫外分光光度法测定核酸的含量 243
实验六 透析实验(一) 蛋白质的透析 245
实验苯 透析实验(二) 糖类的透析 247
实验八 锂盐存在时蔗糖的燃烧 248
实验九 用铂和血液过氧化氢酶分解过氧化氢 249
实验十 吸附层析法分离叶子色素 251
实验十一 小白鼠氨中毒 253
实验十二 用阳离子交换树脂摄取氯化钠 254
附录 257
一、实验室规则 257
(一)玻璃仪器的洗涤 258
二、实验室基本操作 258
(二)搅拌和振荡 259
三、常用仪器的使用 260
(一)容量玻璃仪器的使用方法 260
(二)称量仪器的使用方法 262
(三)分光光度计 266
(四)离心机 269
(五)干燥箱和恒温箱 270
(六)电热恒温水浴 271
(七)电冰箱 271
(八)酸度计 273
四、常用缓冲溶液的配制 275
(一)磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 276
(二)柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0.1mol／L) 277
(三)醋酸-醋酸钠缓冲液(0.2mol／L) 278
(四)磷酸盐缓冲液 278
(五)巴比妥纳-盐酸缓冲液(18°C) 279
(六)Tris-盐酸缓冲液(25°C) 279
(一)某些常用指示剂 280
五、常用酸碱指示剂 280
(七)碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.1mol／L) 280
(二)混合指示剂 281
六、常用酸碱试剂的浓度及比重 281
七、标准溶液的配制和标定 282
(一)0.1mol／L氢氧化钠溶液的配制和标定 282
(二)0.1mol／L标准盐酸的配制和标定 283
(三)0.05mo1／L标准硫代硫酸钠溶液的制备和标定 283
八、元素的相对原子质量表 284
九、基础生物化学实验中学生使用仪器清单(一组) 286