目 录 1
总论 1
A 基因工程主要步骤的基本操作 5
实验一碱变性法抽提pBR322质粒DNA 5
实验二氯化铯密度梯度超离心提取pXZ 6
质粒DNA 22
实验三DNA的纯度、浓度与分子量的测定 36
DNA中的RNA 48
实验四用Sepharose 2B柱层析法去除质粒 48
实验五DNA的酶切与连接 59
实验六重组DNA的转化 78
实验七转化子DNA的快速鉴定——快速细胞 91
破碎法 91
实验八重组质粒DNA的快速制备与酶切 98
B 重组DNA的进一步检测 107
实验九DNA片段的分离——从琼脂糖凝胶中分离DNA片段 107
实验十 切口移位(Nick Translation)法制备32P-DNA探针 119
实验十一Southern印迹杂交法 133
实验十二菌落原位杂交 143
实验十三λ噬菌体DNA(分子量标记)的制备 151
实验十四 用质粒DNA释放法提取pYPI并测定其分子量 165
实验十五 电子显微镜法测定pYPI重组质粒DNA分子量 173
附录 185
一各种试剂的母液配方 185
二常用的抗菌素 189
三玻璃和塑料器皿的硅化 190
四核酸凝胶电泳图谱摄影 191
五X-光底片的冲洗方法 198
六常用仪器的操作方法 200
高速冷冻离心机(日立) 200
CENTRIKON T—2080型(瑞士)超速离心机 201
微波炉 204
液体闪烁计数仪 204
电子显微镜 205
参考文献 209