目 录 1
前言 1
1早期胚胎的培养方法 4
§1.1试管内受精和早期胚胎培养 4
1．研究小史 6
2．实验操作上的要点 8
3．遗传上完全纯合型小鼠制作技术的展望 10
3．小鼠以外的其他动物 14
1．体外受精 15
§1.2体外受精和早期胚胎培养 15
2．早期胚胎的培养 22
§1.3早期发育中的基因作用 27
1．卵子发育和精子形成 27
2．受精，卵裂及胚泡形成 29
3．着床及着床后的胚胎发育 31
2 哺乳动物胚胎内基因导入和实验操作 34
§2.1小鼠胚胎内的基因导入（总论） 34
1．小鼠胚胎内外源基因导入技术 35
1．用显微注射法把基因导入小鼠早期胚胎 36
§2.2小鼠胚胎内基因导入的技术 36
2．小鼠卵细胞上作显微注射的设备 37
§2.3外源基因导入哺乳动物体细胞 44
1．研究的目的 44
2．把外源基因导入细胞的种种方法 45
3．用红血球血影融合法转移DNA 47
4．显微注射和扎刺（pricking）法 48
§2.4动物细胞内基因的导入和表达 52
1．用代谢上有选择标记的DNA作性状转化 53
2．导入基因的回收 54
3．用基因导入法解析丝蛋白基因的转录机构 55
4．绢丝腺细胞内丝蛋白基因的显微注射 61
§2.5哺乳动物细胞内σ-晶体蛋白基因的导入和表达 63
1．δ－晶体蛋白基因 63
2．基因导入方法的商讨 63
3．小鼠水晶体上皮细胞中注入的δ－晶体蛋白基因的表达 64
4．基因表达的组织特异性 65
5．担负组织特异性的DNA区域 66
6．细胞方面的条件 68
§2.6小鼠受精卵中外源基因的导入 69
1．作为重组DNA的实验需要提出申请 69
2．外源基因的导入技术 70
3．以往报告的归纳 73
3核移植和染色体组操作 76
§3.1对小鼠受精卵作核移植 76
1．胚胎细胞核的全能性 78
2．受精卵细胞质使核活化和早期变化 81
3．核移植的新方法 83
1．核移植 85
§3.2核移植以及细胞融合中细胞核的构建和活化 85
2．异核体（heterokaryon） 89
3．杂种细胞以及重建细胞的核 93
§3.3用除去前核的方法作成遗传上完全纯合型小鼠 97
1．实验设备和器具 98
2．实验操作 100
§3.4应用早期胚胎的显微手术作出哺乳动物一卵性 103
多生仔的实验 103
1用2～8细胞期胚胎的实验 104
2．用桑椹期胚胎～胚泡做的实验 108
3．制作一卵性多仔实验的问题及展望 114
§3.5哺乳动物自发的单性发育 116
1．不会出生的自发单性发育胚胎 118
2．自发单性发育胚？正常胚胎之间的嵌合体 119
3．把自发单性发育胚的核注入到去核受精卵中 120
4．子宫外组织环境下的自发单性发育胚：畸胎瘤的形成 121
5．单性发育胚胎的发育工程在应用上的展望 122
1．老化的程序学说 123
§3.6老化和染色体组异常 123
2．一生过程和细胞中产生的异常 124
3．老化的遗传背景 126
4．老化和遗传性疾病 126
5．一生中生殖细胞数目的变化 127
6．卵巢和卵母细胞的加龄 128
7．生殖和加龄 129
8．老化和染色体组操作的可能性 130
1．小鼠的准备 132
§4.1小鼠嵌合体 132
4嵌合体 132
2．器具和培养液的准备 134
3．早期胚的采取 138
4．胚的联结和培养 139
§4.2大鼠嵌合体 140
1．大鼠和小鼠的不同点 140
2．大鼠嵌合体制作方法 141
3．大鼠嵌合体及其应用例子 145
§4.3异种胚之间嵌合体 145
1．异种胚嵌合体制作法 146
2．大鼠？小鼠之间嵌合体胚胎 148
3．小鼠？豚鼠间嵌合体胚胎 151
4．Mus caroli？Mus musculus嵌合体 152
§4.4畸胎瘤细胞注入嵌合体 153
1．畸胎瘤的诱发和它的性质 154
2．胚泡内畸胎瘤细胞的注入 155
4．畸胎瘤细胞与细胞工程的研究 156
3．假孕母体内的胚泡移植 156
5．作为注入嵌合体材料的畸胎瘤干细胞的将来及问题点 159
§4.5畸胎瘤细胞聚合嵌合体 160
1．用聚合法作成嵌合体胚—到胚泡形成 161
2．用聚合法作成嵌合体小鼠 165
§4.6嵌合体和神经发育 167
1．神经系统的发育 168
2．大脑皮质形成机构的解析 172
3．小脑的组织发育 175
4．网膜的形成 178
5．髓鞘形成 180
§4.7嵌合体与肿瘤发生 183
1．小鼠的卵巢性畸胎瘤特征 184
2．材料及方法 186
3．结果及考察 187
§4.8嵌合体和免疫识别 190
1．血液型嵌合体 191
2．自体耐受的机构与嵌合体 192
3．自体耐受的复杂性 193
5．MHC控制和嵌合体动物 194
4．T细胞的抗原识别与MHC控制 194
6．MHC控制与MHC耐受 199
§4.9嵌合体与T/t基因座位 200
1．T/t基因座位 200
2．用嵌合体解析T/t基因的机能 203
5着床和胎盘 215
§5.1受精卵的分化与着床前的动态 215
1．哺乳动物受精卵的形态学特征 215
2．受精卵的代谢 219
3．细胞分化 221
4．受精卵着床前的动态 222
§5.2着床和胎盘 224
1．滋养层细胞－胚上皮细胞间的细胞联结 225
2．对异种胚着床的母体免疫系统的反应 229
3．在着床部位的巨噬细胞的动态 231
4．局部的免疫机构与间膜腺 233
6 后期胚胎的全胚培养和实验操作 235
§6.1从着床前到早期体节期的胚胎培养 235
1．从着床前开始的小鼠胚胎培养法 236
2．小鼠胚胎在体外的发育 238
3．从着床前开始的其他动物的胚胎培养 240
4．从着床前开始的胚胎培养技术的应用 240
§6.2器官形成期的全胚培养和培养下的胎仔操作 241
1．培养法 243
2．胎仔培养法的应用 249
7胎仔组织的移植 256
§7.1无胸腺裸鼠内人胎儿组织的移植 256
1．无胸腺裸小鼠开发以前的历史 257
2．人胎儿组织／无胸腺裸小鼠体系中得到的知识 258
3．人胎儿组织移植实验的将来 260
§7.2上皮、间充织相互作用与致癌——特别在消化 262
系统中 262
1．癌的发生机构 262
2．上皮、间充织相互作用 264
3．致癌与上皮、间充织相互作用 268
§7.3胎仔实验手术 273
1．胎仔实验手术的目的 273
2．胎仔手术的进展 273
3．笔者等胎仔手术的经验 275