目 录 1
第一章固相酶（1970年前国外资料综述） 1
一、固相酶的制备方法 3
（一）吸附法 3
（二）载体偶联法（共价法） 6
（三）交联法 （1 9
（四）包埋法 21
（五）其他 24
二、固相酶的性质 27
（一）“相对活力”和专一性的改变 28
（二）pH－活力曲线和最适pH 34
（三）米氏常数的改变 39
（四）稳定性的增加 42
（五）抑制剂的影响 46
（六）其他性质 47
三、固相酶的应用 47
（一）工业生产中的应用 47
（二）分析化学中的应用 53
（三）酶反应机制的阐明 58
二、配基的选择 （1 59
（二）纯化酶抑制剂的吸附剂 （1 62
（四）医药中的应用 62
（四）利用分子内相互作用的吸附剂 （1 63
（五）酶和抑制剂的分离提纯——亲和层析 65
（六）免疫化学中的应用 71
四、结束语 72
第二章固相酶研究的新进展 75
（二）共价（载体偶联）法 75
一、固相化方法 75
（一）吸附法 75
（三）交联法 81
（四）包埋法 81
（五）一些新方法 82
二、固相酶的性质 85
（一）固相酶活力的变化 85
（二）最适pH和稳定性 87
（三）固相酶反应器的动力学研究 88
（一）工业中的酶反应器 89
三、固相酶的应用研究 89
（二）分析中的应用 91
（三）理论研究中的应用 92
（四）医药中的应用研究 97
（五）生物学高分子纯化中的应用 97
四、小结 97
固相酶总表 99
参考资料 129
第三章亲和层析 145
一、载体的选择 149
（一）纤维素和葡聚糖凝胶 150
（二）交联共聚和物理包埋 154
（三）琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶和多孔玻璃 155
（一）纯化酶的吸附剂 159
（三）纯化亲和标记肽的吸附剂 163
（七）纯化抗原和抗体的吸附剂 164
（六）纯化激素的吸附剂 164
（五）纯化传递蛋白和受体的吸附剂 164
（八）纯化核酸的吸附剂 165
三、琼脂糖及聚丙烯酰胺的衍生物的制备 165
（一）琼脂糖的活化及其衍生物的制备 165
（二）聚丙烯酰胺衍生物的制备 172
四、提高吸附剂亲和力的一些手段 172
（一）引入“手臂” 172
（二）增加配基的取代程度 176
（三）以最少的键连接 176
（四）载体多孔性的影响 177
五、亲和吸附和洗脱 179
（一）吸附 179
（二）洗涤 181
（三）酶的洗脱 181
（四）亲和柱的再生 183
六、亲和层析的应用 184
（一）酶的纯化 184
（二）分辨化学改变的酶及酶学研究中的其他应用 197
（四）纯化互补的和人工合成的肽 199
（三）纯化亲和标记的活性中心肽段 199
（五）纯化酶的天然抑制剂 200
（六）纯化传递蛋白和结合蛋白 202
（七）纯化激素 203
（八）纯化激素受体及细胞膜制剂 204
（九）核酸研究中的应用 206
（十）纯化抗体和抗原 207
（十一）纯化细胞、细胞器及其他重要高分子 211
酶的亲和层析总表 212
参考资料 229