第一部分 基本知识 3
1光的基本知识 3
1.1光的本质 3
1.2光的性质 4
1.3光的吸收 5
2荧光的基本知识 6
2.1荧光的发光原理 6
2.2荧光色素的性质 9
2.3组织细胞的自发荧光与继发荧光 15
2.4荧光的淬灭及抗淬灭 19
2.5荧光光谱交叉干扰及消除 24
3荧光染料（色素）的早期应用和发展史 27
3.1染料的早期应用和发展 27
3.2荧光染料（色素）的早期应用和发展 28
3.3荧光染料（探针）在活细胞中的早期应用和发展 29
3.4荧光染料（探针）在植物研究中的早期应用和发展 31
4常用的荧光染料（探针） 34
4.1细胞器荧光探针 34
4.2细胞骨架荧光探针 40
4.3研究钙调节及活性的荧光探针 44
4.4核酸荧光探针 47
4.5其他荧光探针 57
5活体荧光材料——绿色荧光蛋白（GFP）及其衍生物 62
5.1绿色荧光蛋白的发现 62
5.2绿色荧光蛋白的结构 65
5.3绿色荧光蛋白的特性及优点 66
5.4荧光蛋白的新进展 68
6荧光蛋白的两大类新的衍生物——光诱导蛋白和双分子荧光互补技术 72
6.1光诱导蛋白 72
6.2双分子荧光互补技术 79
7最新型荧光材料——量子点 89
7.1量子点的定义及物理特性 89
7.2量子点具有优良的光学特性 91
7.3量子点的优点 91
7.4量子点技术在生物领域中的应用 92
7.5量子点技术的安全性 95
7.6量子点技术的发展前景 96
第二部分 荧光色素（探针）在细胞生物学中的应用 99
8荧光技术在细胞凋亡研究中的应用 99
8.1细胞凋亡及其基本通路 101
8.2荧光显微镜对细胞凋亡的形态学观察 104
8.3凋亡调控分子的荧光标记在细胞凋亡研究中的应用 108
8.4其他荧光技术在细胞凋亡研究中的应用 115
9流式细胞术在细胞生物学中的应用 123
9.1检测细胞的特征 123
9.2检测细胞的增殖和凋亡状态 130
9.3定量检测可溶性蛋白质（CBA技术） 135
9.4纯化特定的细胞 139
10荧光在细胞骨架研究中的应用 142
10.1荧光技术在微丝骨架研究中的应用 143
10.2荧光技术在微管骨架研究中的应用 153
11荧光原位杂交 166
11.1荧光原位杂交的基本原理与基本过程 166
11.2荧光原位杂交的应用 182
12荧光在HER2/ErbB2/p185研究中的应用 188
12.1用免疫荧光细胞化学的方法鉴定抗体与p185的结合特异性 189
12.2 EGFP在ErbB2胞内区核定位信号研究中的应用 191
13绿色荧光蛋白（GFP）在细胞分子生物学中的应用 201
13.1绿色荧光蛋白（GFP）在动物细胞分子生物学中的应用 202
13.2绿色荧光蛋白（GFP）在植物细胞分子生物学中的应用 206
13.3绿色荧光蛋白在医学、新药的开发及其他方面的应用 211
14免疫荧光细胞化学技术 213
14.1免疫学基础知识 214
14.2免疫荧光细胞化学的原理 218
14.3荧光抗体的制备 221
14.4免疫荧光组织化学细胞和组织标本的制备 223
14.5免疫荧光细胞化学染色方法 231
14.6非特异性染色的消除方法 234
第三部分 常用荧光检测仪器 241
15生物荧光显微镜 241
15.1普通生物光学显微镜 241
15.2生物荧光显微镜 251
15.3细胞遗传工作站 259
15.4光学显微镜的最新演变——无目镜倒置显微镜的诞生 267
16激光扫描共聚焦显微镜 272
16.1基本原理 273
16.2主要部件 275
16.3操作步骤及注意事项 279
16.4主要用途 282
16.5 LSM 510 META LSM710 286
16.6应用于激光共聚焦的新技术 290
16.7双光子（多光子）激光扫描显微镜 292
16.8注意事项及维护保养 294
17超高分辨率显微镜的原理和应用 295
17.1分辨率 295
17.2超高分辨率显微技术简介 296
17.3超高分辨率显微镜的应用 304
18活细胞显微成像技术 307
18.1活细胞荧光工作站 307
18.2其他活细胞显微成像技术 313
19活体体内荧光成像技术 329
19.1基本原理 329
19.2基本组成 331
19.3实验过程 332
19.4系统特性 333
19.5应用 336
19.6发展前景 338
20流式细胞仪 339
20.1概述 339
20.2工作原理与基本构成 341
20.3主要用途 345
20.4检测样品的制备 348
20.5仪器的基本操作步骤 349
20.6重要参数及意义 352
20.7数据处理与分析 355
21荧光定量PCR仪 361
21.1概述 361
21.2基本原理 362
21.3仪器简介 366
21.4样品制备及操作步骤 370
22荧光分光光度计 373
22.1基本结构与原理 373
22.2 AMINCO-Bowman扫描荧光分光光度计 374
22.3基本操作 378
23激光扫描成像仪 380
23.1系统硬件组成及功能 380
23.2工作原理及操作步骤 381
23.3仪器参数 382
23.4荧光样品的制备 382
附录 免疫细胞化学常用试剂及其配制方法 384
F.1缓冲液 384
F.2固定剂 389
F.3黏附剂 394
F.4封固剂 395
F.5其他辅助试剂 396
参考文献 399