第一章 微生物育种学实验室的仪器设备及基本操作 1
第一节 微生物育种学实验室注意事项 1
第二节 微生物育种学实验室的主要仪器设备 1
第三节 微生物育种学实验中的基本操作 10
第二章 微生物的分离筛选与鉴定 39
实验1土壤中四大类微生物的分离与鉴别 39
实验2碱性蛋白酶产生菌的分离筛选及活性测定 43
实验3脂肪酶产生菌的筛选 47
实验4产淀粉酶芽孢杆菌的分离及酶活检测 50
实验5抗生素产生菌的筛选及活性测定 52
实验6.土壤中纤维素分解菌的分离 57
实验7生物降解塑料产生菌的分离 61
实验8有机卤化物降解菌的筛选 63
实验9极端环境中嗜热菌的分离 67
实验10自养型硝酸细菌的分离 68
实验11利用亨盖特厌氧滚管技术对双歧杆菌进行活菌计数 72
实验12担子菌的分离培养 75
实验13噬菌体的分离、纯化及其效价的测定 76
实验14抗噬菌体苏氨酸产生菌的选育 80
实验15 宏基因组文库构建 82
实验16细菌鉴定中常用的生理生化反应 88
实验17利用16S rRNA基因序列分析进行微生物分类鉴定 92
第三章 微生物的诱变育种 107
实验18细菌的紫外诱变 107
实验19营养缺陷型的筛选和鉴定 110
实验20紫外线与硫酸二乙酯复合诱变产蛋白酶的枯草芽孢杆菌 115
实验21利用氮离子注入诱变技术筛选L-精氨酸高产突变株 118
实验22耐高浓度自身代谢产物卡那霉素链霉菌的高产菌株的选育 120
实验23利用AEC抗性突变选育金针菇高赖氨酸含量品种 122
实验24高通量选育复合诱变的谷氨酸高产菌 124
实验25由转座子引起的插入突变 126
实验26正交法优化培养条件 127
实验27响应面法优化米曲霉α-淀粉酶发酵培养基 130
实验28均匀实验设计优化发酵培养基配方 136
第四章 细胞水平基因重组育种 141
实验29大肠杆菌杂交及基因定位实验 141
实验30大肠杆菌?噬菌体的局限性转导 144
实验31酵母单倍体细胞分离与鉴定 147
实验32谷氨酸棒杆菌的原生质体融合 150
实验33霉菌原生质体的融合 153
实验34酵母的原生质体融合 156
实验35应用基因组改组技术选育谷氨酸高产菌 159
第五章 分子育种 163
实验36利用电子克隆技术获得基因 163
实验37扩展青霉脂肪酶基因的克隆与表达 172
实验38酵母乙醇脱氢酶11基因敲除 176
实验39 Red系统介导的大肠杆菌的基因敲除 179
实验40 PCR定点突变改造微生物菌种 184
实验41基于易错PCR的分子定向进化 188
第六章 菌种保藏 193
实验42常用的简易菌种保藏法 194
实验43冷冻真空干燥保藏法 198
实验44液氮超低温保藏法 200
主要参考文献 203
附录1常用培养基的配制 205
附录2常用试剂和溶液的配制 214