第一章 蕈菌的基础实验技术 1
第一节 实验室常用器皿的使用 1
一、玻璃器皿的洗涤 1
二、常用玻璃器皿的使用 2
三、试剂的配制 4
四、实验室中常用的仪器设备 7
第二节 培养基的配制与灭菌 8
一、培养基的配制与灭菌 9
实验一 PDA试管斜面培养基的配制与灭菌 9
实验二 培养液的微孔滤膜灭菌法 12
二、几种常用培养基 14
第三节 蕈菌的无菌操作技术 15
一、洁净工作台内应具备的器皿 16
二、无菌操作技术 16
实验三 平菇菌斜面母种的转管 16
第二章 蕈菌标本的鉴定与显微观察技术 19
第一节 蕈菌标本的采集、制作与鉴定 19
一、标本的采集 19
二、菌种分离 23
三、标本的制作与保存 25
四、标本学名的确定 26
第二节 蕈菌的显微观察技术 30
一、普通光学显微镜的使用及菌丝体观察 30
实验四 平菇菌丝体的显微观察 30
二、显微测量 33
实验五 香菇担孢子的显微测量 34
三、孢子计数 36
实验六 平菇担孢子的血球计数板计数 36
一、多孢分离法 39
第一节 菌株的分离与纯化 39
第三章 蕈菌的育种技术 39
实验七 香菇的试管多孢分离 40
实验八 木耳的三角瓶多孢分离 42
二、菌丝体分离法 43
实验九 金针菇的组织块分离 43
实验十 银耳的基质内菌丝分离 45
三、菌株的纯化 46
第二节 蕈菌的杂交育种 48
一、单孢子和单核菌丝体的分离 49
实验十一 香菇单孢子分离 49
实验十二 香菇单核菌丝体的配对杂交 52
二、单核菌丝体的配对杂交 52
第三节 蕈菌的诱变育种 54
一、采用物理诱变剂的诱变技术 55
实验十三 平菇担孢子的紫外线诱变 55
二、采用化学诱变剂的诱变技术 58
实验十四 猴头担孢子DES诱变 59
实验十五 香菇担孢子的亚硝基胍诱变 61
三、生物诱变剂及综合诱变 64
实验十六 毛木耳营养缺陷型突变株的筛选 66
一、营养缺陷型突变株的富集与筛选 66
第四节 营养缺陷型突变株的筛选与鉴定 66
二、营养缺陷型突变株的鉴定 69
实验十七 毛木耳氨基酸营养缺陷型突变株的鉴定 69
第五节 抗性突变株的筛选 72
实验十八 抗药性平菇突变株的筛选 72
第六节 原生质体融合育种 74
一、原生质体的制备 75
实验十九 香菇担孢子原生质体的制备 75
二、原生质体的再生与融合(附二实例) 78
第一节 几种菌种保藏法比较 86
第四章 蕈菌菌种保藏技术 86
第二节 固体原种保藏法 88
实验二十 灵芝固体原种保藏法 89
第三节 试管斜面菌种低温保藏法 91
第四节 斜面菌种液体石蜡保藏法 93
实验二十一 金针菇试管斜面菌种的液体石蜡保藏 93
第五节 孢子的滤纸保藏法 95
实验二十二 双孢蘑菇担孢子的滤纸保藏 95
第六节 液氮超低温保藏法 97
实验二十三 竹黄菌株的液氮超低温保藏 97
一、菌株的退化 99
第七节 菌株的退化、老化和复壮 99
二、菌株退化的原因及其表现 100
三、菌株的老化和复壮 102
第五章 蕈菌的固体发酵生产 104
第一节 蕈菌的固体发酵生产 104
一、固体发酵生产的特点 105
二、基质的选择 107
三、固体发酵生产的控制 108
第二节 几种蕈菌的固体发酵生产 111
一、蜜环菌的固体发酵生产 111
二、猴头菌的固体发酵生产 114
三、安络小皮伞菌的固体发酵生产 115
四、假蜜环菌的固体发酵生产 117
五、云芝菌的固体发酵生产 118
六、蛹虫草菌的固体发酵生产 120
第六章 蕈菌的液体发酵生产 122
第一节 液体培养基的配制 122
一、液体培养基的组成 123
二、液体培养基的配制 127
实验二十四 银耳孢子深层发酵培养基的配料与灭菌 130
第二节 蕈菌的摇瓶培养 132
一、摇瓶培养的有关参数 133
二、摇瓶培养的操作方法 137
实验二十五 银耳孢子的摇瓶培养 137
第三节 蕈菌的发酵罐深层培养 139
一、深层发酵生产的一般设备 139
二、深层发醉生产的有关参数 142
三、深层发酵生产的控制 145
四、发酵终点的判断 149
五、发酵生产中染菌率的控制 151
六、发酵罐深层培养的操作方法 153
实验二十六 银耳孢子的发酵罐深层培养 153
第四节 自制简易发酵设备的深层培养 157
一、自制简易发酵设备的一般装置 158
二、自制简易发酵设备的安装与使用 160
第五节 食用菌液体菌种的生产与应用 162
一、食用菌液体菌种的优缺点 162
二、食用菌液体菌种生产的特点 165
三、液体菌种栽培平菇 166
四、液体菌种栽培香菇 168
第六节 常见药用菌的液体发酵生产 169
一、麦角菌的发酵生产 169
二、安络小皮伞菌的发酵生产 172
三、灵芝菌的发酵生产 174
四、薄树灵芝菌的发酵生产(附密纹薄芝菌的发酵生产) 178
五、云芝菌的发酵生产 180
六、蜜环菌的发酵生产 183
七、假？环菌的发酵生产 186
八、斑褐孔菌的发酵生产 187
九、白耙齿菌的发酵生产 188
十、冬虫夏草处离菌的发酵生产 189
十一、白僵菌的发酵生产 194
十二、猴头菌的发酵生产(附：猴头露、猴头酒的生产) 196
十三、银耳孢子的发酵生产 199
十四、香菇菌的发酵生产(附：香菇菌饮料及香菇液体菌种的生产) 200
第七节 常见食用菌的液体发酵生产或培养 205
一、平菇菌的发酵生产 205
二、草菇菌的发酵生产 207
三、金针菇菌的液体培养 209
四、黑木耳菌的液体培养 210
五、双孢蘑菇菌的液体培养 211
六、滑菇菌的液体培养 212
七、竹荪菌的液体培养 213
九、羊肚菌的液体培养 214
八、鸡纵菌的液体培养 214
十、柱状田头菇的液体培养 215
十一、灰树花菌的液体培养 216
十二、榆耳菌的液体培养 217
第八节 正在开发研究的部分药用菌的液体培养 217
一、茯苓菌的液体培养 218
二、古尼拟青霉菌的液体培养 219
三、雷丸菌的液体培养 220
四、裂褶菌的液体培养 221
五、竹黄菌的液体培养 223
六、红缘拟层孔菌的液体培养 224
第七章 蕈菌液体培养的无？检验与化学测定技术 226
第一节 培养液的无菌检验 226
一、培养液的无菌检验技术 226
实验二十七 香菇菌深层发酵液的肉汤与双碟培养无菌检验 226
二、培养液的镜检技术 228
实验二十八 香菇菌深层发酵液的镜检 228
第二节 培养液中菌丝含量的测定 229
实验二十九 草菇菌培养液中菌丝含量的测定 229
第三节 培养液pH的测定 232
实验三十 灵芝菌培养液pH值的测定 232
第四节 培养液中还原糖的测定 233
实验三十一 斑褐孔菌培养液中还原糖的测定 234
第五节 培养液中氨基态氮的测定 236
实验三十二 银耳孢子培养液中氨基氮的测定 237
第六节 菌丝体的同工酶凝胶电泳 239
实验三十三 竹黄菌丝体酯酶同工酶凝胶电泳 239
主要参考文献 243
附录 245
一、常用酸碱百分浓度、比重和当量浓度的关系 245
二、常用缓冲液的配制 247
三、饱和蒸汽压力与温度关系 248