实验须知 1
安全措施 2
第一章 基因工程实验 3
实验一 质粒DNA的分离、纯化 3
实验二 质粒DNA的酶切及凝胶电泳 6
实验三 基因组DNA的提取 9
实验四 聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因 11
实验五 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 14
实验六 重组质粒的连接、转化及筛选 17
实验七 基因组DNA的Southern杂交分析 19
实验八 动物细胞RNA的提取和cDNA合成 22
实验九 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达和检测 25
实验十 沙门菌的PCR方法鉴定 28
实验十一 枯草芽孢杆菌G+C含量的测定 30
第二章 酶工程实验 33
实验十二 溶菌酶的粗提取 33
实验十三 溶菌酶分离纯化及酶活力、蛋白质浓度测定 35
实验十四 溶菌酶纯度鉴定与分子质量测定 38
实验十五 溶菌酶在食品保藏中的应用 40
实验十六 原果胶酶的提取与活力测定 41
实验十七 果胶酶(淀粉酶或凝乳酶)酶制剂的制备 43
实验十八 固定化α-淀粉酶与活力测定 46
第三章 生物大分子的分离纯化 49
实验十九 超速离心法分离质粒DNA 49
实验二十 硅胶色谱法分离甘油三酯 51
实验二十一 HPLC法测定单糖组分 53
实验二十二 气相色谱法分析脂肪酸 54
实验二十三 蛋白质的透析和浓缩 56
实验二十四 超滤技术浓缩和分离碱性蛋白酶 58
实验二十五 凝胶层析法纯化胰激肽原酶 61
实验二十六 亲和层析法(His-Tag)纯化目标蛋白质 67
实验二十七 乳源糖肽的小肽电泳和鉴定 70
第四章 食品加工实验 73
实验二十八 酶法澄清苹果汁的加工 73
实验二十九 生物活性肽——酪蛋白磷酸肽的制备及功能检测 74
实验三十 乳酸菌发酵剂的制备 77
实验三十一 微生物发酵法制备蛋白酶 79
实验三十二 酸奶的加工 82
实验三十三 农家干酪的制作 84
实验三十四 干红葡萄酒的制作 87
实验三十五 啤酒的酿造 89
实验三十六 醋的酿造 91
实验三十七 酱油的酿造 92
实验三十八 米酒的酿造 94
实验三十九 离子交换法制备纯水 95
第五章 生物技术综合性实验 100
实验四十 蛋白酶产生菌的分离筛选、鉴定、发酵条件优化及酶学性质研究 100
实验四十一 灵芝栽培及灵芝多糖的提取 103
实验四十二 酪蛋白糖巨肽的酶解制备、分离及组分分析 106
附录 110
附录一 分子生物学数据库 110
附录二 使用Primer5.0、DNAstar设计引物 111
附录三 利用GenBank的BLAST进行基因的相似性比对 113
附录四 如何绘制聚类分析图 114
附录五 质粒图谱 117
附录六 常用核酸换算数据 119
附录七 微量移液器的使用说明 119
附录八 数据处理和生物统计相关知识 120
参考文献 123