目 录 1
第一章分子遗传学基础 1
第一节分子生物学与分子遗传学发展简介 1
第二节DNA的组成及其特性 2
第三节基因的分子结构与功能 7
第四节DNA突变与疾病 14
第二章 细菌质粒DNA的提取与纯化及其应用 19
第一节质粒的特性及应用 19
第二节质粒DNA的分离 21
第三节细菌质粒DNA大量提取与纯化 23
第四节快速、小量提取质粒DNA 36
第三章染色体DNA酶切图谱分析 45
第一节染色体DNA提取与纯化 45
第二节DNA提取纯化注意事项 52
第三节限制性内切酶及其应用 56
第四节酶解反应 58
第五节内切酶使用中的注意事项 62
第六节影响限制性内切酶作用的因素 63
第七节染色体DNA酶切图谱的制备及其应用 64
第四章分子杂交技术 69
第一节DNA分子杂交的基本原理 69
第二节核酸分子杂交的过程、类型和种类 71
第三节分子杂交技术操作 74
第四节影响标记效果的因素及注意事项 80
第五节非放射性同位素的标记系统 84
第六节DNA分子杂交 87
第七节影响杂交反应的主要因素 92
第五章 目的DNA的体外重组与克隆 96
第一节带有目的基因DNA片断的获得 96
第二节 目的基因与载体DNA的体外重组 101
第三节细菌质粒的转化 109
第四节重组质粒的鉴定 113
第六章 PCR检测技术 117
第一节PCR的基本原理 117
第二节待扩增样品的制备 118
第三节PCR操作方法 124
第四节PCR产物的分析 126
第五节PCR反应条件的优化 129
第六节PCR污染对策 135
第七章 DNA序列分析 141
第一节DNA序列分析方法 141
第二节双脱氧链终止法 143
第八章凝胶电泳技术 154
第一节琼脂糖凝胶电泳技术 154
第二节琼脂糖凝胶中DNA的回收 159
第三节聚丙烯酰胺凝胶电泳 165
第四节单链及短双链DNA分离 171
第五节脉冲电场梯度电泳 174
第六节腹泻标本中病毒RNA或DNA的提取 178
第九章单克隆抗体技术、耐药性质粒接合 181
转移实验及细菌质粒消除实验 181
第一节单克隆抗体技术 181
第二节耐药性质粒接合转移试验 186
第三节细菌质粒消除实验 190
第十章常用的生化技术与溶液配制 192
第一节玻璃器皿、塑料器皿及透析袋的处理 192
第二节有机试剂和抗生素的配制 193
第三节缓冲液和贮存液配制 196
第四节几种酶的处理 201
第五节DNA和RNA的定量、纯化与浓缩 203
参考文献 209