第1篇 细胞免疫技术 3
第1章 细胞分离及分型 3
第1节 外周血单个核细胞的分离 3
第2节 B细胞分离 5
第3节 T细胞分离 7
第4节 自然杀伤细胞的制备 8
第5节 单核细胞的分离 10
第6节 人表皮朗汉斯细胞的分离 12
第7节 多形核白细胞的分离 15
第8节 流式细胞仪分型技术 17
第2章 细胞的体外制备 20
第1节 树突状细胞的体外制备 20
第2节 LAK细胞的培养 21
第3节 TIL细胞的培养 23
第4节 T细胞克隆的制备 24
第5节 人NK细胞克隆的制备 27
第1节 ［3H］-脱氧胸苷掺入检测法 30
第3章 细胞增殖测定 30
第2节 MTT比色法 32
第4章 细胞毒作用的测定 35
第1节 补体依赖的细胞介导的细胞毒作用 35
第2节 细胞介导的细胞毒作用 37
第5章 细胞凋亡分析 40
第1节 细胞凋亡形态学分析 40
第2节 细胞凋亡生化指标观察 45
第3节 流式细胞仪法 47
第1节 钙流测定 52
第6章 细胞激活的有关实验 52
第2节 蛋白质酪氨酸残基的磷酸化检测 55
第3节 超氧化物释放的测定 58
第4节 炎症介质释放试验 59
第5节 TNFα的检测(生物学检测法) 61
第6节 IL-2的检测(生物学检测法) 62
第7节 细胞因子mRNA的检测 64
第8节 促细胞分裂剂激活单个核细胞 67
第1节 细胞株的传代培养 70
第7章 细胞培养的一般技术 70
第2节 支持物培养法培养贴壁细胞 74
第3节 细胞培养污染的检测与去除 75
第2篇 免疫化学技术 87
第8章 抗血清制备 87
第1节 抗原纯化及制备的基本方法 87
第2节 动物免疫方案 100
第3节 免疫动物的采血与血清制备 102
第1节 概述 107
第9章 单克隆抗体的制备 107
第2节 用于鼠细胞融合的配对细胞的培养和选择 110
第3节 通过细胞融合得到B细胞杂交瘤 112
第4节 阳性杂交瘤克隆的筛选及通过有限性稀释法再克隆 114
第5节 通过EBV制备人单克隆抗体 117
第6节 体外细胞免疫 119
第7节 实验室规模的抗体制备 121
第8节 单克隆抗体的纯化 124
第1节 硫酸铵沉淀法 127
第10章 抗体的纯化 127
第2节 DEAE离子交换层析法 129
第3节 羟磷灰石层析纯化抗体 131
第4节 抗体的辛酸纯化法 133
第5节 Sephadex凝胶过滤纯化抗体 134
第6节 免疫球蛋白G的亲和层析纯化法(蛋白A或蛋白G法) 136
第7节 应用酶解从IgG制备F(ab′)2的方法 137
第8节 从F(ab′)2制备Fab′ 140
第9节 免疫球蛋白A纯化 142
第11章 抗体分子标记技术 146
第1节 抗体的125I标记法 146
第2节 抗体的酶标记法 148
第3节 抗体的生物素化标记法 150
第4节 抗体的荧光标记法 152
第5节 生物合成过程的标记 153
第6节 免疫胶体金标记抗体及检测抗原 155
第12章 酶联免疫检测技术 161
第1节 间接法测抗体 161
第3篇 体液免疫检测技术 161
第2节 双抗体夹心法测抗原 163
第3节 竞争法测抗原 165
第4节 酶联免疫试验的量反应分析 167
第5节 酶联免疫试验质反应分析 168
第13章 免疫印迹技术 170
第1节 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 170
第2节 免疫印迹(Western blotting) 174
第14章 免疫荧光技术 177
第1节 直接免疫荧光法测抗原 177
第2节 间接免疫荧光法测抗体 178
第3节 标本的制备 180
第15章 补体测定技术 183
第1节 CH50法测总补体活性 183
第2节 补体旁路活化途径的溶血活性(AP-H50)测定 185
第3节 C3含量测定 186
第1节 聚乙二醇沉淀法测定免疫复合物 188
第16章 免疫复合物测定 188
第2节 C1q固相法测定免疫复合物 189
第3节 固相抗C3ELISA法测定免疫复合物 190
第4篇 人类白细胞抗原(HLA)测定 195
第17章 HLA检测技术 195
第1节 HLA的抗体分型技术 195
第2节 HLA的PCR分型技术 196
第18章 HLA的抗体筛选技术 199
第1节 淋巴细胞毒交叉配合试验 199
第2节 免疫磁珠流式细胞仪方法 201
第5篇 有关免疫调节剂筛选及评估机体免疫状态的实验 205
第19章 非特异免疫功能的检测 205
第1节 小白鼠碳粉廓清试验 205
第2节 小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验 206
第3节 溶菌酶测定法(光学法) 207
第4节 溶菌酶测定法(平板法) 209
第20章 特异性免疫功能的检测 211
第1节 血清溶血素测定 211
第2节 抗体形成细胞的测定 212
第3节 特异性淋巴细胞转化试验 214
第1节 免疫功能低下动物模型 216
第21章 有关免疫实验的动物模型 216
第2节 大鼠同种被动皮肤过敏反应 217
第3节 Ⅱ型变态反应动物模型 218
第4节 Ⅲ型变态反应动物模型 219
第5节 二硝基氟苯诱导小鼠的迟发型变态反应 220
第22章 小分子糖抗原的分离、鉴定和抗体的制备 225
第1节 糖脂的分析和鉴定 225
第6篇 糖生物学研究中一些常用免疫学方法 225
第2节 鞘糖脂(GSL)抗体的制备和鉴定 228
第3节 人工合成糖偶联物抗原与其抗体制备 231
第4节 拟糖脂抗原合成 234
第23章 免疫球蛋白糖链的检测 239
第1节 免疫球蛋白G中糖型G(0)的检测 239
第2节 免疫球蛋白Al中异常糖链的检测 241
第3节 应用糖特异性单克隆抗体检测糖蛋白抗原 242
第4节 应用标记寡糖探针检测组织细胞表面凝集素样结合物 244
第5节 糖配体与蛋白质受体相互作用的毛细管亲和色谱 246
第7篇 免疫学实验的质量控制及数据处理 253
第24章 免疫学实验的质量控制 253
第1节 实验的可靠性分析 253
第2节 实验的定量能力分析 255
第3节 实验相似度的鉴定 256
第25章 免疫学数据的特点与统计分析 258
第1节 正常值确定 258
第2节 研究群体对照 259
附录1 常用缓冲溶液的配制方法 260
附录2 蛋白质定量 263
附录3 常用蛋白质检测和定量方法比较 266
附录4 细胞蛋白质提取 267
附录5 SDS-PEAG凝胶染色及干燥 269
附录6 免疫酶反应底物 272
附录7 培养液、血清及添加物 274
附录8 Hanks液配方 277
附录9 常用凝集素的单糖结合特异性和寡糖结合特异性 278
附录10 主要免疫试剂供应商网站介绍 282