目录 1
实验一大肠杆菌染色体DNA的分离与纯化 1
1 Isolation and Purification of E.coli Chromosomal DNA 4
实验二利用紫外光谱测定DNA的浓度和纯度 8
2 Determination of the Concentration and Purity of DNA by UV Spectroscopy 10
实验三碱去垢剂法分离质粒DNA-小量制备法 12
3 Isolation of Plasmid DNA by the Alkaline-Detergent Method-A Miniprep 14
Procedure 14
实验四琼脂糖凝胶电泳 17
4 Agarose Gel Electrophoresis 20
实验五聚合酶链反应(PCR) 24
5 Polymerase Chain Reaction(PCR) 28
实验六限制性内切酶与DNA的消化 32
6 Restriction Endonuclease and Digestion of DNA 34
实验七DNA连接与TA克隆 37
7 Ligation of DNA and TA Cloning 39
实验八感受态大肠杆菌的制备与转化(氯化钙法) 42
8 Prepation and Transformation of Competent E.coli Using Calcium Chloride 44
实验九利用α互补筛选细菌克隆 47
9 Screening Bacterial Colonies Using a-Complementation 49
实验十Southem印迹 52
10 Southem Blotting 56
实验十一DNA序列测定 61
11 DNA Sequencing 71
实验十二RNA分离与定量 84
12 RNA Isolation and Quantification 87
实验十三Northem印迹杂交 91
13 Northem Blotting 96
实验十四反转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 102
14 RT-PCR 105
实验十五克隆化基因在大肠杆菌中的表达 108
15 Expression of Cloned Genes in E.coli 110
实验十六SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 113
16 SDS-polyacrylamide Gel Electrophoresis 116
实验十七 Westrn 印亦 120
17 Western Blotting 122
实验十八计算机网络技术的在分子生物学中的应用 125
18 Molecular Biological Research on the Web 131
附录 138
主要参考文献 143