第一章 绪论 1
第一节 酶的基本知识 1
一、 酶催化作用的特点 2
五、 酶在果酒生产中的应用 21 3
二、 酶的分类与命名 5
三、 影响酶催化作用的因素 11
四、 酶的活力测定 15
第二节 酶工程发展概况 18
一、 提取分离法 20
第三节 酶的生产方法 20
二、 生物合成法 21
三、 化学合成法 21
第四节 酶的应用前景 22
第二章 酶的生物合成法生产 24
第一节 酶生物合成的基本理论 24
一、 RNA的生物合成——转录 24
二、 蛋白质的生物合成——翻译 31
三、 酶生物合成的调节 37
第二节 微生物发酵产酶 44
一、 常用的产酶微生物 45
二、 发酵工艺条件及其控制 48
三、 酶发酵动力学 56
四、 固定化微生物细胞发酵产酶 61
五、 固定化微生物原生质体发酵产酶 65
第三节 植物细胞培养产酶 66
一、 植物细胞的特性 66
二、 植物细胞培养的特点 67
三、 植物细胞培养产酶的工艺条件及其控制 68
第四节 动物细胞培养产酶 73
一、 动物细胞的特性 73
三、 动物细胞培养方式 74
二、 动物细胞培养的特点 74
四、 动物细胞培养产酶的工艺条件及其控制 75
一、 机械破碎法 79
第三章 酶的提取与分离纯化 79
第一节 细胞破碎 79
二、 物理破碎法 80
三、 化学破碎法 81
四、 酶促破碎法 81
第二节 酶的提取 81
一、 酶提取的方法 82
二、 影响酶提取的主要因素 83
第三节 沉淀分离 84
一、 盐析沉淀法 84
二、 等电点沉淀法 85
三、 有机溶剂沉淀法 86
四、 复合沉淀法 86
第四节 离心分离 87
一、 离心机的选择 87
五、 选择性变性沉淀法 87
二、 离心方法的选用 88
三、 离心条件的确定 89
第五节 过滤与膜分离 91
一、 非膜过滤 91
二、 膜分离技术 92
第六节 层析分离 94
一、 吸附层析 94
二、 分配层析 97
三、 离子交换层析 98
四、 凝胶层析 101
五、 亲和层析 106
六、 层析聚焦 109
第七节 电泳分离 110
一、 纸电泳 111
三、 薄膜电泳 112
四、 凝胶电泳 112
二、 薄层电泳 112
五、 等电点聚焦电泳 115
第八节 萃取分离 117
一、 有机溶剂萃取 117
二、 双水相萃取 117
三、 超临界萃取 119
四、 反胶束萃取 120
一、 盐析结晶法 121
第九节 结晶 121
三、 透析平衡结晶法 122
四、 等电点结晶法 122
第十节 浓缩与干燥 122
二、 有机溶剂结晶法 122
一、 浓缩 123
二、 干燥 123
第四章 酶分子修饰与应用 125
第一节 酶分子的主链修饰 125
一、 主链的切断修饰 125
二、 主链的连接修饰 127
第二节 酶的侧链基团修饰 127
一、 氨基修饰 128
三、 巯基修饰 129
二、 羧基修饰 129
七、 吲哚基修饰 130
八、 分子内交联修饰 130
四、 胍基修饰 130
六、 咪唑基修饰 130
五、 酚基修饰 130
九、 大分子结合修饰 131
十、 亲和修饰 133
第三节 酶的组成单位置换修饰 134
一、 酶分子组成单位置换修饰的作用 134
二、 定点突变技术在酶分子修饰中的应用 135
第四节 金属离子置换修饰 136
第五节 酶分子的物理修饰 137
第六节 酶分子修饰的应用 137
一、 在酶学研究方面的应用 138
二、 在医药方面的应用 139
三、 在工业方面的应用 139
四、 在抗体酶研究开发方面的应用 140
五、 在核酸类酶人工改造方面的应用 141
六、 在有机介质酶催化反应中的应用 142
第五章 酶、 细胞、 原生质体固定化与应用 143
第一节 固定化酶的制备与特性 144
一、 固定化酶的制备方法 144
二、 固定化酶的特性 148
第二节 微生物、 植物和动物细胞固定化 149
一、 细胞固定化的方法 149
二、 固定化微生物细胞的特点 151
三、 植物细胞固定化 152
四、 动物细胞固定化 153
一、 原生质体的制备 155
第三节 原生质体固定化 155
二、 原生质体固定化 156
第四节 固定化技术的应用 156
一、 同定化酶的应用 157
二、 固定化微生物细胞的应用 159
三、 固定化原生质体的应用 161
第六章 酶在有机介质中的催化与应用 162
第一节 有机介质反应体系中水和有机溶剂对酶催化反应的影响 162
一、 有机介质反应体系 162
二、 水对有机介质中酶催化的影响 163
三、 有机溶剂对有机介质中酶催化的影响 165
第二节 酶在有机介质中的催化特性 166
一、 底物专一性 166
三、 区域选择性 167
二、 对映体选择性 167
五、 热稳定性 168
四、 键选择性 168
六、 pH印记 169
第三节 有机介质中酶催化的条件及其控制 169
一、 有机介质中酶催化反应的类型 169
二、 酶的选择 171
三、 底物的选择和浓度控制 171
四、 有机溶剂的选择 172
五、 水含量的控制 172
六、 温度控制 173
七、 pH值的控制 173
一、 手性药物的拆分 174
第四节 有机介质中酶催化的应用 174
二、 手性高分子聚合物的制备 175
三、 酚树脂的合成 176
四、 导电有机聚合物的合成 177
五、 发光有机聚合物的合成 177
六、 食品添加剂的生产 177
七、 生物柴油的生产 178
八、 多肽的合成 179
九、 甾体转化 179
第七章 酶在医药方面的应用 180
第一节 酶在疾病诊断方面的应用 180
一、 根据体内酶活力的变化诊断疾病 180
二、 用酶测定体液中某些物质的变化诊断疾病 187
第二节 酶在疾病治疗方面的应用 191
一、 蛋白酶 192
三、 脂肪酶 193
四、 溶菌酶 193
五、 超氧化物歧化酶 193
六、 L－天冬酰胺酶 193
二、 α－淀粉酶 193
七、 尿激酶 194
八、 纳豆激酶 194
九、 降纤酶 194
十、 凝血酶 195
十一、 激肽释放酶 195
十二、 组织纤溶酶原激活剂 195
十三、 弹性蛋白酶 195
第三节 酶在药物制造方面的应用 196
十五、 核酸类酶 196
十四、 乳糖酶 196
一、 青霉素酰化酶制造半合成抗生素 197
二、 β-酪氨酸酶制造多巴 199
三、 核苷磷酸化酶制造阿糖腺苷 199
四、 无色杆菌蛋白酶制造人胰岛素 200
五、 多核苷酸磷酸化酶生产聚肌胞 200
六、 β-D-葡萄糖苷酶制造抗肿瘤人参皂苷 200
第八章 酶在食品方面的应用 202
第一节 酶在食品保鲜方面的应用 203
一、 食品除氧保鲜 203
二、 蛋类制品脱糖保鲜 203
一、 葡萄糖的生产 204
第二节 酶在淀粉类食品生产方面的应用 204
三、 食品灭菌保鲜 204
二、 果葡糖浆的生产 205
三、 饴糖、 麦芽糖的生产 206
四、 糊精、 麦芽糊精的生产 206
五、 环状糊精的生产 206
第三节 酶在蛋白质类食品生产方面的应用 207
一、 水解蛋白的生产 208
二、 氨基酸的生产 208
三、 明胶的生产 208
四、 干酪的生产 208
五、 肉类的嫩化 209
六、 低乳糖奶的生产 210
二、 柑橘罐头防止白色浑浊 211
三、 果蔬制品的脱色 211
第四节 酶在果蔬类食品生产方面的应用 211
一、 柑橘制品去除苦味 211
四、 酶在果汁生产中的应用 212
第五节 酶在食品添加剂生产方面的应用 213
一、 酶在酸味剂生产中的应用 214
二、 酶在增味剂生产中的应用 216
三、 酶在甜味剂生产中的应用 219
四、 酶在乳化剂生产中的应用 221
第六节 酶在改善食品的品质与风味方面的应用 221
第九章 酶在其他领域的应用 223
第一节 酶在轻工、 化工方面的应用 223
一、 酶在原料处理方面的应用 223
二、 酶在轻工、 化工产品制造方面的应用 225
三、 加酶增强产品的使用效果 228
一、 酶在环境监测方面的应用 229
第二节 酶在环保、 能源方面的应用 229
二、 酶在废水处理方面的应用 230
三、 酶在可生物降解材料开发方面的应用 231
四、 酶在乙醇生产方面的应用 231
五、 酶在生物柴油制造方面的应用 231
六、 酶在氢气生产方面的应用 232
第三节 酶在分析检测方面的应用 232
一、 单酶反应检测 232
二、 多酶偶联反应检测 234
三、 酶标记免疫反应检测 235
第四节 酶在生物技术方面的应用 235
一、 酶在除去细胞壁方面的应用 236
二、 酶在大分子切割方面的应用 237
三、 酶在分子拼接方面的应用 240
主要参考文献 243