第一章 生物化学实验的基本要求 1
第一节 实验的准确性 1
一、系统误差 1
目录 1
二、偶然误差 2
三、操作错误 2
第二节 实验记录及报告 2
一、实验记录 2
二、实验报告 3
二、微生物 4
三、细胞 4
一、动物的脏器 4
第三节 实验样品的制备 4
第二章 常见的实验方法及基本原理 6
第一节 透析 6
第二节 沉淀 7
一、蛋白质的特性 7
二、常见的蛋白质沉淀方法 7
（一）盐析沉淀 7
（二）等电点沉淀 9
（三）有机溶剂沉淀 9
（四）热沉淀 9
（五）其他沉淀 10
第三节 层析 10
一、层析原理 10
（一）吸附层析 11
二、几种常见的层析法 11
（二）分配层析 12
（三）薄层层析 13
（四）凝胶层析 14
（五）离子交换层析 15
（六）高效液相色谱 16
第四节 电泳 19
一、电泳法的基本原理 19
二、几种常见电泳法 21
（一）纸电泳 21
（二）醋酸纤维膜电泳 21
（三）琼脂糖电泳 21
（四）聚丙烯酰胺凝胶电泳 22
二、比色法 24
第五节 分光光度法 24
一、基本原理 24
三、分光光度法 26
四、浊度法 26
第六节 离心 26
第三章 普通实验 29
实验一 实验的基本操作及要求 29
实验二 糖的颜色反应 32
实验三 3,5-二硝基水杨酸（DNS）法测定还原糖 34
实验四 氨基酸的分离鉴定——纸层析法 37
实验五 DNS-Cl法测定蛋白质N-末端的氨基酸 39
实验六 离子交换柱层析法分离氨基酸 41
实验七 有机酸的纸上层析法 43
实验八 蛋白质性质（一）——蛋白质及氨基酸的呈色反应 45
实验九 蛋白质性质（二）——蛋白质等电点的测定和沉淀反应 51
实验十 蛋白质的制备——牛奶中提取酪蛋白 56
实验十一 总氮量的测定——微量凯氏（Micro-Kieldahl）定氮法 58
实验十二 Folin-酚法测定血清白蛋白含量 62
实验十三 Bradford法测定蛋白质的含量 63
实验十四 紫外分光光度法测定蛋白质的含量 65
实验十五 血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳 66
实验十六 菜花（花椰菜）中核酸的分离与鉴定 69
实验十七 酶的特性 71
实验十八 多酚氧化酶的制备和化学性质 75
实验十九 影响多酚氧化酶作用的各种因素 78
实验二十 碱性蛋白酶活力的测定（福林-酚试剂法） 79
实验二十一 根据底物浓度和酶反应速度之间的关系求米氏常数Km 82
实验二十二 酵母RNA的提取及定性和定量鉴定 85
实验二十三 DNA的琼脂糖凝胶电泳 88
实验二十四 质粒DNA的小量制备 90
实验二十五 氨基转换反应——血清谷丙转氨酶（SGPT）活力的测定（King氏法） 92
实验二十六 肌糖原的酵解作用 94
第四章 综合实验 98
实验一 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白印迹 98
实验二 质粒DNA的酶切及连接技术 103
实验三 重组DNA质粒的转化技术 105
实验四 枯草杆菌碱性磷酸酶的制备及酶活力的测定 107
实验五 鸡卵类黏蛋白的制备及活力的测定 111
实验六 PCR基因扩增 115
附录 118
一、常用仪器的使用 118
（一）称量仪器 118
（二）分光光度计 119
（三）离心机 121
（四）干燥箱和恒温箱 122
（五）电热恒温水浴 122
二、缓冲溶液 123
（一）缓冲理论 123
（二）常用缓冲液的配制 123
（三）pH标定缓冲液的配制 126
三、常用的硫酸铵饱和度计算表 126
四、层析法常用数据及性质表 127
（一）离子交换层析数据及参数 127
（二）聚丙烯酰胺凝胶的技术数据 129
（三）琼脂糖凝胶的技术参数 130
（四）凝胶过滤层析介质的技术参数 130
（一）有关核酸的常用数据 132
五、分子生物学及基因工程常用数据 132
（二）常见限制性内切酶的酶切位点 133
（三）酶类 135
（四）缓冲液 136
（五）与DNA凝胶电泳有关的数据 138
六、一些常用单位 139
（一）长度单位 139
（二）体积单位 139
（三）质量单位 139
（四）摩尔与摩尔浓度表示法 140
（五）十进位数量词头及符号 140
七、元素的原子量表 140
主要参考书目 142