第一章 总论 1
第一节 分子杂交技术 1
第二节 从血液中提取DNA1 2
第二节 探针实验主要因素的优化 3
第三节 从组织中提取DNA1 4
第四节 细菌DNA的提取1 5
第三节 核酸探针的应用 6
第五节 RNA的提取1 6
第二章 核酸样品的制备 9
第一节 核酸的提取与沉淀 9
第六节 从其他来源标本中提取核酸 22
第七节 原位杂交中组织和细胞标本的制备 24
第三章 DNA重组和核酸探针的制备 33
第一节 载体-受体系统 33
第二节 目的基因的获得 35
第三节 DNA分子的体外重组 36
第四节 转化与感染 39
第五节 重组克隆的筛选 40
第六节 核酸探针的制备 41
第四章 放射性标记核酸探针 53
第一节 酶促标记DNA 54
第二节 寡核苷酸探针的标记 60
第三节 放射性标记探针的纯化 64
第五章 非放射性标记核酸探针 69
第一节 酶促修饰 69
第二节 化学修饰 76
第三节 寡核苷酸探针的标记 82
第六章 杂交类型和检测方法 89
第一节 杂交膜的制备 89
附录A 试剂1 91
第二节 DNA Southern印迹杂交 92
第三节 RNA Northern印迹杂交 95
第四节 菌落和噬菌斑筛选法 97
附录B 附加方案1 98
第五节 膜杂交方法 98
第六节 原位杂交方法 105
第七节 检测液相靶序列的杂交类型 116
第七章 核酸的体外扩增技术 126
第一节 聚合酶链反应 126
第二节 转录依赖的扩增系统 136
第三节 3SR系统 137
第四节 连接酶链反应 138
第五节 探针的扩增——０β复制酶系统 139
第六节 信号的放大 141
第八章 核酸杂交的电镜观察 143
第一节 杂交体的形成 143
第二节 核酸在蛋白膜上的展开 146
第三节 电镜观察 149
第九章 液相杂交的定量分析 151
第一节 二级反应 151
第二节 二级理论在核酸复性反应中的应用 153
第三节 多元复性反应 156
第四节 RNA-DNA滴定曲线的分析 159
第五节 影响反应速率的因素 160
第六节 复性反应的测定技术 163
第十章 膜杂交的定量分析 168
第一节 膜杂交的简要动力学 168
第二节 膜杂交速率的影响因素 169
第三节 影响杂种稳定性的因素 171
第四节 相关序列间的辨别 172
第五节 核酸与膜的结合 174
第六节 杂种的检测和定量测定 177
第七节 最佳反应条件的确定 178
第八节 Tm值的测定及意义 180
第九节 滤膜和探针的再使用 181
第十节 放射性膜杂交的问题及分析 181
第十一章 分析RNA的杂交法 183
第一节 Northern印迹杂交 183
第二节 RNA点印迹杂交法 185
第三节 核酸酶S1绘图法 185
第四节 引物延伸法 188