第一章 PCR技术概论 1
一、PCR基本原理 6
二、参与PCR反应体系的因素及其作用 9
三、常用的几种PCR反应 14
四、基因芯片技术与PCR检测关系 21
第二章 实时荧光定量PCR技术原理 33
一、传统定量PCR方法简介 33
二、荧光探针的技术原理 34
三、荧光PCR所用探针 35
四、实时荧光PCR定量检测计算原理和方法 42
五、荧光PCR的特点 49
第三章 实时荧光PCR仪简介和维护 53
一、ABI公司荧光PCR仪 53
二、罗氏公司荧光PCR仪 73
一、实验室总体要求 80
第四章 实时荧光PCR实验室技术要求 80
二、质量控制与质量保证 85
第五章 样品核酸的制备与纯化 89
一、样品制备 89
二、加工产品DNA提取的前处理 90
三、DNA提取的阴性(空白)对照 91
四、DNA浓度测定 91
五、DNA提取方法 92
六、DNA含量的测定 101
第六章 转基因产品实时定量PCR检测 105
一、转基因产品的发展与进出口贸易 105
二、转基因产品的安全性与法规 107
三、转基因产品定性定量及品系鉴定检测原理与方法 109
第七章 人类疾病的实时荧光PCR检测 140
一、实时荧光定量PCR技术在细菌检测中的应用 141
二、实时荧光定量PCR技术在病毒检测中的应用 144
三、实时荧光定量PCR技术在肿瘤检测中的应用 158
第八章 动物检疫的实时荧光PCR检测 165
一、用于进出口禽肉产品中禽流感病毒的快速检测 166
二、用于进出口活禽的检测 170
三、用于美国、香港活鸟零售市场的家禽的快速检测 171
第九章 动物源性饲料中牛羊源性成分实时荧光PCR检测 173
一、动物源性饲料中牛羊源性成分检测的必要性 173
二、几种动物源性成分检测技术简介 174
三、牛羊源性成分实时荧光PCR检测技术 180
一、单增李氏菌对食品的污染 186
第十章 食源性致病细菌实时荧光PCR检测 186
二、单增李氏菌的毒力因子 187
三、实时荧光PCR技术检测单增李氏菌 188
第十一章 植物真菌病害实时荧光PCR检测 196
一、概况 196
二、小麦印度腥黑穗病菌实时荧光PCR检测方法 196
三、Phaeocryptopus gaeumannii的实时荧光PCR检测 200
四、应用实时PCR对菌根真菌Glomus mosseae进行实时定量检测和对马铃薯晚疫病(Phytophthora infestans)、柑橘疫病(Phytophthora citricola)进行监控 202
一、概况 207
第十二章 植物病原细菌和植原体实时荧光PCR检测 207
二、植原体实时荧光PCR检测 209
三、玉米细菌性枯萎病菌实时荧光PCR检测 219
四、梨火疫细菌(Erwinia amylovora) 228
实时荧光PCR检测 228
五、水稻白叶枯病菌与水稻细菌性条斑病菌实时荧光PCR快速检测鉴定方法的建立 231
六、柑桔黄龙病菌实时荧光PCR检测 245
第十三章 植物病毒实时荧光PCR检测 259
一、背景 259
二、材料和方法 261
三、结果与分析 267
四、讨论 275
第十四章 实时荧光PCR在其他领域的应用 281
一、分子生物学技术在线虫分类鉴定中的应用 281
二、实时荧光PCR技术在昆虫鉴定中的应用 285
英汉缩略语及专用名词对照表 291