第一篇 植物生理生化实验原理 3
第一章 植物生理生化实验技术的基本原理 3
1.1 植物材料的种类 3
1.2 植物材料的采取 3
1.3 分析样品的前处理和保存 4
1.4 待测组分的提取、分离和纯化技术 5
1.5 样品中待测组分的测定 7
1.6 实验结果的数据处理与分析 8
第二章 离心技术 11
2.1 基本原理 11
2.2 离心机的类型及主要构造 13
2.3 常用的离心技术 14
2.4 分析性超速离心技术的应用 16
第三章 层析技术 18
3.1 层析原理 18
3.2 分配层析 20
3.3 吸附层析 21
3.4 凝胶层析 23
3.5 离子交换层析 24
3.6 亲和层析 25
3.7 气相色谱 26
3.8 高压液相色谱 28
3.9 毛细管电泳色谱 29
3.10 层析技术的应用 29
第四章 电泳技术 32
4.1 电泳基本原理 32
4.2 影响迁移率的主要因素 33
4.3 凝胶电泳 35
4.4 电泳的应用 46
第五章 红外线CO1气体分析技术 48
5.1 红外线CO1气体分析仪的工作原理 48
5.2 红外线CO1气体分析仪的类型 51
5.3 红外线CO2气体分析技术的运用 56
第六章 光学分析技术 58
6.1 紫外光-可见光分光光度法 58
6.2 原子吸收分光光度法 66
6.3 火焰分光光度法 70
6.4 荧光分光光度法 72
6.5 旋光分析法 75
6.6 近红外分析法 78
第七章 气体测压技术 81
7.1 气体测压技术的类型及其基本原理 81
7.2 气体测压技术的应用 83
第八章 电化学分析技术 87
8.1 电化学分析技术的类型及其基本原理 87
8.2 电化学分析技术的应用 89
8.3 DDS-12A型数字式电导率仪的基本原理及使用方法 89
第九章 免疫化学技术——酶联免疫吸附测定法（ELISA） 91
9.1 ELISA的原理 91
9.2 设计和合成特定的免疫原 92
9.3 抗体的制备 92
9.4 标记抗原的制备 93
9.5 ELISA测定程序的设计 93
第十章 Southern blotting和PCR反应原理与技术 95
10.1 Southern杂交 95
10.2 PCR反应 98
第二篇 植物生理生化实验技术 103
实验1 植物组织中自由水和束缚水含量的测定 103
实验2 植物组织水势的测定 108
Ⅰ 小液流法 108
Ⅱ 折光仪法 109
Ⅲ 露点法 109
实验3 钾离子对气孔开度的影响 114
实验4 植物的溶液培养和缺素观察 115
实验5 植物体内硝态氮含量的测定 118
实验6 植物伤流液中糖和氨基酸的测定 120
实验7 根系活力的测定——TTC法 123
实验8 植物体内硝酸还原酶活力的测定 125
Ⅰ 离体法 125
Ⅱ 活体法 127
实验9 植物谷氨酰胺合成酶活性的测定 129
实验10 叶绿体色素含量的测定 131
实验11 希尔反应的观察 134
实验12 离体叶绿体光诱导荧光强度的测定 135
实验13 1,5-二磷酸核酮糖羧化酶活性的测定 137
Ⅰ 分光光度法 137
Ⅱ 同位素法 139
实验14 叶绿体中3-磷酸甘油醛脱氢酶活性的测定 141
实验15 乙醇酸氧化酶活性的测定 144
实验16 真空渗入法测定环境因子对植物光合作用的影响 146
实验17 红外线CO1气体分析仪法测定植物光合速率与呼吸速率 148
Ⅰ CB-1101光合测定仪测定光合速率 148
Ⅱ TPS-1便携式光合作用系统测定光合速率、呼吸速率和蒸腾速率 151
实验18 氧电极法测定光合速率和呼吸速率 154
实验19 微量定容测压法测定种子的呼吸速率 158
实验20 小篮子法（广口瓶法）测定植物呼吸速率 161
实验21 植物组织中总氮含量的测定——微量凯氏定氮法 163
实验22 植物组织中游离氨基酸总量的测定——茚三酮溶液显色法 168
实验23 植物组织中可溶性糖含量的测定 171
Ⅰ 蒽酮比色法测定可溶性糖 171
Ⅱ 3,5-二硝基水杨酸测定还原糖 173
Ⅲ 苯酚法测定可溶性糖 174
Ⅳ 斐林试剂比色法测定还原糖 176
实验24 植物组织中蛋白质含量的测定 178
Ⅰ 双缩脲法 178
Ⅱ Folin-酚试剂法 180
Ⅲ 考马斯亮蓝G-250法（Bradford法） 182
Ⅳ 紫外吸收法 184
实验25 植物组织中有机酸含量测定 187
实验26 淀粉酶活性的测定 189
实验27 叶绿体ATP酶活性测定 192
实验28 脲酶Km值的测定 195
实验29 蛋白质相对分子质量的测定——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 198
实验30 植物过氧化物酶同工酶测定——圆盘式凝胶电泳法 201
实验31 植物组织中DNA的提取与测定 204
实验32 DNA的琼脂糖凝胶电泳 207
实验33 RNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳 209
实验34 PCR反应 211
实验35 Southern blotting 213
实验36 植物细胞G蛋白活性的测定 216
Ⅰ 荧光法 216
Ⅱ 同位素放射强度法 218
实验37 酶联免疫法（ELISA）测定CaM总量 220
实验38 蛋白质磷酸化酶——钙依赖蛋白激酶活性的测定 223
Ⅰ 液闪法 223
Ⅱ 放射自显影法 225
实验39 生长素类调节剂对种子萌发的影响 227
实验40 赤霉素对α-淀粉酶的诱导形成 229
实验41 植物激素对愈伤组织的形成和分化的影响 231
实验42 高效液相色谱法测定植物的内源激素含量 234
实验43 气相色谱法测定乙烯含量 237
实验44 酶联免疫吸附检测法（ELISA）测定植物激素含量 239
实验45 植物春化和光周期现象的观察 242
Ⅰ 植物春化现象的观察 242
Ⅱ 植物光周期现象的观察 243
实验46 花粉活力的测定 244
Ⅰ 碘-碘化钾（I2-KI）染色法 244
Ⅱ 过氧化物酶测定法 244
Ⅲ 氯化三苯基四氮唑（TTC）法 245
实验47 植物种子生命力的快速测定 247
Ⅰ TTC法 247
Ⅱ 染料染色法 248
Ⅲ 碘化钾反应法 249
Ⅳ 荧光法 249
实验48 谷物淀粉含量的测定（旋光法） 251
方法Ⅰ 251
方法Ⅱ 253
实验49 谷物种子蛋白质组分的分析 255
实验50 谷类作物种子中赖氨酸含量的测定——茚三酮比色法 257
实验51 种子粗脂肪含量的测定 259
实验52 植物组织中纤维素含量的测定 261
实验53 植物种子中主要不饱和脂肪酸的分离——反相纸层析法 263
实验54 油菜籽中硫代葡糖苷总量的测定 265
Ⅰ 内源酶法 265
Ⅱ 葡萄糖试纸法 266
实验55 抗坏血酸（维生素C）含量的测定 268
Ⅰ 滴定法 268
Ⅱ 比色法 270
实验56 果蔬可溶性固形物含量的测定 272
实验57 游离脯氨酸含量的测定 274
实验58 植物组织中丙二醛含量的测定 276
实验59 气相色谱法测定植物样品膜脂中脂肪酸的含量 278
实验60 植物抗逆生理指标的测定——电导仪法 280
实验61 愈创木酚法测定过氧化物酶活性 282
实验62 高锰酸钾滴定法测定过氧化氢酶活性 284
实验63 氮蓝四唑（NBT）法测定超氧物歧化酶活力 286
实验64 苯丙氨酸解氨酶活性的测定 288
实验65 综合实验1——以大豆为材料 290
实验66 综合实验2——以甜叶菊叶片为材料 291
实验67 综合性实验3——低温胁迫对植物幼苗的影响 292
实验68 综合性实验4——CaCl2在增强植物抗旱性中的作用 293
实验69 综合性实验5——果蔬的品质分析 294
附录 295
附录1 硫酸铵饱和度常用表 295
附录2 实验中常用酸碱的相对密度和浓度的关系 297
附录3 常用固态酸、碱、盐的配制参考表 297
附录4 常用酸碱指示剂 298
附录5 常用缓冲溶液的配制 298
附录6 Hoagland营养液及改良Hoagland营养液配方 302
附录7 植物组织培养常用培养基 303
附录8 常见的植物生长调节物质及其主要性质 304
附录9 植物激素与生长调节剂在农业生产中的应用 305
参考文献 307