第一篇 生物化学与分子生物学实验 3
第一章 基础性实验 3
实验1 蛋白质的呈色反应、沉淀现象观察及等电点的测定 3
实验2 蛋白质含量的测定 6
实验3 丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用 10
实验4 红细胞葡糖-6-磷酸脱氢酶活性测定 12
实验5 血清丙氨酸转氨酶活性测定（紫外速率法及改良穆氏法） 17
实验6 糖化血红蛋白的测定 21
实验7 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 23
实验8 血红蛋白的醋酸纤维薄膜电泳 25
实验9 血糖测定 27
实验10 胰岛素、肾上腺素对家兔血糖浓度的影响 31
实验11 血清总胆固醇测定 33
实验12 质粒DNA的提取、酶切与鉴定 37
实验13 酵母RNA的成分鉴定 40
实验14 PCR扩增G6PD基因外显子11-12片段 41
实验15 尿中酮体的检出 43
实验16 血清尿素氮测定（二乙酰一肟法） 44
第二章 综合性实验 47
实验17 真核细胞基因组DNA的提取、定量和纯度测定 47
实验18 小鼠基因组DNA的Southern blotting分析 49
实验19 小鼠脑组织总RNA提取与RT-PCR获取真核基因片段 54
实验20 pMD19-G6PD重组子的蓝白斑筛选及酶切鉴定 59
实验21 pThioHis（A）-G6PD重组表达质粒的鉴定 63
实验22 G6PD重组酶的诱导表达、分离及比活性测定 66
实验23 ATP、ADP和NADPH对G6PD酶促反应的影响 70
实验24 小鼠PKCε基因的克隆、鉴定及其6His融合蛋白的大肠杆菌表达和纯化 76
实验25 SDS-PAGE测定蛋白质的表观分子量 83
实验26 小鼠血清IgG的Western blotting分析 87
实验27 血红蛋白的等电聚焦分离及其等电点测定 94
实验28 醋酸纤维薄膜电泳技术分离乳酸脱氢酶同工酶 97
实验29 血清蛋白的盐析及清蛋白／球蛋白的测定 100
实验30 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳分离及定量测定 103
实验31 酶的特异性及温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响 106
实验32 小鼠肝细胞核的分离、纯化与鉴定 109
实验33 动脉硬化指数的计算 112
实验34 糖的硅胶G薄层层析分析鉴定 114
第三章 创新设计实验 117
实验35 乙醛脱氢酶2基因型的检测 117
实验36 针刺“足三里”穴位对家兔血糖浓度的双向调节作用 120
实验37 小鼠PKCε相互作用蛋白质的捕获、鉴定 122
实验38 小鼠肝总蛋白质的双向电泳分离 125
实验39 人血浆同型半胱氨酸的测定（ELISA方法） 129
实验40 自毁容貌综合征的生化与分子生物学分析 131
实验41 G6PD缺陷的诊断及其发病的分子基础 132
实验42 HL-60细胞中DAPK基因甲基状态的检测 133
实验43 胰岛素促进HepG2细胞对葡萄糖吸收的检测 135
第二篇 生物化学与分子生物学技术 141
第四章 分光光度技术 141
第一节 分光光度技术的基本原理 141
第二节 分光光度计的组成与结构 143
第三节 分光光度技术的应用 145
第五章 电泳技术 148
第一节 概述 148
第二节 几种常用电泳简介 149
第六章 层析技术 152
第七章 离心技术 156
第一节 离心技术的基本原理 156
第二节 离心机的类型 157
第三节 制备型离心的分离方法 158
第四节 离心操作的注意事项 159
第八章 聚合酶链反应与印迹技术 161
第一节 PCR技术 161
第二节 印迹技术 165
第九章 基因工程技术 170
第一节 基因工程技术的相关概念 170
第二节 基因工程技术的基本原理及技术路线 171
第三节 基因工程技术在医学领域的应用 175
第十章 荧光标记技术 177
第一节 荧光现象 177
第二节 荧光探针 179
第三节 荧光标记样品的检测 180
第十一章 RNA干扰技术 187
第一节 RNA干扰的作用机制 187
第二节 RNA干扰技术的应用 189
第十二章 生物芯片技术 191
第一节 基因芯片 191
第二节 蛋白质芯片 193
第十三章 双向凝胶电泳 196
第十四章 蛋白质三维结构建模 200
第一节 蛋白质结构相关知识 200
第二节 蛋白质结构预测实例 201
参考文献 205
附录一 生物化学与分子生物学常用数据库和软件 208
附录二 生物化学与分子生物学常用试剂和培养基的配制方法 210
附录三 生物化学及分子生物学实验常用缩略语 213
附录四 生物化学与分子生物学实验常用词中英文对照 216