第1章 绪论 1
1.1 基因工程的基本概念 2
1.2 基因工程的发展历史 5
1.3 基因工程的研究意义 7
1.4 基因工程的应用 8
1.5 基因工程的安全性 12
1.6 我国的基因工程安全管理办法 15
第2章 基因工程的工具酶 18
2.1 限制性核酸内切酶 18
2.2 DNA连接酶 27
2.3 DNA聚合酶和逆转录酶 35
2.4 修饰酶类 39
2.5 其他工具酶 43
第3章 基因工程的克隆载体 47
3.1 质粒载体 48
3.2 噬菌体载体 63
3.3 柯斯质粒载体 75
3.4 噬菌粒载体 76
3.5 病毒载体 77
3.6 人工染色体克隆载体 85
第4章 基因工程的基本技术 91
4.1 核酸的提取、鉴定与保存 91
4.2 凝胶电泳技术 97
4.3 分子杂交技术 102
4.4 PCR 105
4.5 DNA序列分析 114
4.6 基因芯片及数据分析 117
4.7 研究蛋白质与DNA相互作用的主要方法 121
第5章 目的基因的获取 130
5.1 基因的人工化学合成 130
5.2 PCR扩增目的基因 135
5.3 从基因组文库获取目的基因 135
5.4 从cDNA文库获得目的基因 138
5.5 其他基因分离技术 144
第6章 目的基因的导入与重组体的鉴定 156
6.1 重组DNA导入原核细胞 156
6.2 重组DNA导入真核细胞 164
6.3 重组体克隆的筛选与鉴定 172
第7章 外源基因的原核表达系统 189
7.1 原核表达系统的特点 189
7.2 原核细胞表达系统 198
7.3 提高外源基因表达水平的措施 216
第8章 外源基因的真核表达系统 226
8.1 真核表达系统的特点 226
8.2 酵母表达系统 227
8.3 昆虫或昆虫细胞表达系统 237
8.4 哺乳动物表达系统 244
第9章 转基因植物 254
9.1 转基因植物概述 254
9.2 植物基因转化受体系统 256
9.3 植物基因遗传转化方法 261
9.4 转基因植物的筛选与鉴定 281
9.5 提高外源基因在转基因植物中表达效率的途径 291
9.6 转基因植物的应用和展望 295
9.7 转基因植物的安全性评价 301
第10章 转基因动物 308
10.1 转基因动物发展简史 308
10.2 转基因动物技术 310
10.3 转基因动物的制备和检测 315
10.4 转基因动物研究中出现的问题及其对策 317
10.5 转基因动物技术的应用 319
10.6 转基因动物的安全性及其未来 323
第11章 基因治疗 325
11.1 分子病与基因治疗的基本概念 325
11.2 基因治疗的发展简史与现状 326
11.3 基因治疗的策略 328
11.4 基因治疗的基本程序 330
11.5 基因治疗的应用 335
11.6 基因治疗的前景 339
第12章 蛋白质工程 343
12.1 蛋白质工程的理论基础、诞生和发展 344
12.2 蛋白质工程的关键技术 358
12.3 蛋白质工程的设计思想 369