第1章 生物化学实验概述 1
1.1 实验记录与实验报告 1
1.2 生物化学实验的安全与要求 3
1.2.1 实验室纪律要求 3
1.2.2 实验室常见事故处理 4
1.3 基本实验操作 5
1.3.1 常规玻璃仪器的洗涤、干燥和存放 5
1.3.2 一般操作技术 8
1.3.3 生物样品制备 17
1.4 实验室常见仪器使用方法 19
1.4.1 锥形瓶 19
1.4.2 离心管 19
1.4.3 酒精灯 20
1.4.4 滴定管 21
1.4.5 移液管 23
1.4.6 容量瓶 24
1.4.7 比色管 26
1.4.8 可调式微量移液器 27
1.4.9 电子天平 28
1.4.10 旋转蒸发仪 29
1.4.11 凝胶成像仪 30
1.4.12 冷冻离心机 32
1.4.13 冷冻真空干燥机 33
1.4.14 分光光度计 34
第2章 糖类定性和定量分析 36
实验1 可溶性糖的硅胶G薄层层析 36
实验2 3,5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖和总糖含量 39
实验3 斐林试剂比色法测定还原糖 42
第3章 脂类 44
实验4 粗脂肪的提取和测定——索氏提取法 44
实验5 脂类染色法——苏丹Ⅲ染色法 47
实验6 油脂酸价的测定 49
实验7 脂肪碘值的测定 51
第4章 蛋白质 54
实验8 紫外吸收法测定蛋白质含量 54
实验9 Folin酚法(Lowry法)测定蛋白质的含量 57
实验10 考马斯亮蓝法(Bradford法)测定蛋白质的含量 60
实验11 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量 63
实验12 牛奶中提取酪蛋白 67
第5章 酶学实验 69
实验13 酶的活力测定及专一性实验 69
实验14 米氏常数的测定——底物浓度对酶促反应速度的影响 73
实验15 酶的抑制剂与激活剂对酶活性的影响 77
实验16 pH和温度对淀粉酶活性的影响 79
第6章 核酸提取与鉴定 82
实验17 植物基因组DNA的提取及含量测定 82
实验18 动物肝脏RNA的提取及含量测定 86
实验19 聚合酶链反应(PCR)扩增DNA及琼脂糖凝胶电泳检测 93
第7章 维生素与辅因子 96
实验20 植物和药品中VC的测定 96
实验21 原子吸收分光光度法测定茶中的铁、锌、铜含量 99
第8章 综合实验 102
实验22 尼龙固定化木瓜蛋白酶 102
实验23 人乙醛脱氢酶2(ALDH2)多态性分析 106
附录1:生物化学实验常用缓冲液的配制方法 111
附录2:生物化学实验常用试剂的配制方法 114
附录3:生物化学实验常用柱料数据及性质 122
主要参考书目 124