第一章 有毒中药研究的思路与实践 1
第一节 有毒中药研究的背景 1
一、有毒中药的研究已成为中药进入国际医药市场必须解决的关键问题 1
二、有毒中药附子、川乌、草乌的安全性研究具有明显的示范意义 2
三、有毒中药附子、川乌、草乌的安全性研究对中医药学术发展具有促进作用 2
第二节 有毒中药研究的概况 3
一、有毒中药的基本特点 3
（一）毒性成分复杂 3
（二）毒性表现多样 3
（三）毒性可以控制 3
二、有毒中药的研究简史 3
第三节 影响有毒中药的因素 5
一、药物因素 5
（一）品种 5
（二）产地 5
（三）炮制 6
（四）制剂 6
二、机体因素 6
（一）物种差异 6
（二）个体差异 6
（三）机体状态 6
三、临床应用 7
（一）依法应用 7
（二）辨证使用 7
（三）合理配伍 7
（四）剂量疗程 8
（五）用法恰当 8
（六）中西合用 9
第四节 有毒中药的研究思路 9
一、毒性物质基础 9
（一）有机类毒性物质 9
（二）无机类毒性物质 9
二、毒作用机制 10
三、控毒方法 10
（一）选用正品药材，控制毒性 11
（二）依法炮制，控制毒性 11
（三）对证用药，控制毒性 11
（四）合理配伍，控制毒性 11
（五）掌握煎服方法，控制毒性 11
第五节 附子、川乌、草乌研究的实践 12
一、毒性物质基础研究 12
（一）建立乌头类有毒中药的标准提取物 12
（二）建立乌头类有毒中药的化学库指纹谱 12
（三）采用量子化学分析乌头类有毒中药毒性成分的热力学性质 12
二、毒作用机制研究 12
（一）基础毒性研究 13
（二）毒机制研究 13
（三）毒代动力学研究 15
三、控毒方法体系研究 16
（一）选用正品药材，控制毒性 16
（二）依法炮制，控制毒性 16
（三）对证用药，控制毒性 16
（四）合理配伍，控制毒性 17
（五）延长煎煮时间，控制毒性 17
第二章 有毒中药附子、川乌、草乌的毒性物质基础研究 18
第一节 品种研究 18
一、遗传物质 18
（一）乌头属植物亚属、组的体系划分 18
（二）乌头属植物的细胞学研究 18
（三）乌头属植物的生物学研究 19
（四）乌头属植物遗传分化和遗传多样性研究 20
二、化学物质 20
第二节 标准提取物研究 20
一、提取工艺 20
（一）附子标准提取物的制备 20
（二）川乌标准提取物的制备 21
（三）草乌标准提取物的制备 21
（四）草乌叶标准提取物的制备 21
二、质量控制 21
（一）附子标准提取物的质量控制 21
（二）川乌标准提取物的质量控制 22
（三）草乌标准提取物的质量控制 23
（四）草乌叶标准提取物的质量控制 24
第三节 化学库研究 24
一、生物碱 24
（一）概述 24
（二）C19型二萜生物碱 25
二、多糖 34
三、其他成分 35
第四节 指纹谱研究 36
一、高效液相色谱法 36
（一）附子高效液相指纹图谱 37
（二）川乌高效液相指纹图谱研究 40
（三）草乌高效液相指纹图谱研究 41
二、薄层色谱法 42
（一）供试品溶液的制备 43
（二）薄层色谱扫描图谱 43
（三）薄层扫描结果个体分析 43
三、毛细管电泳法 45
（一）电泳条件 46
（二）供试品溶液的制备 46
（三）测定方法 46
（四）结果分析 46
四、气相色谱法 46
五、紫外光谱法 47
六、红外光谱法 48
（一）生川乌、生草乌、生附片的红外光谱比较 48
（二）生附片、白附片、黑顺片的红外光谱比较 49
（三）生川乌和制川乌的红外光谱比较 50
第五节 构效关系研究 51
一、药物活性构效关系 51
（一）乌头属生物碱镇痛活性的构效关系 51
（二）乌头属生物碱局部麻醉活性的构效关系 51
（三）乌头属生物碱抗炎活性的构效关系 51
二、药物毒性构效关系 52
三、计算机辅助药物设计在二萜类生物碱研究中的运用 53
第三章 有毒中药附子、川乌、草乌的基础毒性研究 62
第一节 急性毒性试验 62
一、附子 63
（一）生附子标准提取物急性毒性试验 63
（二）白附片标准提取物急性毒性试验 64
（三）黑顺片标准提取物急性毒性试验 64
（四）附子组分急性毒性试验 65
二、川乌 66
（一）生川乌标准提取物急性毒性试验 66
（二）制川乌标准提取物急性毒性试验 67
三、草乌 68
（一）生草乌标准提取物急性毒性试验 68
（二）制草乌标准提取物急性毒性试验 69
（三）制草乌总生物碱急性毒性试验 69
第二节 长期毒性试验 70
一、附子 70
（一）生附子3个月长期毒性试验 70
（二）附子炮制品6个月长期毒性试验 77
二、川乌 85
（一）生川乌3个月长期毒性试验 85
（二）制川乌6个月长期毒性试验 92
三、草乌 100
（一）生草乌3个月长期毒性试验 100
（二）制草乌6个月长期毒性试验 106
第三节 特殊毒性试验 114
一、致突变试验 114
（一）骨髓微核试验 114
（二）Ames试验 115
（三）CHL细胞染色体畸变试验 118
（四）彗星试验 121
二、生殖毒性试验 122
（一）一般生殖毒性试验 122
（二）致畸敏感期生殖毒性试验 124
（三）围生期生殖毒性试验 126
第四节 安全药理学试验 130
一、精神神经系统 130
（一）生附子急性神经毒性试验 131
（二）生草乌急性神经毒性试验 132
（三）生川乌反复给药神经毒性试验 133
（四）生草乌反复给药大鼠神经毒性试验 134
二、呼吸系统 136
（一）生附子呼吸系统毒性试验 136
（二）生草乌呼吸系统毒性试验 136
三、心血管系统 137
第四章 有毒中药附子、川乌、草乌的毒作用机制研究 139
第一节 靶器官毒性机制 140
一、心脏毒性 140
（一）小鼠急性心脏毒性试验 140
（二）大鼠急性心脏毒性试验 141
第二节 细胞毒性机制 143
一、心肌细胞毒性 143
（一）乌头碱对心肌细胞毒性的作用机制和时－量－毒关系研究 143
（二）附子双酯型生物碱对心肌细胞膜受体和能量代谢作用机制的研究 147
二、神经细胞毒性 149
（一）生附子、生川乌、生草乌对大鼠海马神经元毒性试验 150
（二）乌头碱对大脑皮质神经元毒作用机制研究 150
三、结肠间质细胞毒性机制 153
（一）小鼠结肠ICC培养方法的建立及生长对数期的确定 153
（二）乌头碱对结肠ICC毒性作用浓度和时间的确定 153
（三）乌头碱对结肠ICC形态、生物膜、内环境和能量代谢的影响 154
四、生殖细胞毒性机制 155
（一）睾丸支持细胞毒性 156
（二）睾丸间质细胞毒性 156
（三）卵巢颗粒细胞毒性 156
（四）黄体细胞毒性 157
五、肺成纤维细胞毒性机制 158
第三节 基因组学毒性机制 158
一、急性毒性研究 158
（一）生附子、生川乌、生草乌mRNA质检和质控结果 159
（二）生附子、生川乌、生草乌芯片比较数据基因GO分类 159
（三）生附子、生川乌、生草乌Pathway通路统计结果 160
（四）生附子、生川乌、生草乌急性毒性全基因表达谱芯片数据聚类 165
二、长期毒性研究 165
三、阳性基因的PCR验证 166
第四节 毒代动力学研究 167
一、吸收 167
（一）乌头碱在大鼠体内的毒代动力学研究 167
（二）新乌头碱在大鼠体内的毒代动力学研究 169
（三）次乌头碱在大鼠体内的毒代动力学研究 169
（四）附子总生物碱口服给药的毒代动力学研究 170
（五）附子总生物碱的胃肠吸收机制研究 173
二、分布 178
三、代谢 179
（一）乌头碱 179
（二）新乌头碱 181
（三）次乌头碱 182
四、排泄 182
（一）方法学建立和尿液、胆汁样品的测定方法 182
（二）胆汁及尿液中乌头碱、新乌头碱、次乌头碱的排泄检测 183
第五章 有毒中药附子、川乌、草乌的控毒方法体系研究 186
第一节 选用正品药材，控制毒性 187
一、品系不同，毒性强度有差异 187
二、产地不同，毒性大小有差别 187
（一）附子产地不同，毒性大小有差别 187
（二）制川乌产地不同，毒性大小有差别 189
第二节 依法炮制，控制毒性 189
一、炮制工艺 190
（一）附子 190
（二）川乌 197
（三）草乌 200
二、炮制辅料 204
第三节 对证用药，控制毒性 206
一、对证短期用药的毒效关系研究 207
（一）治疗脾阳虚模型的毒效关系研究 207
（二）治疗心阳虚模型的毒效关系研究 213
（三）治疗肾阳虚模型的毒效关系研究 215
（四）治疗炎症模型的毒效关系研究 222
（五）治疗痛证模型的毒效关系研究 230
二、对证长期用药的毒效关系研究 238
（一）治疗虚寒证的毒效关系研究 238
（二）治疗痹证的毒效关系研究 251
第四节 合理配伍，控制毒性 284
一、饮片配伍 285
（一）附子干姜饮片配伍的毒效关系研究 285
（二）附子大黄饮片配伍的毒效关系研究 297
（三）附子甘草饮片配伍的毒效关系研究 307
（四）附子人参饮片配伍的毒效关系研究 323
（五）川乌白芍饮片配伍的毒效关系研究 328
（六）草乌白芍饮片配伍的毒效关系研究 343
二、组分配伍 353
（一）附子各组分配伍的毒效关系研究 353
（二）附子与干姜组分配伍的毒效关系研究 363
（三）附子与大黄组分配伍的毒效关系研究 371
（四）附子与甘草组分配伍的毒效关系研究 383
（五）附子与人参组分配伍的毒效关系研究 388
（六）川乌与白芍组分配伍的毒效关系研究 391
（七）草乌与白芍组分配伍的毒效关系研究 402
三、成分配伍 409
（一）乌头碱、新乌头碱、次乌头碱与大黄素配伍的毒效关系研究 409
（二）乌头碱与大黄酸配伍的毒效关系研究 419
（三）乌头碱与甘草酸配伍的毒效关系研究 422
（四）乌头碱与甘草酸铵配伍的毒效关系研究 423
（五）乌头碱与人参皂苷Rg1配伍的毒效关系研究 425
（六）乌头碱与芍药苷配伍的毒效关系研究 429
第五节 延长煎煮时间，控制毒性 432
一、延长附子煎煮时间，控制毒性 432
（一）生附子煎煮时间、剂量与毒效的相关性研究 432
（二）白附片煎煮时间、剂量与毒效的相关性研究 433
（三）黑顺片煎煮时间、剂量与毒效的相关性研究 434
二、延长川乌煎煮时间，控制毒性 435
（一）生川乌煎煮时间、剂量与毒效的相关性研究 435
（二）制川乌煎煮时间、剂量与毒效的相关性研究 437
三、延长草乌煎煮时间，控制毒性 438
（一）生草乌煎煮时间、剂量与毒效的相关性研究 438
（二）制草乌煎煮时间、剂量与毒效的相关性研究 440
第六章 有毒中药附子、川乌、草乌的临床应用 445
第一节 概述 445
第二节 临床应用 446
一、心力衰竭 446
二、休克 448
三、心肌梗死 450
四、心律失常 453
五、病窦综合征 455
六、血栓闭塞性脉管炎 457
七、下肢静脉曲张疼痛 458
八、类风湿性关节炎 459
九、肩周炎 463
十、腰椎间盘突出症 464
十一、颈椎病 466
十二、骨质增生 468
十三、骨关节炎 470
十四、强直性脊柱炎 473
十五、坐骨神经痛 475
十六、腰腿痛 477
十七、头痛 478
十八、三叉神经痛 481
十九、面瘫 482
二十、痛经 484
二十一、癌痛 485
二十二、胃下垂 487
二十三、慢性结肠炎 489
二十四、消化性溃疡 490
二十五、便秘 493
二十六、慢性腹泻 494
二十七、胆囊炎 496
二十八、胆石症 497
二十九、慢性前列腺炎 499
三十、肾功能不全 500
三十一、主观性耳鸣 502
三十二、哮喘 504
三十三、系统性硬化症 505
三十四、梨状肌综合征 507
三十五、糖尿病性周围神经病变 509