第一章 PAP技术 1
第一节 技术方法 1
一、基本原理 2
二、双向PAP等位基因特异性扩增技术 3
三、多重剂量PAP技术 4
四、连接反应介导的PAP技术 5
五、基于PAP法的重测序技术 6
第二节 应用实例 7
一、MAP技术检测外周循环血中肿瘤突变标志物以监测非转移性乳腺癌复发 7
二、PAP结合荧光定量PCR技术（RT-PAP）检测体细胞突变 9
第三节 展望 13
第二章 ARMS技术 15
第一节 基于电泳检测的ARMS技术 15
第二节 基于荧光探针检测的ARMS技术 21
第三章 高通量测序技术 26
第一节 Roche 454测序技术 26
第二节 Illumina Solexa测序技术 29
第三节 Applied Biosystems SOLiD测序技术 32
第四节 Helicos Biosciences tSMSTM测序技术 36
第五节 Pacific Biosciences SMRT测序技术 38
第六节 Oxford Nanopore纳米孔单分子测序技术 41
第四章 数字化PCR技术 45
第一节 微球-微乳相数字化PCR技术平台 45
第二节 微阵列式数字化PCR技术平台 48
第三节 微液滴式数字化PCR技术平台 52
第五章 基于纳米金探针的可视化检测 66
第一节 耦联模板扩增反应的纳米金探针检测技术 66
第二节 耦联信号扩增反应的纳米金探针检测技术 71
第三节 基于纳米金的试纸条技术 75
第四节 基于纳米金探针的生物条形码技术 80
第五节 基于纳米金的其他检测技术 86
第六章 基于核酸侵入反应的基因突变检测技术 97
第一节 级联核酸侵入技术 97
第二节 核酸侵入反应耦联切刻内切酶信号扩增法 101
第三节 核酸侵入反应耦联纳米金探针可视化检测法 104
第四节 核酸侵入反应耦联延伸链置换信号扩增法 107
第七章 焦磷酸测序技术 112
第一节 焦磷酸测序技术原理 112
第二节 焦磷酸测序检测仪器 114
一、商品化焦磷酸测序仪 114
二、自制单通道小型焦磷酸测序仪 114
三、自制8通道焦磷酸测序仪 115
第三节 焦磷酸测序技术在基因突变检测中的应用 117
一、肿瘤分子靶向个体化治疗 117
二、病毒检测及耐药性鉴定 121
三、遗传疾病诊断 124
四、细菌耐药基因突变检测 126
第四节 展望 126
第八章 液相芯片技术 131
第一节 概述 131
一、引言 131
二、技术特点 132
第二节 原理及应用 132
一、方法原理 132
二、应用实例 137
三、展望 140
第九章 微阵列芯片技术 142
第一节 微阵列芯片技术概述 142
一、概念 143
二、特点 143
三、分类 144
四、制作技术 144
五、基本操作原理 147
第二节 铺瓦式阵列技术 150
第三节 直接等位基因特异性荧光检测技术 152
第四节 辅助寡核酸链检测技术 153
第五节 基于连接酶检测反应技术 154
第六节 基于肽核酸检测技术 155
第七节 微阵列芯片技术展望 156
一、药物基因组学与合理用药 156
二、微阵列芯片技术在合理用药中的应用前景 157
三、微阵列芯片技术检测微生物存在的问题 157
四、展望 159
第十章 COLD PCR技术 164
第一节 Full-COLD PCR技术和Fast-COLD PCR技术 164
第二节 Ice-COLD PCR技术 168
第三节 Temperature-Tolerant COLD PCR技术 171
第十一章 限制性片段长度多态性聚合酶链反应技术 177
第一节 RFLP-PCR技术 177
第二节 错配RFLP-PCR技术 180
第三节 巢式RFLP-PCR技术 182
第十二章 杂交链式反应技术 187
第一节 基本的HCR反应原理 187
第二节 HCR调控的荧光银纳米簇检测法 188
第三节 基于嵌二萘探针的HCR检测方法 191
第四节 耦联G四联体的HCR检测方法 193
第十三章 蓝白斑筛选技术 198
第一节 方法原理 198
第二节 应用实例 199
一、抗肌萎缩蛋白基因突变检测 199
二、肿瘤相关EGFR基因突变检测 201
第三节 展望 202
第十四章 液体活检技术 205
第一节 循环肿瘤DNA的检测 205
一、循环肿瘤DNA的来源与意义 205
二、循环肿瘤DNA的提取与富集 205
三、循环肿瘤DNA检测技术 206
四、循环肿瘤DNA在临床诊断检测中的应用 210
第二节 循环肿瘤细胞的检测 211
一、循环肿瘤细胞的来源与意义 211
二、循环肿瘤细胞的富集与鉴定 212
三、循环肿瘤细胞检测技术 214
四、循环肿瘤细胞在肿瘤检测中的应用 215
第三节 外泌体的检测 216
一、外泌体的来源与意义 216
二、外泌体的提取与富集 217
三、外泌体检测技术 219
四、外泌体在临床诊断检测中的应用 221