《医学细胞生物学实验 第2版》PDF下载

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  • 作  者:孙媛,程晓馨主编;王茜,马景昕,张朋副主编
  • 出 版 社:北京:科学出版社
  • 出版年份:2018
  • ISBN:9787030563316
  • 页数:200 页
图书介绍:本教材选择一些与基础和临床医学密切相关的细胞生物学实验内容,设立基本实验和综合实验。上篇介绍了每个实验的目的、基本原理、操作流程和实验结果;下篇则根据细胞生物学学科的进展和未来发展趋势,结合自身的教学和科研体验,分别归纳出可操作性较强,体现出学科间交又参透特点的综合性实验。

上篇 基本实验 1

第一章 显微镜的构造和使用 1

实验1-1普通光学显微镜的构造、使用方法及细胞基本形态结构的观察 1

实验1-2倒置相差显微镜的构造与使用 5

实验1-3显微镜测微尺的使用 8

第二章 流式细胞仪技术与应用 14

实验2-1流式细胞仪结构原理及应用 14

实验2-2流式细胞仪检测细胞周期 18

实验2-3流式细胞仪检测细胞凋亡 19

实验2-4流式细胞仪检测细胞中抗原——流式细胞术检测T淋巴细胞亚群 21

第三章 细胞器结构的观察与分离 24

实验3-1细胞器结构的观察 24

实验3-2细胞器分级分离 31

第四章 细胞化学方法和细胞化学成分显示 34

实验4-1细胞化学基本理论 34

实验4-2细胞中骨架蛋白的显示与细胞形态的观察 37

实验4-3 Feulgen法显示脱氧核糖核酸 39

实验4-4甲基绿-派洛宁显示核酸 41

实验4-5苏木素-伊红染色显示细胞核和细胞质 42

第五章 酶细胞化学 45

实验5-1酶细胞化学的基本原理 45

实验5-2碱性磷酸酶显示及用途 47

实验5-3联苯胺法显示过氧化物酶及应用 49

实验5-4詹纳斯绿显示活体细胞线粒体 50

实验5-5利用琥珀酸脱氢酶活性进行MTT检测细胞相对存活率 51

实验5-6 CCK8检测技术 53

第六章 免疫化学技术 56

实验6-1免疫酶细胞化学法检测髓母细胞瘤细胞系中P65蛋白的表达 56

实验6-2免疫荧光染色显示髓母细胞瘤细胞系中HES 1蛋白的分布 58

实验6-3免疫组织化学法检测HES 1在胃癌组织中的表达与分布 60

第七章 细胞遗传学技术 64

实验7-1人类性染色质标本的制备与观察 64

实验7-2人外周血淋巴细胞培养与染色体制备 66

实验7-3小鼠骨髓细胞染色体标本的制备与观察 69

实验7-4染色体G显带技术 70

实验7-5核型分析 74

第八章 细胞培养技术 77

实验8-1细胞培养的基本原理与技术 77

实验8-2细胞的原代培养 84

实验8-3传代细胞培养 85

实验8-4培养细胞的形态观察和计数 87

实验8-5细胞冻存、复苏与运输 90

实验8-6细胞克隆化培养 92

实验8-7细胞三维培养 94

第九章 细胞行为学 99

实验9-1细胞吞噬实验 99

实验9-2细胞融合实验 101

实验9-3细胞周期 106

实验9-4小鼠减数分裂 109

实验9-5细胞周期特定时相细胞同步化方法 113

实验9-6细胞运动的观察 116

实验9-7肿瘤细胞的迁移和侵袭试验——Transwell小室测定法 118

第十章 细胞衰老和凋亡的检测 120

实验10-1苏木素-伊红染色法显示凋亡细胞 120

实验10-2 Giemsa染色法显示凋亡细胞 122

实验10-3凋亡细胞的原位末端转移酶标记法(TUNEL法) 123

实验10-4细胞凋亡的琼脂糖凝胶电泳检测 125

实验10-5细胞衰老的检测 127

第十一章 蛋白质的分离与测定 129

实验11-1真核细胞蛋白质提取 129

实验11-2双缩脲法测定蛋白质浓度 131

实验11-3福林-酚法测定蛋白质浓度 132

实验11-4考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度 134

实验11-5蛋白质印迹免疫分析(Western blot) 135

第十二章 核酸的分离、测定与分析 139

实验12-1真核生物组织及细胞基因组DNA提取 139

实验12-2组织及细胞中RNA的提取 140

实验12-3 DNA与RNA含量测定 142

实验12-4聚合酶链反应技术(PCR)体外扩增DNA片段 143

实验12-5反转录聚合酶链反应(RT-PCR) 145

实验12-6实时定量PCR(Real time-PCR) 148

下篇 综合实验 152

第十三章 小鼠胚胎干细胞培养 152

实验13-1小鼠胚胎成纤维细胞的培养 152

实验13-2饲养层细胞的制备 154

实验13-3小鼠胚胎干细胞的分离及培养 155

第十四章IL-6剥夺诱导小鼠B细胞杂交瘤细胞系7TD1细胞凋亡、观察及检测 157

实验14-1小鼠B细胞杂交瘤细胞系7TD1细胞复苏与传代培养 158

实验14-2 7TD 1细胞的凋亡诱导(IL-6剥夺)及细胞收集 160

实验14-3 IL-6剥夺诱导7TD 1细胞凋亡的形态特征观察 161

实验14-4 IL-6剥夺诱导7TD 1细胞凋亡的DNA提取及凋亡梯状带检测 164

第十五章 观察白藜芦醇对髓母细胞瘤细胞分化、运动、凋亡的影响及相关基因的检测 168

实验15-1细胞的培养与传代 168

实验15-2白藜芦醇处理前后细胞数量和形态的观察以及免疫细胞化学染色 170

实验15-3白藜芦醇对髓母细胞瘤细胞迁移能力的影响 172

实验15-4总RNA提取和分化相关基因突触素(synaptophysin)的RT-PCR检测 173

第十六章 小鼠表皮细胞原代培养及免疫荧光检测 175

实验16-1细胞原代培养(消化法) 175

实验16-2细胞传代 176

实验16-3细胞的处理及免疫荧光法检测E-cadherin 177

实验16-4细胞的显微摄影 179

第十七章 应用基因重组技术在真核细胞中表达和检测p53基因 182

实验17-1目的基因p53 PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳检测 183

实验17-2目的基因p53片段纯化回收与重组表达载体连接、转化、筛选及重组质粒提取 184

实验17-3培养细胞转染目的基因表达载体 187

实验17-4 Western blot方法检测外源目的基因p53表达 188

附录 191

附录一 试剂浓度的表示方法及其计算 191

附录二 常用人工合成细胞培养基的种类、化学组成及适用细胞 193

附录三 实验室常用细胞系(株) 196

附录四 离心机转数与离心力的换算表 199