第一篇 生物化学与分子生物学实验基本知识 3
第一章 实验室规则及安全防护 3
第二章 实验基本操作及常用仪器 7
第三章 实验的基本要求 20
第二篇 生物化学与分子生物学实验原理及技术 29
第四章 离心技术 29
第五章 分光光度技术 34
第六章 层析技术 37
第七章 膜分离技术 49
第八章 电泳技术 52
第九章 分子克隆技术 58
第十章 聚合酶链式反应(PCR) 69
第十一章 核酸分子杂交 79
第三篇 生物化学与分子生物学实验 89
第十二章 生物化学实验 89
实验一 氨基酸的分离与鉴定 89
实验二 氨基酸和蛋白质的呈色反应 92
实验三 紫外光吸收法测定蛋白质含量 96
实验四 蛋白质的沉淀和等电点的测定 98
实验五 牛乳中蛋白质的提取与鉴定 102
实验六 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质 104
实验七 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质 107
实验八 血红蛋白的凝胶过滤 109
实验九 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量 111
实验十 影响酶活性的因素 115
实验十一 胰蛋白酶米氏常数的测定 120
实验十二 聚丙烯酰胺凝胶分离过氧化物同工酶 122
实验十三 凝胶层析法分离纯化脲酶 125
实验十四 亲和层析法从鸡蛋清中分离溶菌酶 128
实验十五 水果或蔬菜中抗坏血酸的测定(2,6-二氯酚靛酚法) 132
实验十六 碱性SDS法提取大肠杆菌质粒 134
实验十七 植物DNA的提取与测定 137
实验十八 植物总RNA的提取与分析 139
实验十九 酵母核糖核酸的分离及组分鉴定 142
实验二十 动物肝脏DNA的提取 145
实验二十一 动物肝脏RNA的制备 149
实验二十二 mRNA的分离纯化 151
实验二十三 分光光度法测定丙酮酸的含量 153
实验二十四 糖酵解中间产物的鉴定 155
实验二十五 脂肪酸的β-氧化作用 157
实验二十六 植物体内的转氨基作用 159
第十三章 分子生物学实验 161
实验二十七 PCR(聚合酶链式反应)技术扩增目的基因片段 161
实验二十八 DNA琼脂糖凝胶电泳 163
实验二十九 大肠杆菌感受态细胞的制备 165
实验三十 PCR产物的纯化 168
实验三十一 重组DNA分子连接及转化 171
实验三十二 转化菌落PCR检测 175
实验三十三 质粒DNA的酶切与琼脂糖电泳鉴定 178
实验三十四 Southern印迹杂交 182
实验三十五 Northern印迹杂交 189
实验三十六 逆转录PCR(RT-PCR) 195
第十四章 设计性实验 198
实验三十七 重要蛋白质的分离纯化 198
实验三十八 青豌豆素的分离纯化及其鉴定 199
实验三十九 卵磷脂的提取和鉴定 200
实验四十 转基因植物的PCR鉴定 201
实验四十一 mRNA的差异显示技术 202
实验四十二 土壤酶活性鉴定与分析 203
实验四十三 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达 204
主要参考文献 205
附录A 206