第一章 研究的背景、内容和目标 1
第一节 研究背景 1
第二节 研究内容与目标 2
第二章 大熊猫MHC分子标记系统的构建 3
第一节 MHC基因的分类、结构和功能 3
第二节 MHC的起源与进化 7
第三节 MHC基因的多态性及其维持机制 8
第四节 MHC在濒危动物保护生物学中的应用及存在的技术瓶颈 10
第五节 大熊猫MHC基因组结构特征解析和分子标记系统构建的方法确认与研究内容 12
第三章 大熊猫细胞系构建 14
第一节 概述 14
一、组织和细胞培养技术的发展历程 14
二、组织和细胞培养方式 15
第二节 大熊猫细胞系的构建 17
一、材料和方法 17
二、结果 22
三、讨论 24
四、结论 25
第四章 大熊猫基因组BAC文库构建 26
第一节 概述 26
第二节 大熊猫基因组BAC文库构建的精细实验操作 29
一、材料 29
二、方法 30
第三节 结果 39
一、大熊猫基因组BAC文库的特征 39
二、大熊猫BAC文库的PCR筛选 40
三、BAC克隆的稳定性检测结果 41
第四节 讨论 41
第五节 结论 43
第五章 大熊猫Ⅱ类MHC基因组的物理图谱构建 44
第一节 概述 44
第二节 材料和方法 45
一、材料 45
二、方法 47
第三节 结果 51
第四节 讨论 52
第五节 结论 54
第六章 大熊猫Ⅱ类MHC基因组的染色体定位 55
第一节 概述 55
第二节 材料和方法 56
一、材料 56
二、方法 57
第三节 结果 60
第四节 讨论 61
第五节 结论 61
第七章 大熊猫Ⅱ类MHC基因组的结构特征解析 63
第一节 概述 63
第二节 材料和方法 64
一、材料 64
二、方法 65
第三节 结果 68
第四节 讨论 75
第五节 结论 79
第八章 大熊猫MHC基因快速分离方法（HURRAH）的创建及其在相关研究中的应用 80
第一节 研究背景 80
第二节 大熊猫HURRAH方法的创建 82
一、材料 82
二、方法 84
第三节 结果 97
第四节 讨论 101
第五节 结论 102
第九章 大熊猫Ⅱ类MHC基因分型技术的建立及其应用 103
第一节 研究背景 103
第二节 大熊猫Ⅱ类MHC基因分型技术的建立 103
一、材料 103
二、方法 105
第三节 结果 112
第四节 讨论 126
第五节 结论 131
第十章 野生大熊猫Ⅱ类MHC基因的适应性变异和种群的进化历史 133
第一节 研究背景 133
一、研究现状概况 134
二、研究的目的及意义 136
第二节 材料和方法 137
一、材料 137
二、方法 138
第三节 结果 147
第四节 讨论 163
第五节 结论 168
第十一章 大熊猫Ⅰ类MHC基因的分离及分子标记系统的构建 170
第一节 研究背景 170
第二节 大熊猫Ⅰ类MHC基因的分离 170
一、材料 171
二、方法 171
第三节 结果 180
第四节 讨论 183
第五节 结论 183
第十二章 野生大熊猫Ⅰ类MHC基因的适应性变异和种群的进化历史 185
第一节 研究背景 185
第二节 材料和方法 185
一、材料 185
二、方法 186
第三节 结果 193
第四节 讨论 207
第五节 结论 210
第十三章 大熊猫环境适应性进化的微卫星辅佐研究 212
第一节 文献微卫星引物的选取和实验方法 212
一、材料 212
二、实验方法 213
第二节 结果 215
第三节 讨论 219
第十四章 大熊猫保护工程中的若干建议 221
一、构建大熊猫的细胞系，保护遗传资源库，为相关研究提供可靠的材料平台 221
二、对大熊猫的2个亚种实行分开管理，有效避免远交衰退问题的发生 222
主要参考文献 226
彩版 259