第一章 醌酶简史 1
第一节 PQQ的发现及分布 2
第二节 TPQ的发现及分布 5
第三节 TTQ的发现及分布 7
第四节 醌酶辅基的生物学意义 8
参考文献 11
第二章 产生醌酶的甲基营养菌 17
第一节 利用甲醇的细菌 18
一、概述 18
二、甲醇的代谢 20
第二节 转化甲基胺的细菌 22
一、甲基胺的代谢 23
二、甲醛的代谢 24
第三节 甲基营养菌的遗传性质与应用 30
一、遗传性质 30
二、合成单细胞蛋白 31
三、净化环境 35
参考文献 38
第三章 PQQ的纯化及性质 44
第一节 纯化 44
一、由培养液纯化PQQ 45
二、由酶或细胞纯化PQQ 47
第二节 定性与定量分析 48
一、高效液相色谱法 48
二、生物检测法 50
三、非酶系统氧化还原循环法 53
四、免疫测定法 54
第三节 还原与水合 55
一、还原型PQQ 56
二、氧化型与还原型PQQ的中点电位 59
三、水合型PQQ 59
第四节 PQQ的衍生物 60
一、PQQ与醇的加成 60
二、PQQ与尿素和氨的加成 61
三、PQQ与醛、酮的加成 62
四、PQQ与氨基酸的加成 62
参考文献 65
第四章 甲醇脱氢酶与PQQ 69
第一节 酶的纯化与鉴定 70
一、纯化 70
二、鉴定 73
第二节 酶的性质 75
一、辅基PQQ 75
二、电子受体 76
三、底物专一性 82
四、激活剂与抑制剂 84
五、光谱特性 84
第三节 酶作用机理 84
一、催化循环 86
二、酶促反应 86
第四节 酶的结构 89
一、螺旋浆(propeller)结构 89
二、活性位点结构 91
三、酶蛋白的氨基酸序列 93
第五节 其它含PQQ的醌酶 97
一、醇脱氢酶 97
二、葡萄糖脱氢酶 98
三、用醌酶制作生物传感器 99
参考文献 100
第五章 甲胺脱氢酶与TTQ 106
第一节 酶的纯化 109
一、纯化程序 109
二、酶活性测定 113
三、酶活性染色 114
四、醌酶蛋白染色 114
第二节 酶的性质 115
一、稳定性 116
二、最适pH 116
三、底物专一性 117
四、静电及免疫特性 117
五、光谱性质 118
第三节 酶的结构 122
一、一级结构 122
二、高级结构 124
三、酶基因及相关基因的结构 127
第四节 酶反应机制 128
一、还原反应 128
二、氧化反应 133
三、pH和单价阳离子对酶促反应的影响 135
参考文献 138
第六章 铜胺氧化酶与TPQ 147
第一节 酶的纯化与鉴定 149
一、纯化 149
二、鉴定 150
第二节 酶的生物学特性 153
一、辅基的确定 153
二、光谱分析 156
三、化学性质 158
四、催化机制 158
第三节 辅基TPQ 160
一、结构 160
二、生物合成 161
第四节 酶的结构 161
第五节 酶在保健和医药方面的应用 164
一、代谢调控方面 164
二、医药方面 165
参考文献 167
第七章 微生物产生PQQ 174
第一节 PQQ的生物合成 176
一、细菌合成PQQ 176
二、PQQ的合成前体 177
三、PQQ的合成路线 179
第二节 影响PQQ合成的因子 180
一、菌种 180
二、碳源 182
三、亚铁(Fe2+)及镁(Mg2+)离子 183
四、外源PQQ 185
五、氨基酸与氮源 186
六、微量元素与维生素 187
第三节 含TTQ、TPQ醌酶的生成 188
一、含TTQ的醌酶 188
二、含TPQ的醌酶 189
参考文献 192
第八章 醌酶辅基合成的分子遗传 198
第一节 部分pqq基因的分离与克隆 199
一、PQQ-突变株的分离 199
二、基因库的构建 201
三、转化子与PQQ-突变株的结合 202
四、质粒的亚克隆 203
五、质粒pSS2的pqq基因图谱 204
六、pqq基因的核苷酸顺序及定位 207
七、pqq基因的表达 208
第二节 嗜有机甲基杆菌PQQ合成基因 209
一、DSM760菌的诱变及PQQ-突变株的分离 210
二、与质粒R151能互补突变株的遗传分析 212
三、与质粒R151不能互补突变株的遗传分析 212
第三节 强制甲基杆菌PQQ合成基因 214
一、PQQ-突变株的分离与互补类群的确定 214
二、突变株的生理特性 215
三、pqqDGCBA基因及其部分核苷酸序列 216
第四节 肺炎杆菌pqq基因及其编码的蛋白 219
一、基因产物的确定 219
二、几种细菌pqq基因的比较 221
三、部分pqq基因的核苷酸序列 223
四、pqqF基因及其它 224
第五节 TTQ与TPQ的合成 225
一、TTQ 226
二、TPQ 227
参考文献 228
第九章 PQQ的生物学功能与应用 233
第一节 刺激微生物和植物生长 234
第二节 PQQ的营养价值 237
一、影响鼠的生长繁殖 238
二、促进胞外基质(matrix)成熟 239
三、提高免疫功能 240
第三节 清除自由基 240
一、释放嗜中性白细胞过氧化物 242
二、清除红细胞中过氧化物 243
第四节 促进神经细胞生长、防止乙醛中毒 248
一、促进神经细胞生长 248
二、防止乙醛中毒 249
参考文献 251