实验计划 1
第1章 动物细胞培养技术 3
1-1 动物细胞培养实验的器材准备 4
1-2 动物细胞培养用液的配制及过滤除菌 7
1-3 培养细胞的形态观察、大小测定和照相记录 10
1-4 动物细胞的传代培养 14
1-5 动物细胞的原代培养 17
1-6 培养细胞的分裂指数和生长曲线测定 21
1-7 培养细胞的活性测定 24
1-8 培养细胞的染色体标本制备与分带技术 27
1-9 培养细胞的超低温冻存与复苏 29
第2章 杂交瘤技术与单克隆抗体制备 33
2-1 抗原制备与小鼠免疫 34
2-2 饲养层细胞的制备 37
2-3 骨髓瘤细胞的制备 39
2-4 免疫脾细胞的制备 40
2-5 细胞融合和杂交瘤筛选 42
2-6 特异性单克隆抗体的检测 45
2-7 杂交瘤细胞的克隆化培养(有限稀释法) 47
2-8 单克隆抗体的制备与分离纯化 49
2-9 杂交瘤细胞的保存 51
第3章 小鼠胚胎干细胞体外培养和分化技术 53
3-1 小鼠超数排卵 54
3-2 小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)饲养层的制备 55
3-3 小鼠胚胎干细胞(mESC)的分离培养与传代 60
3-4 小鼠胚胎干细胞(mESC)的鉴定 64
3-5 小鼠胚胎干细胞的体外分化实验 72
3-6 诱导多潜能干细胞(iPSC)的制备 74
第4章 植物组织与细胞培养技术 77
4-1 植物组织与细胞培养基的配制 78
4-2 胡萝卜愈伤组织诱导及继代培养 81
4-3 胡萝卜愈伤组织的“器官分化”与“体细胞胚发生” 83
4-4 马铃薯茎尖培养 85
4-5 胡萝卜悬浮细胞培养 86
4-6 胡萝卜人工种子制作 88
4-7 大麦原生质体的分离与电融合 89
第5章 真核细胞转基因技术和检测技术 93
5-1 磷酸钙沉淀介导的转基因技术 94
5-2 阳离子聚合物介导的转基因技术 95
5-3 脂质体介导的转基因技术 96
5-4 基因枪法介导的转基因技术 98
5-5 细胞拆合和细胞重组 100
5-6 流式细胞仪分析技术 101
5-7 激光扫描共聚焦显微镜的使用和观察 104
5-8 细胞凋亡的诱导及生化检测 107
附录1 缩略词表 109
附录2 常用培养基和试剂的配制 110
附录3 常用实验仪器 114
参考书目 115