《生物化学实验指导》PDF下载

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  • 作  者:林燕燕,林丽斌著
  • 出 版 社:北京:北京大学医学出版社
  • 出版年份:2010
  • ISBN:9787811168839
  • 页数:170 页
图书介绍:本书主要侧重于给学生以基本的实验方法和技能的训练,让学生了解并掌握生物化学的四大基本实验方法,即:分光光度法、离心法、层析法和电泳法。同时也注意引进一些新近发展起来的、重要的生物化学及分子生物学研究技术及临床常用的生化检验实验,作为学生学习其他专业课程的准备。

第一篇 生物化学实验基础 2

第一章 实验的准确性 2

第一节 单位和量 2

第二节 准确测量 5

第二章 实验要求 7

第三章 生物化学实验基本操作、实验样品的制备 10

第一节 生物化学实验基本操作 10

第二节 实验样品的制备 16

第四章 生物化学实验基本技术及原理 20

第一节 分光光度技术 20

第二节 离心技术 24

第三节 电泳技术 28

第四节 层析技术 33

第五章 分子生物学基本技术原理 38

第一节 DNA克隆技术基本原理 38

第二节 聚合酶链式反应(PCR) 46

第三节 分子杂交 53

第二篇 基本生化实验 61

实验一 可见光分光光度计的使用 61

实验二 蛋白质等电点测定 66

实验三 SDS-PAGE测定蛋白质的相对分子量 68

实验四 碱性磷酸酶Km值的测定 72

实验五 酶作用专一性及激活剂、抑制剂对酶活性的影响 74

实验六 氨基酸的分离鉴定——纸层析法 77

实验七 蛋白质的盐析作用 79

实验八 蛋白质的定量测定(紫外分光光度法) 82

实验九 维生素C的测定(2,4一二硝基苯肼法) 84

实验十 果胶的提取 87

实验十一 胡萝卜素柱层析分离法 89

第三篇 分子克隆技术基础实验 95

实验一 真核生物基因组DNA的制备(苯酚法) 95

实验二 质粒DNA的制备(碱变性法) 97

实验三 DNA与RNA含量测定 99

实验四 限制性内切酶对质粒DNA的酶切作用 100

实验五 琼脂糖凝胶电泳分离DNA 102

实验六 动物组织总RNA的提取 104

实验七 聚合酶链反应(PCR)技术体外扩增DNA 106

实验八 感受态细菌的制备及质粒DNA的转化 109

实验九 DNA的体外重组(A-T连接) 112

第四篇 临床生化检测 117

实验一 血糖测定(邻甲苯胺法) 117

实验二 激素对血糖浓度的影响 119

实验三 葡萄糖耐量实验 123

实验四 肝糖原的提取和鉴定 125

实验五 运动对尿中乳酸含量的影响 127

实验六 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白 129

实验七 心肌、肝、肾组织乳酸脱氢酶同工酶的电泳分离 135

实验八 血清淀粉酶测定(碘-淀粉比色法) 137

实验九 血清总胆固醇测定 139

实验十 血清三酰甘油酶法测定 141

实验十一 血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定(赖氏法) 143

实验十二 血清钾、钠测定(离子选择电极法) 146

实验十三 乙型肝炎两对半测定(ELISA法) 149

实验十四 乙型肝炎病毒核酸扩增荧光测定 152

附录 157

附录一 化学试剂分级 157

附录二 体积分数酸、碱溶液的配制 157

附录三 氨基酸的一些物理常数 158

附录四 气体干燥剂 159

附录五 液体干燥剂 159

附录六 易变质及需要特殊方法保存的试剂 160

附录七 常用缓冲溶液的配制 160

附录八 分子生物学实验中常用试剂的配制 167

附录九 细菌的保存 168

附录十 重铬酸洗液的配制与再生 168

参考资料 170