第一部分 植物细胞生理和细胞信号转导 3
1植物细胞的活体染色与细胞死活鉴定 3
2植物组织(细胞)化学染色技术 6
2.1核酸的组织化学鉴定 7
2.1.1孚尔根法鉴定DNA 7
2.1.2甲基绿-派罗宁法鉴定DNA、RNA 9
2.2酶的组织化学鉴定 9
2.2.1多酚氧化酶染色法 9
2.2.2细胞色素氧化酶染色法 11
2.2.3酸性磷酸酯酶染色法 12
2.2.4三磷酸腺苷酶染色法 13
2.2.5转基因植物的β-葡萄糖苷酸酶(GUS)活性的组织化学鉴定 14
3植物细胞荧光检测技术 16
3.1植物肌动蛋白细胞骨架的荧光标记 17
3.2植物微管蛋白的免疫荧光染色 18
3.3细胞核的荧光标记 19
3.4显微注射荧光探针法研究植物细胞间的共质体通讯 21
4植物活细胞中自由钙的检测 23
4.1气孔保卫细胞中游离钙浓度的测定 25
4.2植物花粉管胞质游离钙浓度的测定 26
5荧光探针法测定植物细胞内pH的变化 28
参考文献 30
第二部分 植物水分生理和矿质营养 33
6压力室法测定植物组织水势 33
7溶液渗透浓度测定仪测定植物组织渗透势的方法 37
8用CB-1301型稳态气孔计测定叶片蒸腾速率和气孔导度 40
9植物叶片气孔运动的调节 43
10植物的溶液培养及缺素诊断 45
11植物根系活力的测定(TTC法) 50
12硝酸还原酶活性测定 52
13 H+-ATPase活性测定 54
13.1质膜H+-ATPase活性的测定 54
13.2液泡膜H+-ATPase活性的测定 56
14原子吸收光谱测定植物中K+含量 59
15测定植物全细胞跨膜钾离子流的膜片钳技术 61
参考文献 66
第三部分 植物的光合作用和呼吸代谢 69
16叶绿体色素的提取和定量分析 69
17红外线CO2仪测定叶片的光合速率、呼吸速率以及CO2补偿点 73
18氧电极法测定叶片组织和分离叶绿体的光合速率和呼吸速率 78
18.1绿色植物叶片组织的光合放氧速率和呼吸速率测定 81
18.2分离叶绿体的光合放氧速率测定 83
19离体叶绿体的光还原反应 87
20离体线粒体的氧化作用和磷酸化作用 89
21二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)羧化活性的测定 93
21.1分光光度法 93
21.2同位素法 95
22 PEP羧化酶活性的测定 97
参考文献 100
第四部分 植物激素和次生物质检测 103
23植物激素提取和分析常识 103
24植物细胞分裂素类物质的分离提取 106
25 HPLC-ELISA法测定细胞分裂素 109
26植物激素乙烯的气相色谱法测定 113
27 ABA免疫组织化学定位模型实验 116
28生长素的生理效应及生物鉴定法 121
28.1用芽鞘伸长法测定生长素类物质的浓度和效价 121
28.2用绿豆根形成法测定生长素类物质的浓度或效价 122
29赤霉素的生物测定 125
30赤霉素对α-淀粉酶的诱导形成 129
31细胞分裂素对菜豆叶片生长和衰老的效应 131
32生长素和乙烯对叶片脱落的效应 134
33分光光度法测定烟碱含量 136
33.1紫外分光光度法 137
33.2萃取分光光度法 139
参考文献 141
第五部分 植物生长发育及其调控 145
34叶片培养——植物组织培养中的脱分化与再分化过程 145
35植物细胞薄层培养 149
36植物细胞悬浮培养 152
37拟南芥叶肉细胞原生质体的分离、培养及应用 155
38拟南芥的遗传转化——浸蘸法 160
39日本牵牛开花的光周期诱导与成花信号转移 165
40植物成花刺激物的传递 167
41花粉萌发和花粉活力的测定 169
41.1花粉萌发的测定 169
41.2花粉活力的测定 170
41.2.1 TTC显色法 170
41.2.2 I2-KI染色测定法 171
41.2.3过氧化物酶法 171
42种子生活力测定 173
42.1溴麝香草酚蓝(BTB)法 173
42.2氯化三苯基四氮唑(TTC)法 174
42.3红墨水染色法 175
42.4荧光法 175
43种子萌发的调控 177
43.1光质对种子萌发的影响 177
43.2外源植物激素对种子萌发的影响 178
44拟南芥发育缺陷突变体mt50的表型观察 180
参考文献 183
第六部分 植物逆境生理 187
45植物游离脯氨酸含量的测定 187
46甜菜碱含量测定 189
47植物保护酶(SOD, POD, CAT)活性测定 191
47.1 SOD活性测定——NBT法 191
47.2过氧化氢酶活性的测定 193
47.3过氧化物酶活性的测定 194
48 H2O2含量的测定和组化定位检测 197
48.1 H2 O2含量的测定 197
48.1.1分光光度计法 197
48.1.2荧光分光光度计法 198
48.2过氧化氢组化定位检测——DAB染色法 199
49植物组织中丙二醛含量测定 201
50电导仪法测定植物细胞质膜透性 203
51盐胁迫对拟南芥盐敏感突变体生长的影响 205
52 RD29A-GUS转基因植物在非生物胁迫下的基因表达分析 210
53植物组织电阻和电位的测定 213
参考文献 216
附录 217
一、取样及植物材料处理的原则 217
二、计量单位 218
三、常用缓冲液 220
四、常用植物生长调节物质主要性质 226
五、组织培养常用培养基配方 227
参考文献 230